【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及細胞生產(chǎn)領(lǐng)域，特別涉及一種歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法及歐莫撲拜單抗原液。
技術(shù)介紹
1、在生物制藥中，"原液"(或稱“原料藥”)指的是經(jīng)過細胞培養(yǎng)、收獲、純化等步驟后獲得的尚未進行最終制劑的藥物活性成分，原液還需要進一步加工，例如加入輔料、稀釋、灌裝等，制備成最終可供臨床使用的藥物形式。
2、目前原液生產(chǎn)中，比如歐莫撲拜單抗原液生產(chǎn)工藝涉及復(fù)雜的細胞培養(yǎng)和純化過程，盡管這類工藝已經(jīng)相當成熟，但仍存在一些潛在的缺點和問題，常見的包括以下幾點：生產(chǎn)成本高、純化步驟復(fù)雜、工藝復(fù)雜，易發(fā)生變異且長期的細胞培養(yǎng)過程中，細胞可能出現(xiàn)突變或基因表達變化，導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定的問題。同時，產(chǎn)量受限且歐莫撲拜單抗原液的長期儲存可能受到溫度和輔料影響，可能需要低溫儲存，增加運輸和儲存的成本和復(fù)雜性。
3、總體來說，歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)工藝由于其工藝的復(fù)雜性和高要求，生產(chǎn)成本、產(chǎn)品一致性、質(zhì)量控制等方面仍然存在潛在挑戰(zhàn)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的主要目的是提出一種歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法及歐莫撲拜單抗原液，旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)工藝由于其工藝的復(fù)雜性和高要求，生產(chǎn)成本、產(chǎn)品一致性、質(zhì)量控制等方面仍然存在問題。
2、本專利技術(shù)提供了一種歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，所述歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法包括以下步驟：
3、s10、提供細胞，將所述細胞進行細胞復(fù)蘇、細胞擴增、灌流培養(yǎng)，得細胞培養(yǎng)液；
4、s20、對所
5、s30、將所述純化后的中間產(chǎn)品與輔料混合，得歐莫撲拜單抗原液。
6、在一些實施方式中，步驟s10中，所述細胞擴增的擴增步驟包括：
7、s101、提供細胞，將所述細胞復(fù)蘇、得復(fù)蘇后細胞液；
8、s102、將所述復(fù)蘇后細胞液在cd-cho傳代培養(yǎng)基中進行n-5至n-4代培養(yǎng)，進行第一次細胞擴增，得第一次細胞擴增后細胞液；
9、s103、將所述第一次細胞擴增后細胞液在cd-cho傳代培養(yǎng)基中進行n-3代培養(yǎng)，進行第二次細胞擴增，得第二次細胞擴增后細胞液；
10、s104、將所述第二次細胞擴增后細胞液在actipro傳代培養(yǎng)基中進行n-2代培養(yǎng)，進行第三次細胞擴增，得第三次細胞擴增后細胞液；
11、s105、將所述第三次細胞擴增后細胞液在actipro傳代培養(yǎng)基中進行n-1代培養(yǎng)，進行第四次細胞擴增，得細胞培養(yǎng)液。
12、在一些實施方式中，步驟s101中，步驟s101中，復(fù)蘇后細胞液的細胞密度為(0.90～2.80)×106cells/ml，和/或；
13、復(fù)蘇后細胞液的細胞活率為大于等于85％。
14、在一些實施方式中，第一次細胞擴增后細胞液的細胞密度為(1.70～5.00)×106cells/ml，和/或；
15、第一次細胞擴增后細胞液的細胞活率大于等于90％，和/或；
16、第二次細胞擴增后細胞液的細胞密度為(1.70-5.00)×106cells/ml，和/或；
17、第二次細胞擴增后細胞液的細胞活率大于等于90％，和/或；
18、第三次細胞擴增后細胞液的細胞密度為(1.70-5.00)×106cells/ml，和/或；
19、第三次細胞擴增后細胞液的細胞活率大于等于90％，和/或；
20、第四次細胞擴增后細胞液的細胞密度為(3.00-6.50)×106cells/ml，和/或；
21、第四次細胞擴增后細胞液的細胞活率大于等于90％。
22、在一些實施方式中，步驟s10中，所述灌流培養(yǎng)的步驟包括：選取細胞擴增后的細胞中作為初始細胞接種在培養(yǎng)基中在36～37℃進行培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中多次補加不同培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，直至細胞密度達到(35.0～50.0)×106cells/ml時，降溫至33～34℃繼續(xù)培養(yǎng)，得細胞培養(yǎng)液。
23、在一些實施方式中，選取細胞擴增后的細胞中作為初始細胞中，所述初始細胞的細胞密度為(0.70～1.30)×106cells/ml。
24、在一些實施方式中，步驟s20中：所述收獲包括atf收獲。
25、在一些實施方式中，步驟s20中，純化步驟包括：經(jīng)收獲后上清液進行親和層析捕獲產(chǎn)品，得捕獲產(chǎn)品；將所述捕獲產(chǎn)品經(jīng)滅活、多次去除雜質(zhì)后獲得純化后的中間產(chǎn)品。
26、在一些實施方式中，步驟s30中，所述輔料為l-組氨酸、冰醋酸、蔗糖和聚山梨酯80。
27、本專利技術(shù)還提供一種歐莫撲拜單抗原液，所述歐莫撲拜單抗原液由如上任意一項歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法生產(chǎn)得到。
28、本專利技術(shù)的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法通過連續(xù)流工藝生產(chǎn)，細胞密度高，細胞活率維持更優(yōu)，生產(chǎn)周期長，因而產(chǎn)量更高；灌流培養(yǎng)為蛋白表達提供更優(yōu)的微環(huán)境，且表達的目標蛋白可以及時收獲，質(zhì)量更優(yōu)。
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1.一種歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法包括以下步驟：
2.如權(quán)利要求1所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟S10中，所述細胞擴增的擴增步驟包括：
3.如權(quán)利要求2所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟S101中，復(fù)蘇后細胞液的細胞密度為(0.90～2.80)×106cells/mL，和/或；
4.如權(quán)利要求2所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，
5.如權(quán)利要求1所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟S10中，所述灌流培養(yǎng)的步驟包括：選取細胞擴增后的細胞作為初始細胞接種在培養(yǎng)基中在36～37℃進行培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中多次補加不同培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，直至細胞密度達到(35.0～50.0)×106cells/ml時，降溫至33～34℃繼續(xù)培養(yǎng)，得細胞培養(yǎng)液。
6.如權(quán)利要求5所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，選取細胞擴增后的細胞中作為初始細胞中，所述初始細胞的細胞密度為(0.70～1.30)×106cells/ml。
7.如
8.如權(quán)利要求1所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟S20中，所述純化步驟包括：經(jīng)收獲后的上清液進行親和層析捕獲產(chǎn)品，得捕獲產(chǎn)品；將所述捕獲產(chǎn)品經(jīng)滅活、多次去除雜質(zhì)后獲得純化后的中間產(chǎn)品。
9.如權(quán)利要求1所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟S30中，所述輔料為L-組氨酸、冰醋酸、蔗糖和聚山梨酯80。
10.一種歐莫撲拜單抗原液，其特征在于，所述歐莫撲拜單抗原液由權(quán)利要求1～9中任意一項歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法生產(chǎn)得到。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法包括以下步驟：
2.如權(quán)利要求1所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟s10中，所述細胞擴增的擴增步驟包括：
3.如權(quán)利要求2所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟s101中，復(fù)蘇后細胞液的細胞密度為(0.90～2.80)×106cells/ml，和/或；
4.如權(quán)利要求2所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，
5.如權(quán)利要求1所述的歐莫撲拜單抗原液的生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟s10中，所述灌流培養(yǎng)的步驟包括：選取細胞擴增后的細胞作為初始細胞接種在培養(yǎng)基中在36～37℃進行培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中多次補加不同培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，直至細胞密度達到(35.0～50.0)×106cells/ml時，降溫至33～34℃繼續(xù)培養(yǎng)，得細胞培養(yǎng)液。<...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：薛群，張春英，趙元曦，寇天賜，沈菊平，
申請(專利權(quán))人：北海康成蘇州生物制藥有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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