【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于生物資源化利用，涉及一種改進(jìn)的微藻培養(yǎng)方法，具體為利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法及應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、微藻是一種新興的生物能源來源，其優(yōu)勢在于生長快、油脂含量高且不占用耕地。而利用微藻規(guī)模化生產(chǎn)生物柴油尚處于研究試驗(yàn)階段，暫未能實(shí)現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。尋找適合的產(chǎn)油微藻種質(zhì)資源，以及在提高大規(guī)模培養(yǎng)純度和效率的前提下降低生產(chǎn)成本，是微藻生物柴油實(shí)現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)過程中需要解決的重要問題。
2、高油脂含量的微藻是生產(chǎn)生物柴油的基礎(chǔ)，現(xiàn)有技術(shù)中大部分微藻的油脂含量占細(xì)胞干重的20～50％，如：已實(shí)現(xiàn)規(guī)模化培養(yǎng)的小球藻和斜生柵藻，其油脂含量分別為28～32％和22～29％。因此，如何提高微藻細(xì)胞中的油脂含量成為制約微藻生物柴油規(guī)模化生產(chǎn)的關(guān)鍵問題。目前，提高微藻油脂含量的途徑包括基因改造、營養(yǎng)饑餓誘導(dǎo)、化學(xué)添加劑刺激等方法。然而，這些方法在實(shí)際應(yīng)用中存在操作復(fù)雜、成本高、環(huán)境不友好等缺陷。因此，開發(fā)經(jīng)濟(jì)、高效、環(huán)保的方法來提高微藻油脂含量成為亟待解決的技術(shù)難題。
3、中藥渣是中藥加工過程中產(chǎn)生的廢棄物，其主要成分為植物纖維、蛋白質(zhì)、碳水化合物和少量的活性成分。長期以來，中藥渣一般直接作為廢棄物處理，或用于堆肥和飼料，但其并未得到充分利用。而利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的研究尚未見到報道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、解決的技術(shù)問題：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，通過在微藻培養(yǎng)過程中添加中藥渣水提液，一方面顯著提高微藻細(xì)胞油脂含量，另一方面實(shí)現(xiàn)中藥渣的資源化再利用，
2、技術(shù)方案：利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，所述方法包括以下步驟：
3、s1、制備中藥渣水提液
4、將來源于江蘇中興藥業(yè)有限公司的中藥渣干燥后和水按重量體積比g:ml＝1:10-20混合，煮沸30-60min，200目濾網(wǎng)過濾，得到中藥渣水提液；
5、s2、微藻培養(yǎng)
6、將s1制得的中藥渣水提液與tap培養(yǎng)基按體積比1:1-2混合均勻，加入微藻培養(yǎng)5-7天，培養(yǎng)結(jié)束后，室溫離心5000-8000rpm、5-8分鐘，獲得藻泥，進(jìn)一步通過冷凍干燥法獲得藻粉，測定微藻細(xì)胞油脂含量。
7、優(yōu)選的，s1中的中藥渣來源包括生產(chǎn)參梅養(yǎng)胃顆粒、午時茶顆粒或參芪健胃顆粒的殘留藥渣，以上中藥渣均來自江蘇中興藥業(yè)有限公司。
8、優(yōu)選的，s2中的微藻包括小球藻(chlorela?sp.)和斜生柵藻(scenedesmussp.)。
9、優(yōu)選的，s2中tap培養(yǎng)基的組分為：0.38g/l的nh4cl，0.10g/l的mgso4·7h2o，0.05g/l的cacl2·2h2o，0.11g/l的k2hpo4，0.06g/l的kh2po4，0.05g/l的乙二胺四乙酸二鈉鹽，22mg/l的znso4·7h2o，11mg/l的h3bo3，5mg/l的mncl2·4h2o，5mg/l的feso4·7h2o，1.5mg/l的cocl2·6h2o，1.5mg/l的cuso4·5h2o，1mg/l的(nh4)6mo7o24·4h2o，2.42g/l的氨基丁三醇，1ml/l的醋酸。
10、優(yōu)選的，s2中微藻培養(yǎng)條件為：溫度25±1℃，光照強(qiáng)度60±5μmol?photons/m2/s，光周期為12小時光照/12小時黑暗，搖床轉(zhuǎn)速設(shè)定為140±10轉(zhuǎn)/min。
11、優(yōu)選的，s2中測定微藻細(xì)胞油脂含量的方法，包括以下步驟：
12、a、稱取藻粉，重量計為g1，加入體積比為1:2:0.8的氯仿-甲醇-水，超聲提取藻粉中的油脂；
13、b、步驟a提取液離心、收集上清液，重復(fù)提取至藻粉呈灰白色；
14、c、合并上清液，加入氯仿和水，將氯仿-甲醇-水的體積比調(diào)整至1:1:0.9，離心后取下層液體；
15、d、將步驟c獲得的液體吹干至恒重，重量計為g2，則藻細(xì)胞中的油脂含量公式為：油脂含量＝g2÷g1×100％。
16、優(yōu)選的，所述方法對小球藻油脂含量提高率為52％以上，對斜生柵藻油脂含量提高率為34％以上。
17、以上任一所述方法在利用微藻規(guī)模化生產(chǎn)生物柴油中的應(yīng)用。
18、以上任一所述方法在實(shí)現(xiàn)中藥渣資源化再利用中的應(yīng)用。
19、以上任一所述方法在開發(fā)可持續(xù)生物能源中的應(yīng)用。
20、有益效果：(1)本專利技術(shù)所述方法利用中藥渣水提液中豐富的植物活性成分，調(diào)節(jié)微藻代謝途徑，促進(jìn)微藻的油脂合成，顯著提高微藻油脂含量；(2)所述方法選用特定的微藻種類，并在培養(yǎng)過程添加中藥渣水提液，實(shí)現(xiàn)了微藻油脂最佳的累積效果，確保油脂生產(chǎn)的效率和可持續(xù)性；(3)所述方法一方面顯著提高微藻細(xì)胞油脂含量，另一方面實(shí)現(xiàn)中藥渣的資源化再利用，從而減少中藥行業(yè)的廢棄物處理壓力；(4)所述方法為生物柴油等可持續(xù)生物能源的開發(fā)應(yīng)用提供了新思路。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，S1中的中藥渣來源包括生產(chǎn)參梅養(yǎng)胃顆粒、午時茶顆粒或參芪健胃顆粒的殘留藥渣。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，S2中的微藻包括小球藻(Chlorelasp.)和斜生柵藻(Scenedesmussp.)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，S2中TAP培養(yǎng)基的組分為：0.38g/L的NH4Cl，0.10g/L的MgSO4·7H2O，0.05g/L的CaCl2·2H2O，0.11g/L的K2HPO4，0.06g/L的KH2PO4，0.05g/L的乙二胺四乙酸二鈉鹽，22mg/L的ZnSO4·7H2O，11mg/L的H3BO3，5mg/L的MnCl2·4H2O，5mg/L的FeSO4·7H2O，1.5mg/L的CoCl2·6H2O，1.5mg/L的CuSO4·5H2O，1mg/L的(NH4)6Mo7O24·4H2
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，S2中微藻培養(yǎng)條件為：溫度25±1℃，光照強(qiáng)度60±5μmol?photons/m2/s，光周期為12小時光照/12小時黑暗，搖床轉(zhuǎn)速設(shè)定為140±10轉(zhuǎn)/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，S2中測定微藻細(xì)胞油脂含量的方法，包括以下步驟：
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，所述方法對小球藻油脂含量提高率為52％以上，對斜生柵藻油脂含量提高率為34％以上。
8.權(quán)利要求1-7任一所述方法在利用微藻規(guī)模化生產(chǎn)生物柴油中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1-7任一所述方法在實(shí)現(xiàn)中藥渣資源化再利用中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1-7任一所述方法在開發(fā)可持續(xù)生物能源中的應(yīng)用。
...【技術(shù)特征摘要】
1.利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，s1中的中藥渣來源包括生產(chǎn)參梅養(yǎng)胃顆粒、午時茶顆粒或參芪健胃顆粒的殘留藥渣。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，s2中的微藻包括小球藻(chlorelasp.)和斜生柵藻(scenedesmussp.)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用中藥渣水提液提高微藻油脂含量的方法，其特征在于，s2中tap培養(yǎng)基的組分為：0.38g/l的nh4cl，0.10g/l的mgso4·7h2o，0.05g/l的cacl2·2h2o，0.11g/l的k2hpo4，0.06g/l的kh2po4，0.05g/l的乙二胺四乙酸二鈉鹽，22mg/l的znso4·7h2o，11mg/l的h3bo3，5mg/l的mncl2·4h2o，5mg/l的feso4·7h2o，1.5mg/l的cocl2·6h2o，1.5mg...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：高坤，鄧祥元，沈陸毅，方媛媛，張蒙，王穎，
申請(專利權(quán))人：江蘇科技大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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