【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本申請涉及一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)的蛹蟲草及應(yīng)用，屬于蛹蟲草。
技術(shù)介紹
1、蛹蟲草又稱北蟲草、北冬蟲夏草，是真菌寄生于鱗翅目等昆蟲的蟲體上形成的蟲菌復(fù)合體，由子座(即草部分)與菌核(即蟲的尸體部分)兩部分組成的復(fù)合體。冬季幼蟲蟄居土里，菌類寄生其中，吸取營養(yǎng)，幼蟲體內(nèi)充滿菌絲而死。到了夏季，自幼蟲尸體之上生出幼苗，形似草，夏至前后采集而得，是一種具有滋補(bǔ)作用的營養(yǎng)品。蛹蟲草含有多種生物活性物質(zhì)，包括蟲草素、腺苷等核苷類物質(zhì)，還包括蟲草多糖、超氧化物歧化酶以及氨基酸等，其中最主要的活性成分為蟲草素，研究表明蟲草素具有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗炎、改善新陳代謝、清除自由基等作用，現(xiàn)階段蟲草素正成為藥物化學(xué)、抗衰老、美容、保健品中一個極其活躍的領(lǐng)域。蛹蟲草世界性分布天然資源數(shù)量很少，而市場需求很大。
2、因此，實(shí)現(xiàn)蛹蟲草的大規(guī)模培養(yǎng)將會產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)和社會效益，在何種工藝條件下能夠培養(yǎng)菌絲旺盛、子實(shí)體密度適中且收率高、蟲草素含量高的蛹蟲草菌種是當(dāng)今蛹蟲草
急需解決的重要問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、為了解決上述問題，提供了一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)的蛹蟲草及應(yīng)用，通過限定培養(yǎng)工藝，即對培養(yǎng)基的組成、菌種接入量、通氣量以及發(fā)酵時間，以得到菌絲旺盛、子實(shí)體密度適中且收率高、蟲草素含量高的蛹蟲草菌種。
2、根據(jù)本申請的一個方面，提供了一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
3、(1)將液體培養(yǎng)基加入液體菌種發(fā)酵罐中，按照
4、(2)不間斷通入過濾空氣，通氣量為0.3～0.5m3/h；發(fā)酵時間為72～84h；
5、所述蛹蟲草菌種為蛹蟲草菌株cicc14014、cicc14015和/或cicc14013。
6、可選地，步驟(1)中，按照培養(yǎng)基3％重量比例接入蛹蟲草菌種。
7、可選地，步驟(2)中，通氣量為0.5m3/h。
8、可選地，步驟(2)中，發(fā)酵時間為78h。
9、可選地，所述液體培養(yǎng)基包括以下組分：馬鈴薯、葡萄糖、蛋白胨、甘氨酸、kh2po4、mgso4、維生素b1、水和富勒烯懸浮液；其中，按照重量份數(shù)計(jì)，馬鈴薯8～10份、葡萄糖0.8～1份、蛋白胨0.3～0.5份、甘氨酸0.05～0.1份、kh2po40.1～0.15份、mgso40.05～0.07份、維生素b10.0005份～0.001份、水45～55份和富勒烯懸浮液0.0025～0.003份。
10、可選地，所述富勒烯懸浮液的制備方法包括以下步驟：
11、(1)稱取淀粉8～10g，將淀粉在常壓下熱解，升溫速率為10～15℃/min，保持在750～850℃溫度下25～35min，然后降溫至室溫，得到熱解炭黑產(chǎn)物；
12、(2)取熱解炭黑產(chǎn)物與濃硫酸混合，于室溫下反應(yīng)24～30h，反應(yīng)結(jié)束后淬火，用蒸餾水洗滌至中性，干燥，得到活化炭黑；
13、(3)將活化炭黑與硼氫化鈉置于石英管中，密封后在850～950℃下加熱3～3.5h，冷卻得到富勒烯產(chǎn)物；用丙酮清洗至酚紅試紙無顯色反應(yīng)，干燥備用；
14、(4)將干燥的富勒烯產(chǎn)物與聚乙二醇混合，加熱至50～70℃，反應(yīng)0.5～1h，冷卻至室溫，得到富勒烯懸浮液。
15、可選地，步驟(2)中，炭黑產(chǎn)物與濃硫酸的的質(zhì)量之比為1：35～37。
16、可選地，步驟(3)中活化炭黑和硼氫化鈉的質(zhì)量之比為1：10～12；步驟(4)中富勒烯產(chǎn)物與聚乙二醇的質(zhì)量之比為1：10～12。
17、根據(jù)本申請的另一方面，本申請還提供了上述培養(yǎng)方法培養(yǎng)得到的蛹蟲草。
18、根據(jù)本申請的又一方面，本申請還提供了上述蛹蟲草在制備包括蛹蟲草的產(chǎn)品方面的應(yīng)用。
19、本申請的有益效果包括但不限于：
20、1.根據(jù)本申請的一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)方法，通過限定培養(yǎng)工藝，即對培養(yǎng)基的組成、菌種接入量、通氣量以及發(fā)酵時間，以得到菌絲旺盛、子實(shí)體密度適中且收率高、蟲草素含量高的蛹蟲草菌種。
21、2.根據(jù)本申請的一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基，通過特定組分的特定配比，得到一種適合蛹蟲草菌株cicc14014、cicc14015和/或cicc14013生長的培養(yǎng)基，使得蛹蟲草菌絲體長勢更佳、蟲草素含量更高。
22、3.根據(jù)本申請的一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基，通過在液體培養(yǎng)基中加入特定比例的富勒烯懸浮液，一方面，富勒烯有著極大的比表面積，并且存在微孔和缺陷結(jié)構(gòu)，能夠吸附各種營養(yǎng)成分，可以為蛹蟲草提供更加豐富穩(wěn)定的生化環(huán)境；另一方面，富勒烯表面具有諸多芳香環(huán)及共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，蛹蟲草細(xì)胞可以通過π-π堆積作用吸附在其表面,形成三維立體網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，為蛹蟲草提供的附著生長的場所。
23、4.根據(jù)本申請?zhí)峁┑囊环N蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)方法，工藝步驟及設(shè)備簡單，易于操作，生產(chǎn)成本低，適合一般菌種廠使用。
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1.一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(1)中，按照培養(yǎng)基3％重量比例接入蛹蟲草菌種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(2)中，通氣量為0.5m3/h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(2)中，發(fā)酵時間為78h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基包括以下組分：馬鈴薯、葡萄糖、蛋白胨、甘氨酸、KH2PO4、MgSO4、維生素B1、水和富勒烯懸浮液；其中，按照重量份數(shù)計(jì)，馬鈴薯8～10份、葡萄糖0.8～1份、蛋白胨0.3～0.5份、甘氨酸0.05～0.1份、KH2PO40.1～0.15份、MgSO40.05～0.07份、維生素B1?0.0005份～0.001份、水45～55份和富勒烯懸浮液0.0025～0.003份。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述富勒烯懸浮液的制備方法包括以下步驟：
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(2)中，炭黑產(chǎn)
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(3)中活化炭黑和硼氫化鈉的質(zhì)量之比為1：10～12；步驟(4)中富勒烯產(chǎn)物與聚乙二醇的質(zhì)量之比為1：10～12。
9.權(quán)利要求1～8任一所述的培養(yǎng)方法培養(yǎng)得到的蛹蟲草。
10.權(quán)利要求9所述的蛹蟲草在制備包括蛹蟲草的產(chǎn)品方面的應(yīng)用。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種蛹蟲草液體菌種規(guī)模化培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(1)中，按照培養(yǎng)基3％重量比例接入蛹蟲草菌種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(2)中，通氣量為0.5m3/h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(2)中，發(fā)酵時間為78h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基包括以下組分：馬鈴薯、葡萄糖、蛋白胨、甘氨酸、kh2po4、mgso4、維生素b1、水和富勒烯懸浮液；其中，按照重量份數(shù)計(jì)，馬鈴薯8～10份、葡萄糖0.8～1份、蛋白胨0.3～0.5份、甘氨酸0.05～0.1份、kh2po40.1～0.1...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：郝捷，李力群，郭春生，孫志康，柴穎，陳飛，李劍梅，趙新海，鐘麗娟，
申請(專利權(quán))人：內(nèi)蒙古昆明卷煙有限責(zé)任公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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