【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于基因工程，具體涉及一種藍莓耐鹽基因及其編碼蛋白和應用。
技術介紹
1、藍莓(vaccinium?spp.)為杜鵑花科(ericaceae)越橘屬植物，果實富含花青素、黃酮等多種生理活性成分，有抗氧化性強、提高免疫力等多種健康功效，具有極高的經濟價值和保健價值，是我國新興經濟林主導產業之一。藍莓對鹽脅迫十分敏感，土壤鹽漬化導致的栽培受限、植株生長不良等問題。但藍莓響應鹽脅迫的機制研究還非常有限，且主要集中于生理水平的研究，藍莓耐受鹽脅迫的關鍵基因及其分子和遺傳機制鮮有報道。挖掘藍莓耐鹽基因，并解析其作用機制是篩選和培育優良藍莓耐鹽品種的基礎。鹽脅迫是自然界中常見的非生物脅迫之一，其分布范圍廣、對植物生長危害大。植物長期生長在鹽漬化土壤中會引起滲透脅迫、離子毒害及氧化脅迫等多種次生脅迫，嚴重抑制其生長發育，甚至導致死亡。我國有10.0×107hm2鹽漬化土地，現有耕地的近1/4存在不同程度的鹽漬化，且伴隨灌溉依賴和化肥不當使用等因素，土壤鹽漬化逐年加劇。因此，開發與藍莓耐鹽性相關的分子標記，用于耐鹽性分子輔助樹種對藍莓生產具有重要意義。
2、鈉離子(na+)是鹽漬土中含量最豐富的可溶性陽離子。鹽脅迫條件下，植物葉片會積累過量的na+，導致k+/na+比率下降，引起離子毒害。促進葉片na+的排斥是植物維持k+/na+穩態、應對鹽脅迫的重要機制，na+離子轉運蛋白及其調控因子在此過程中發揮重要功能，但目前為止調控藍莓葉片na+排斥的基因還未見報道。因此，鑒定調控鹽脅迫下藍莓葉片na+含量及k+/na+比率的基因
技術實現思路
1、本專利技術的目的是提供一種藍莓耐鹽基因及其編碼蛋白和應用。
2、第一方面，本專利技術提供了一種蛋白質，是如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)：
3、(a1)序列表中seq?id?no:2所示的蛋白質；
4、(a2)將序列表中seq?id?no:2所示的蛋白質經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與具有相同功能由其衍生的蛋白質；
5、(a3)在(a1)所述蛋白質的n端或/和c端連接標簽得到的融合蛋白；
6、(a4)來源于藍莓且與(a1)具有98％以上同一性且具有相同功能的蛋白質。
7、第二方面，本專利技術提供了編碼第一方面所述蛋白質的核酸分子。
8、上文所述核酸分子是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)的dna分子：
9、(b1)編碼區如seq?id?no:1所示的dna分子；
10、(b3)在嚴格條件下與(b1)或(b2)限定的dna分子雜交且編碼權利要求1所所述蛋白質的dna分子；
11、(b4)來源于藍莓且與(b1)或(b2)限定的dna分子至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且編碼權利要求1所述蛋白質的dna分子。
12、第三方面，本專利技術提供了含有第二方面所述核酸分子的重組載體、表達盒或重組菌。
13、第四方面，本專利技術提供了第一方面所述的蛋白質或第二方面所述核酸分子或第三方面所述的重組載體、表達盒或重組菌在調控植物耐鹽性中的應用。
14、第五方面，本專利技術提供了第一方面所述的蛋白質或第二方面所述核酸分子或第三方面所述的重組載體、表達盒或重組菌在轉運na+中的應用。
15、第六方面，本專利技術提供了第一方面蛋白質在作為na+轉運蛋白中的應用。
16、第七方面，本專利技術提供了第二方面所述核酸分子或第三方面所述的重組載體、表達盒或重組菌在制備na+轉運蛋白中的應用。
17、第八方面，本專利技術提供了降低第一方面所述蛋白質活性或含量的物質在降低植物耐鹽性或培育對鹽敏感植物中的應用。
18、在本專利技術的實施例中，降低第一方面所述蛋白質活性或含量的物質具體為實施例中含有anti-sense反義沉默序列的pcr片段。
19、第九方面，一種培育對鹽敏感植物的方法，包括如下步驟：降低目的植物中第一方面所述蛋白質活性或含量，得到轉基因植物；所述轉基因植物的耐鹽性低于所述目的植物。
20、本專利技術的有益效果如下：
21、(1)本專利技術提供了一種新的藍莓耐鹽基因，及其核苷酸序列和其對應的蛋白質氨基酸序列，并且在此耐鹽基因內，鑒定了一個位于啟動子中插入或缺失的，與藍莓耐鹽性連鎖的核苷酸片段，該片段的插入或缺失，可作為藍莓耐鹽分子標記。本專利技術還提供了一種用于檢測本專利技術的藍莓耐鹽分子標記的引物對和試劑盒，以及檢測藍莓是否耐鹽的方法。
22、(2)由于藍莓耐鹽性屬于數量性狀遺傳，表型分析耗時費力，上述的藍莓耐鹽基因及其蛋白質、分子標記、引物對和試劑盒都可以應用于篩選和培育藍莓耐鹽品種，在藍莓幼苗期就可鑒定，省時而且準確，可以加速藍莓耐鹽品種選育進程。
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1.一種蛋白質，是如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)：
2.編碼權利要求1所述蛋白質的核酸分子。
3.根據權利要求2所述核酸分子，其特征在于：所述核酸分子是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)的DNA分子：
4.含有權利要求2或3所述核酸分子的重組載體、表達盒或重組菌。
5.權利要求1所述的蛋白質或權利要求2或3所述核酸分子或權利要求4所述的重組載體、表達盒或重組菌在調控植物耐鹽性中的應用。
6.權利要求1所述的蛋白質或權利要求2或3所述核酸分子或權利要求4所述的重組載體、表達盒或重組菌在轉運Na+中的應用。
7.權利要求1所述的蛋白質在作為Na+轉運蛋白中的應用。
8.權利要求2或3所述核酸分子或權利要求4所述的重組載體、表達盒或重組菌在制備Na+轉運蛋白中的應用。
9.降低權利要求1所述蛋白質活性或含量的物質在降低植物耐鹽性或培育對鹽敏感植物中的應用。
10.一種培育對鹽敏感植物的方法，包括如下步驟：降低目的植物中權利要求1所述蛋白質活性或含量，得到轉基因
...【技術特征摘要】
1.一種蛋白質，是如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)：
2.編碼權利要求1所述蛋白質的核酸分子。
3.根據權利要求2所述核酸分子，其特征在于：所述核酸分子是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)的dna分子：
4.含有權利要求2或3所述核酸分子的重組載體、表達盒或重組菌。
5.權利要求1所述的蛋白質或權利要求2或3所述核酸分子或權利要求4所述的重組載體、表達盒或重組菌在調控植物耐鹽性中的應用。
6.權利要求1所述的蛋白質或權利要求2或3所述核酸...
【專利技術屬性】
技術研發人員：曹一博，張凌云，宋慧芳，趙鑫焱，
申請(專利權)人：北京林業大學，
類型：發明
國別省市：
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