【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于植物基因工程，具體涉及蛋白slrd1及其編碼基因與應用。
技術介紹
1、番茄(solanum?lycopersicum?l.)具有豐富的營養價值，市場需求量大，是世界上最重要的蔬菜和園藝作物之一(周明和李常保,2022)。作為全球最大的番茄生產和出口國，番茄已經成為帶動我國農業經濟發展、提高農民收入的重要蔬菜作物。同時，番茄生長周期短、基因組小、遺傳背景較為清楚，且易于轉化等，是遺傳研究的的重要模式植物(meissneret?al.,1997)。番茄在生長發育過程中常會受到多種逆境(如干旱、鹽堿、低溫等)的影響，造成種子萌發慢，發芽率低，植株生長遲緩、落花落果等，嚴重時甚至引起植株死亡，影響番茄的產量和品質(董舒超等,2024)。挖掘植物抗性相關的基因和分子機制，對逆境下生產高品質番茄具有重要意義。
2、burp基因僅在植物中被鑒定出，是植物特有的基因家族(phillips?and?ludidiet?al.,2017)。burp基因家族的命名基于四個典型的burp成員：油菜小孢子胚胎發育過程中表達的bnbnm2(boutilier?et?al.,1994)、蠶豆合子胚胎早期發育的vfusp(bassuner?etal.,1988)、擬南芥中的脫水響應atrd22
3、(yamaguchi-shinozaki?and?shinozaki,1993)和番茄多半乳糖醛酸酶同酶1的非催化β亞基lepg1β(zheng?et?al.,1992)。burp基因家族成員一般包含保守的c端burp結構域，主
技術實現思路
1、針對上述存在問題，本專利技術前期從番茄基因組中鑒定到14個包含burp結構域的burp家族成員，通過熒光定量pcr分析(qrt-pcr)分析篩選到受干旱和鹽脅迫顯著誘導表達的slrd1。從番茄micro-tom中克隆了slrd1，通過構建該基因的過表達載體，利用花序侵染法轉化哥倫比亞野生型擬南芥‘col’。通過干旱脅迫、鹽脅迫處理和aba處理，發現過表達slrd1促進轉基因擬南芥主根的伸長，提高轉基因擬南芥對干旱、鹽脅迫的抗性，同時提高轉基因擬南芥種子對aba的敏感性。
2、本專利技術采用的技術方案為：
3、首先，本專利技術保護蛋白slrd1，其來源于番茄micro-tom，其氨基酸序列如seq?idno.1所示。
4、編碼所述蛋白質slrd1的核酸分子也屬于本專利技術的保護范圍。
5、編碼蛋白質slrd1的核酸分子如下序列中的任意一種或多種：
6、a1)編碼區是如seq?id?no.2所示的dna分子；
7、a2)核苷酸序列是seq?id?no.2所示的dna分子；
8、a3)與a1)或a2)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，來源于番茄且編碼所述蛋白質slrd1的dna分子；
9、a4)在嚴格條件下與a1)或a2)限定的核苷酸序列雜交，來源于番茄且編碼所述蛋白質slrd1的dna分子。
10、其中，所述核酸分子可以是dna，如cdna、基因組dna或重組dna；所述核酸分子也可以是rna，如mrna或hnrna等。
11、本領域普通技術人員可以很容易地采用已知的方法，例如定向進化和點突變的方法，對本專利技術的編碼所述蛋白質slrd1的核苷酸序列進行突變。那些經過人工修飾的，具有與本專利技術分離得到的所述蛋白質slrd1的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要編碼所述蛋白質slrd1，均是衍生于本專利技術的核苷酸序列并且等同于本專利技術的序列。
12、這里使用的術語“同一性”指與天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括與本專利技術的編碼seq?id?no.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質slrd1的核苷酸序列具有75％或更高，或80％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或計算機軟件進行評價。使用計算機軟件，兩個或多個序列之間的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用來評價相關序列之間的同一性。
13、含有上述任一所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系也屬于本專利技術的保護范圍。
14、所述含有上述任一所述核酸分子的重組載體具體可為實施例提及的重組質粒pbi121-slrd1。所述重組質粒pbi121-slrd1可為將pbi121質粒的限制性內切酶xbai識別序列和限制性內切酶smai識別序列間的dna小片段替換為核苷酸序列是seq?id?no.2所示的dna分子，得到的重組質粒。
15、所述含有上述任一所述核酸分子的重組微生物可為將含有上述任一所述核酸分子的重組載體導入出發微生物得到的重組菌。
16、所述出發微生物可為農桿菌或大腸桿菌。所述農桿菌具體可為根癌農桿菌gv3101。
17、所述含有上述任一所述核酸分子的重組微生物具體可為實施例提及的gv3101/pbi121-slrd1(即將重組質粒pbi121-slrd1轉化農桿菌gv3101，得到的重組農桿菌)。
18、所述轉基因細胞系不包括繁殖材料。
19、其次，本專利技術還保護上述任一所述的蛋白質slrd1，或，上述任一所述的核酸分子，或，含有上述任一所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系，的應用，為如下b1)-b2)中的至少一種：
20、b1)調控植物對干旱脅迫的抗性；
<本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.蛋白質SlRD1的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
2.編碼權利要求1所述的蛋白質SlRD1的核酸分子。
3.如權利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子為如下序列中的任意一種或多種：
4.含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系。
5.權利要求1所述蛋白質SlRD1，或，權利要求2或3所述核酸分子，或，含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系，的應用，為如下b1)-b2)中的至少一種：
6.權利要求1所述蛋白質SlRD1，或，權利要求2或3所述核酸分子，或，含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系，在培育抗旱和/或耐鹽轉基因植物中的應用。
7.如權利要求1所述蛋白質SlRD1、或、權利要求5或6所的應用，其特征在于：所述植物為如下c1)至c3)中的任一種：c1)雙子葉植物；c2)番茄；c3)番茄‘Micro-Tom’；c4)擬南芥；c5)野生型擬南芥‘col’。
8.一種培
9.一種植物育種方法，其特征在于，包括如下步驟：增加植物中權利要求1所述蛋白質SlRD1的含量，從而提高轉基因植物對干旱和鹽脅迫的抗性；同時，提高轉基因植株種子對ABA的敏感性。
10.如權利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述植物為如下如下c1)至c3)中的任一種：c1)雙子葉植物；c2)番茄；c3)番茄‘Micro-Tom’；c4)擬南芥；c5)野生型擬南芥‘col’。
...【技術特征摘要】
1.蛋白質slrd1的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。
2.編碼權利要求1所述的蛋白質slrd1的核酸分子。
3.如權利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子為如下序列中的任意一種或多種：
4.含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系。
5.權利要求1所述蛋白質slrd1，或，權利要求2或3所述核酸分子，或，含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系，的應用，為如下b1)-b2)中的至少一種：
6.權利要求1所述蛋白質slrd1，或，權利要求2或3所述核酸分子，或，含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉基因細胞系，在培育抗旱和/或耐鹽轉基因植物中的應用。
7.如權利要求1所述蛋白質slrd1、或、權利要求5或6所的應用，其特征在于：所...
【專利技術屬性】
技術研發人員：孫會茹，任敏，陳國梁，樊蓓，程國亭，
申請(專利權)人：延安大學，
類型：發明
國別省市：
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