【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于天然產物制備，具體涉及一種柚果粗多糖、制備方法及其應用。
技術介紹
1、柚子為蕓香科柑橘屬植物柚的果實，在其生長過程中，由于植物生理因素以及為保證果實產量和質量而采取的人工疏果措施，造成大量的未成熟柚果產生，據統計，未成熟柚果占總產量的40-50％。在中國，這些果實作為中藥使用，具有行氣、除痰和止痛等效果，在維護人類健康發揮重要作用，但遺憾的是，柚果的利用率很低。近年來，為提高柚果的利用率，增加其經濟價值，科研工作者針對其化學成分和藥理作用開展了一系列基礎研究工作。研究表明，柚果含有多種活性成分，其中以柚皮苷為主，其被證實具有較強的抗氧化活性和抗炎活性。hou?tao,et?al.采用新型連續相變技術依次提取了柚果中的揮發油，柚皮苷和果膠成分，后續研究，證實了其制備的新型果膠具有較高的免疫調節作用。但除果膠外的多糖組分，在柚果中的研究還很少。
2、潰瘍性結腸炎(ulcerative?colitis，uc)是一種慢性免疫介導的疾病，其特征是持續和不同程度的粘膜炎癥，從直腸延伸到結腸近端。它主要影響粘膜層，導致腸壁的淺表損傷。患者常伴有或不伴有黏液血性腹瀉、直腸急性證候、里急后重及不同程度的腹痛，這些均顯著影響患者的生活質量。目前uc的藥物干預，主要包括抗炎藥、免疫抑制藥物、抗生素和生物制劑，但都與某些不良反應有關。具有藥用和食療特性的中藥往往更安全，因而它們受到藥物研究人員的青睞，并已成為探索針對各種疾病的新療法的寶貴自然資源庫。
3、潰瘍性結腸炎發病機制復雜，與多種因素，如遺傳因素、飲食、過
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于克服現有技術的不足，提供一種未成熟柚果多糖、制備方法及其應用。
2、本專利技術基于腸道菌群與多糖之間的密切關系，以及微生物在維持腸道健康中的關鍵作用，通過采用水提醇法利用未成熟柚果制備得到一種柚果粗多糖(ipfp)，然后通過dss誘導小鼠模型，研究了ipfp對潰瘍性結腸炎的藥理作用，并探討其與腸道菌群相關的治療機制，從而彌補了未成熟柚果多糖的研究空白。
3、本專利技術的第一個目的是提供一種柚果粗多糖，柚果粗多糖由分子量為9187da的柚果粗多糖-1和分子量大于100kda的柚果粗多糖-2組成，且所述柚果粗多糖的單糖組成包含半乳糖、葡萄糖和木糖。
4、本專利技術的第二個目的是提供一種上述的柚果粗多糖的制備方法，包括以下步驟：
5、s1、將未成熟柚果，切片，曬干，得到柚果片；
6、s2、將水加入到步驟s1得到的柚果片中，加熱回流提取3次，合并提取液，接著將提取液減壓濃縮，得到濃縮液；
7、s3、將無水乙醇加入到步驟s2得到的濃縮液中，調節濃縮液中的無水乙醇含量依次為40％、60％和80％，對濃縮液中的多糖進行分級沉淀，分級沉淀完成后，收集80％的醇沉組分，并通過經典的sevage法脫蛋白，將去除蛋白的濾液經透析、冷凍干燥后，得到柚果粗多糖。
8、優選的，步驟s2中，每次所述加熱回流提取的料液比為1:20，加熱溫度為100℃，提取時間為2h。
9、優選的，步驟s2中，所述濃縮液的體積與步驟s1得到的柚果片的質量比為2.5ml:1g。
10、優選的，步驟s2中，所述減壓濃縮的溫度為55℃，壓力為-0.095mpa。
11、本專利技術的第三個目的是提供一種上述的柚果粗多糖在制備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的應用。
12、優選的，所述藥物通過柚果粗多糖來實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
13、優選的，所述柚果粗多糖通過抑制促炎因子tnf-α、il-1β和il-6的表達，并促進抗炎基因il-10的表達來實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
14、優選的，所述柚果粗多糖通過抑制erk1/2通路來實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
15、優選的，所述柚果粗多糖通過抑制腸道內致病菌的豐度，并促進腸道內益生菌的豐度，對腸道微生物進行調節來實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
16、本專利技術與現有技術相比，其有益效果在于：
17、本專利技術以未成熟柚果為原料通過水提醇法制備得到柚果粗多糖(ipfp)，該多糖由分子量為9187da的柚果粗多糖-1(ipfp-1)和分子量大于100kda的柚果粗多糖-2(ipfp-2)組成，且其單糖組成由半乳糖、葡萄糖和木糖構成，本專利技術制備得到的ipfp可減輕dss導致的小鼠疾病癥狀，改善結腸組織病理學損傷，降低促炎因子tnf-α、il-1β和il-6的表達，同時增加抗炎基因il-10的表達，而且ipfp可抑制erk1/2磷酸化，調節腸道微生物的組成，因此，本專利技術提供的ipfp可作為一種潛在的抗炎成分應用于潰瘍性結腸炎藥物上，實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
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1.一種柚果粗多糖，其特征在于，所述柚果粗多糖由分子量為9187Da的柚果粗多糖-1和分子量大于100kDa的柚果粗多糖-2組成，且所述柚果粗多糖的單糖組成包含半乳糖、葡萄糖和木糖。
2.一種根據權利要求1所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
3.根據權利要求2所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，步驟S2中，每次所述加熱回流提取的料液比為1:20，加熱溫度為100℃，提取時間為2h。
4.根據權利要求2所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，步驟S2中，所述濃縮液的體積與步驟S1得到的柚果片的質量比為2.5mL:1g。
5.根據權利要求2所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，步驟S2中，所述減壓濃縮的溫度為55℃，壓力為-0.095MPa。
6.一種根據權利要求1所述的柚果粗多糖在制備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的應用。
7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述藥物通過柚果粗多糖來實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述柚果粗多糖通
9.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述柚果粗多糖通過抑制Erk1/2通路來實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
10.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述柚果粗多糖通過抑制腸道內致病菌的豐度，并促進腸道內益生菌的豐度，對腸道微生物進行調節來實現對潰瘍性結腸炎的改善或治療。
...【技術特征摘要】
1.一種柚果粗多糖，其特征在于，所述柚果粗多糖由分子量為9187da的柚果粗多糖-1和分子量大于100kda的柚果粗多糖-2組成，且所述柚果粗多糖的單糖組成包含半乳糖、葡萄糖和木糖。
2.一種根據權利要求1所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
3.根據權利要求2所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，步驟s2中，每次所述加熱回流提取的料液比為1:20，加熱溫度為100℃，提取時間為2h。
4.根據權利要求2所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，步驟s2中，所述濃縮液的體積與步驟s1得到的柚果片的質量比為2.5ml:1g。
5.根據權利要求2所述的柚果粗多糖的制備方法，其特征在于，步驟s2中，所述減壓濃縮的溫度為55℃，壓力為-0.09...
【專利技術屬性】
技術研發人員：鄭作亮，鐘瑜萍，劉志偉，范麗萍，何鈺琳，李佳瑩，
申請(專利權)人：嘉應學院，
類型：發明
國別省市：
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