【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于藥物制劑聯合治療新輔料和新劑型，具體涉及鐵死亡激動劑與氟化前藥共組裝形成的納米組裝體的構建以及其在藥物傳遞中的應用。
技術介紹
1、目前，已有多種療法被廣泛用于癌癥的臨床治療，但現有的以手術治療、化療和放療為主的治療方式仍呈現不理想的臨床療效。隨著研究的不斷深入，鐵死亡作為一種新型的細胞死亡方式引起了人們的廣泛關注。近年來，已有多種誘導鐵死亡的策略被探索與開發，其中包括增加腫瘤細胞內鐵離子含量，減少腫瘤細胞中谷胱甘肽(gsh)的合成或增加活性氧(ros)和脂質過氧化物的含量，以及提供不飽和脂肪酸以增加腫瘤細胞中脂質過氧化物的水平。值得注意的是，索拉菲尼(sor)作為一種有效的鐵死亡誘導劑，可以通過阻斷胱氨酸/谷氨酸逆向運系統(system?xc-)來抑制腫瘤細胞對于胱氨酸的攝入，從而減少腫瘤細胞中gsh的產生，并進一步抑制下游的谷胱甘肽過氧化物酶4(gpx4)的活性，誘導腫瘤細胞發生鐵死亡。同時，腫瘤鐵死亡的過程伴隨著強烈的氧化應激，從而刺激腫瘤細胞釋放免疫原性抗原，誘導免疫原性細胞死亡(icd)的發生，最終激活抗腫瘤免疫應答。其中，icd是一種特殊的細胞死亡形式，死亡的腫瘤細胞通過釋放出鈣網蛋白(crt)、高遷移率族蛋白1(hmgb1)、三磷酸腺苷(atp)等細胞損傷相關分子模式(damps)，顯著促進樹突狀細胞(dc)的成熟和細胞毒性t淋巴細胞的募集，從而激活抗腫瘤免疫反應。然而腫瘤細胞中pd-l1的高表達是導致發生腫瘤免疫逃逸的主要機制之一，進一步導致免疫抵抗的發生，致使免疫療效不佳。由此可見，將免疫檢查點抑
2、通常，正常組織的氧張力在10-80毫米汞柱之間。然而，大多數實體瘤由于具有血管異常、血流波動和氧擴散不足等特征，因此呈現出低氧的腫瘤微環境，其氧張力低于5毫米汞柱，明顯低于正常組織水平。這種缺氧狀態不僅會阻礙鐵死亡和icd的療效，而且還會形成免疫抑制微環境，嚴重阻礙icd引發的抗腫瘤免疫反應的有效性。具體而言，在缺氧條件下，腫瘤源性細胞因子可將腫瘤相關巨噬細胞(tam)轉化為免疫抑制的m2樣巨噬細胞，促進腫瘤生長和免疫抵抗。此外，缺氧微環境會激活缺氧誘導因子(hif-1α)，直接調節髓源性抑制細胞(mdscs)的功能和分化，促進免疫耐受。因此，改善腫瘤細胞的缺氧微環境是提高鐵死亡/免疫療法療效的關鍵。近年來，全氟碳化合物(pfcs)由于其特殊的生物相容性和高氧分解能力，顯示出良好的臨床潛力，甚至被用作人造血液替代品。此外，血紅蛋白中氧氣以共價結合的方式存在，而pfcs獨特的氣溶性使其在必要時可以加速氧氣釋放。因此，pfcs在體內氧合和緩解腫瘤缺氧方面顯示出巨大的應用前景。然而，在體內同時有效地輸送氧氣和細胞毒性藥物仍然是一個重大挑戰。
3、隨著生物納米技術的不斷進步，諸多新型的納米藥物遞送系統引起了研究者們的廣泛關注。其中，小分子納米藥物遞送策略為抗腫瘤藥物的高效給藥提供了一條極具前景的道路。與傳統的依賴于載體材料的納米藥物遞送系統不同，這種無載體系統避免了由于載體材料帶來的成藥性挑戰，并展現出多種優勢，包括易于制備、高載藥能力和無載體相關毒性等。此外，無載體小分子納米藥物遞送系統具有普適性，不僅可以遞送單一藥物，還可以通過調節劑量比共同遞送多種細胞毒性藥物。這種靈活性為癌癥的多模式聯合治療帶來可能。無載體小分子納米藥物傳遞系統具有較高的載藥量和優異的腫瘤選擇性，有望解決腫瘤缺氧導致的鐵死亡及免疫治療效果不理想的問題。
技術實現思路
1、基于
技術介紹
所述的技術問題，本專利技術進一步為了解決腫瘤缺氧帶來的鐵死亡及icd誘導效果不佳和增強的腫瘤免疫逃逸等問題，設計一種鐵死亡激動劑和氟化前藥共組裝納米粒，從而實現穩定性好、載藥量高、毒副作用低的技術效果，進而解決了腫瘤缺氧導致的鐵死亡及免疫治療效果不理想的問題，提高了胞內氧化應激的效果，協同促進了腫瘤細胞免疫原性的提高和免疫逃逸的減少。本專利技術的目的是以鐵死亡激動劑和氟化前藥形成共組裝納米粒，或鐵死亡激動劑與氟化前藥和peg修飾劑組裝而成的納米粒。
2、本專利技術通過以下技術方案實現上述目的：
3、本專利技術提供了一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，所述納米組裝體由鐵死亡激動劑與氟化前藥通過分子間作用力共組裝而成，并修飾以peg修飾劑；所述氟化前藥的母藥為小分子免疫檢查點抑制劑，氟化前藥的側鏈為全氟化碳，母藥和側鏈以連接子橋連；所述連接子為腫瘤微環境相應的化學鍵；所述鐵死亡激動劑與氟化前藥的摩爾比為5:1～1:5，鐵死亡激動劑與氟化前藥質量之和與peg修飾劑的質量比為100:0～70:30。
4、上述技術方案中，進一步地，鐵死亡激動劑與氟化前藥的摩爾比為1：1，鐵死亡激動劑與氟化前藥質量之和與peg修飾劑的質量比為100:0～80:20。
5、上述技術方案中，進一步地，所述分子間作用力包括π-π堆積、疏水作用、靜電作用力及氫鍵。
6、上述技術方案中，進一步地，所述的鐵死亡激動劑包括埃拉斯汀、索拉菲尼、rsl-3及柳氮磺胺吡啶中的一種或二種以上；所述的小分子免疫檢查點抑制劑包括jq1、pd1-pdl1抑制劑2(bms-202)、bms-1001、max-10181或gs-4224；所述的連接子為單硫鍵、二硫鍵、二硒鍵；所述的側鏈為全氟己酸、全氟辛酸、全氟癸酸、全氟十二酸、己酸、辛酸、癸酸或十二烷酸。
7、上述技術方案中，進一步地，所述的peg修飾劑包括pcl-peg、dspe-peg、dspe-ss-peg、plga-peg和pe-peg中的一種或二種以上，peg的分子量為200-20000。
8、上述技術方案中，進一步地，述的peg修飾劑為dspe-peg2k。
9、上述技術方案中，進一步地，所述前藥的合成方法包括：
10、利用酯化反應催化劑將連接子與全氟己酸、全氟辛酸、全氟癸酸、全氟十二酸己酸、辛酸、癸酸或十二烷酸進行酯化反應，反應產物純化后與小分子免疫檢查點抑制劑進行酯化反應即得前藥；所述酯化反應催化劑為edci和dmap。
11、上述技術方案中，進一步地，前述一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，制備方法包括如下步驟：
12、將鐵死亡激動劑、氟化前藥及peg修飾劑分別溶解到有機溶劑中，渦旋下混勻，將混勻后的溶液緩慢滴加到水中，攪拌下自發形成均勻的共組裝納米粒；最后除去有機溶劑，即得納米組裝體；
13、或分別制備鐵死亡激動劑、氟化前藥共組裝納米粒和peg修飾劑的有機溶劑，然后在劇烈攪拌下將peg修飾劑的有機溶劑滴加至共組裝納米粒中，最后除去有機溶劑，即得納米組裝體；
14、或將氧氣充入上述兩種方法制備的納米組裝體中(30min)，即得氧氣飽和的納米組裝體；
15、所述除去有本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述納米組裝體由鐵死亡激動劑與氟化前藥通過分子間作用力共組裝而成，并修飾以PEG修飾劑；所述氟化前藥的母藥為小分子免疫檢查點抑制劑，氟化前藥的側鏈為全氟化碳，母藥和側鏈以連接子橋連；所述連接子為腫瘤微環境相應的化學鍵；所述鐵死亡激動劑與氟化前藥的摩爾比為5:1～1:5，鐵死亡激動劑與氟化前藥質量之和與PEG修飾劑的質量比為100:0～80:20。
2.如權利要求1所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述分子間作用力包括π-π堆積、疏水作用、靜電作用力及氫鍵。
3.如權利要求1所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述的鐵死亡激動劑包括埃拉斯汀、索拉菲尼、RSL-3及柳氮磺胺吡啶中的一種或二種以上；所述的小分子免疫檢查點抑制劑包括JQ1、PD1-PDL1抑制劑2(BMS-202)、BMS-1001、MAX-10181或GS-4224；所述的連接子為單硫鍵、二硫鍵、二硒鍵；所述的側鏈為全氟己酸、全氟辛酸、全氟癸酸、全氟十二酸、己
4.如權利要求1所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述的PEG修飾劑包括PCL-PEG、DSPE-PEG、DSPE-SS-PEG、PLGA-PEG和PE-PEG中的一種或二種以上，PEG的分子量為200-20000。
5.如權利要求4所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述的PEG修飾劑為DSPE-PEG2K。
6.如權利要求1所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述前藥的合成方法包括：
7.如權利要求1-6中任一項所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，制備方法包括如下步驟：
8.如權利要求7所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述的有機溶劑包括乙醇、四氫呋喃、二甲基亞砜中的一種或任意兩種的組合。
9.權利要求1-8任何一項所述的用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體在制備藥物傳遞系統中的應用；或在制備注射給藥、口服給藥或局部給藥系統中的應用。
10.權利要求1-8任何一項所述的用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體在制備抗腫瘤藥物中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述納米組裝體由鐵死亡激動劑與氟化前藥通過分子間作用力共組裝而成，并修飾以peg修飾劑；所述氟化前藥的母藥為小分子免疫檢查點抑制劑，氟化前藥的側鏈為全氟化碳，母藥和側鏈以連接子橋連；所述連接子為腫瘤微環境相應的化學鍵；所述鐵死亡激動劑與氟化前藥的摩爾比為5:1～1:5，鐵死亡激動劑與氟化前藥質量之和與peg修飾劑的質量比為100:0～80:20。
2.如權利要求1所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述分子間作用力包括π-π堆積、疏水作用、靜電作用力及氫鍵。
3.如權利要求1所述的一種用于腫瘤缺氧緩解和鐵死亡/免疫治療的納米組裝體，其特征在于，所述的鐵死亡激動劑包括埃拉斯汀、索拉菲尼、rsl-3及柳氮磺胺吡啶中的一種或二種以上；所述的小分子免疫檢查點抑制劑包括jq1、pd1-pdl1抑制劑2(bms-202)、bms-1001、max-10181或gs-4224；所述的連接子為單硫鍵、二硫鍵、二硒鍵；所述的側鏈為全氟己酸、全氟辛酸、全氟癸酸、全氟十二酸、己酸、辛酸、癸酸或十二烷酸。
4.如權利要求1所述的一種用于腫瘤缺氧緩...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張申武，雷瑾，孫新新，史健斌，關晴月，羅聰，
申請(專利權)人：沈陽藥科大學，
類型：發明
國別省市：
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