【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術涉及一種模擬痰液質控品的制備方法及其在微生物檢測試劑盒中的應用，屬于生物檢測。
技術介紹
1、痰液是肺泡、支氣管和氣管的分泌物。健康人痰液量很少。正常情況下，支氣管黏膜腺體和杯狀細胞可以分泌少量黏液，使呼吸道黏膜保持濕潤。病理情況下，呼吸道黏膜和肺泡受刺激后黏膜充血水腫，漿液滲出，黏液分泌增多。各種細胞（紅細胞、白細胞、吞噬細胞等）、纖維蛋白等滲出物和黏液、吸入的灰塵、某些組織壞死物等混合形成痰液。痰液的成分很復雜，由95%的水分和5%的灰塵、蛋白質等組成。痰液檢查的目的為：①助診某些呼吸系統(tǒng)疾病，如支氣管哮喘、支氣管擴張等；②確診某些呼吸系統(tǒng)疾病，如肺結核、肺癌、肺吸蟲病等；③觀察療效和預后判斷等。
2、對于痰液檢查主要包括一般性狀檢查、顯微鏡檢查、免疫學檢查、微生物學檢查等。痰中的微生物種類較多，少部分的是咳痰時混入的上呼吸道正常菌群。大部分均為支氣管與肺部有感染時出現(xiàn)的病原菌，如金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌、結核分桿菌等，這種情況一般取痰液作涂片染色檢查，對微生物在痰液中的形態(tài)進行觀察。
3、在進行痰液檢測相關的體外診斷試劑盒開發(fā)過程中，為評價或驗證所開發(fā)試劑盒的精密度、準確度、符合性，或由于試劑或分析儀器的變化產生的分析偏差等性能特征，會采用質量控制物質。質量控制物質本身對穩(wěn)定性、批間差要求高。試劑盒開發(fā)時應該選擇可穩(wěn)定儲存的、可重復的、可溯源的質控品。目前，對于痰液基質的制備，因其穩(wěn)定性不佳、不好控制批間差、可重復性差，相應的質控物質的開發(fā)較為困難，并且現(xiàn)有對于痰液檢測的相
技術實現(xiàn)思路
1、針對上述現(xiàn)有技術的不足，本專利技術提供一種模擬痰液質控品的制備方法及其在微生物檢測試劑盒中的應用，目的在于解決現(xiàn)有技術中的痰液基質的質控物質缺乏穩(wěn)定性及可重復性的技術問題。
2、本專利技術提供的第一個技術方案為一種模擬痰液基質的制備方法，其包括天然親水膠體、表面活性劑、蛋白質、多糖、無機鹽和水。
3、在某些實施方式中，所述親水膠體包括黃原膠、阿拉伯膠和槐豆膠中的一種或多種；所述親水膠體的質量百分數(shù)為1%~5％。
4、在某些實施方式中，所述親水膠體的質量百分數(shù)可為1％~2％。
5、在某些實施方式中，所述親水膠體為黃膠原或阿拉伯膠。
6、在某些實施方式中，所述表面活性劑包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和羥丙甲基纖維素中的至少兩種；所述表面活性劑的質量百分數(shù)可為3%~10％。
7、在某些實施方式中，所述表面活性劑的質量百分數(shù)可為4％~6％。
8、在某些實施方式中，所述表面活性劑由聚乙烯吡咯烷酮和羥丙甲基纖維素組成，所述聚乙烯吡咯烷酮和羥丙甲基纖維素的質量比為（1~2.5）：（2~3）。
9、在某些實施方式中，所述蛋白質包括酪蛋白、黏液蛋白和白蛋白中的一種或多種；所述蛋白質的質量百分數(shù)可為0.2%~2％。
10、在某些實施方式中，所述蛋白質的質量百分數(shù)可為0.3％~0.5％。
11、在某些實施方式中，所述蛋白質為酪蛋白或白蛋白。
12、在某些實施方式中，所述多糖包括羧甲基殼聚糖、葡聚糖和糖胺聚糖中的一種或多種；所述多糖的質量百分數(shù)可為0.3%~2％。
13、在某些實施方式中，所述多糖的質量百分數(shù)可為0.5％~0.8％。
14、在某些實施方式中，所述多糖為羧甲基殼聚糖或葡聚糖。
15、在某些實施方式中，所述無機鹽為非有毒金屬離子無機鹽，包括氯化鈉、氯化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、磷酸鈉鹽和磷酸鉀鹽中的一種或多種；所述無機鹽的質量百分數(shù)可為0.2%~2％。
16、在某些實施方式中，所述無機鹽的質量百分數(shù)可為0.6％~0.8％。
17、在某些實施方式中，所述無機鹽為氯化鈉。
18、在某些實施方式中，所述水可以為無菌純化水。
19、本專利技術提供的第二個技術方案為一種質控品，所述質控品含有第一個技術方案所述的痰液基質。
20、在某些實施方式中，所述質控品還包括微生物培養(yǎng)物。
21、在某些實施方式中，所述微生物培養(yǎng)物包括細菌、真菌和細胞。
22、本專利技術提供的第三個技術方案為一種試劑盒，所述試劑盒含有第一個技術方案所述的痰液基質，或者含有第二個技術方案所述的質控品。
23、在某些實施方式中，所述試劑盒還包括熒光素、特異結合蛋白、復染劑。
24、具體地，試劑盒中的特異結合蛋白為β-d-葡聚糖結合蛋白，β-d-葡聚糖結合蛋白可以與真菌細胞壁上的d-葡聚糖特異性結合形成復合物，在特定的激發(fā)波長下，發(fā)射強熒光，通過生物（熒光）顯微鏡可與其他物質進行區(qū)分。
25、本專利技術提供的第四個技術方案為第一個技術方案所述的痰液基質，或者第二個技術方案所述的質控品，或者第三個技術方案所述的試劑盒在檢測樣本中的病原菌的應用。
26、在某些實施方式中，所述檢測樣本包括皮屑、痰液。
27、本專利技術的技術效果如下：
28、本專利技術針對痰液基質的模擬效果良好，包括模擬痰液顏色、氣泡、粘度、并且具有良好的均一性、分散性和穩(wěn)定性，在不同的保存溫度下靜置保存7天后，仍然能夠維持粘稠度與痰液泡沫樣。與培養(yǎng)物混合后，菌體包裹均勻，具有良好的生物相容性和穩(wěn)定性，對菌體形態(tài)無影響，可穩(wěn)定模擬痰液中菌體的分散性，有助于體外診斷相關試劑盒的參考品、質控品制備，對臨床微生物的顯微鏡檢查具有很好的輔助作用。
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1.一種模擬痰液基質的制備方法，其特征在于，包括天然親水膠體、表面活性劑、蛋白質、多糖、無機鹽和水。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述親水膠體包括黃原膠、阿拉伯膠和槐豆膠中的一種或多種；所述親水膠體的質量百分數(shù)為1%~5％，可選地，所述親水膠體的質量百分數(shù)為1％~2％，所述親水膠體為黃膠原或阿拉伯膠。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述表面活性劑包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和羥丙甲基纖維素中的至少兩種；所述表面活性劑的質量百分數(shù)為3%~10％。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述表面活性劑包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和羥丙甲基纖維素中的至少兩種；所述表面活性劑的質量百分數(shù)可為3%~10％；可選地，所述表面活性劑的質量百分數(shù)為4％~6％，所述表面活性劑由聚乙烯吡咯烷酮和羥丙甲基纖維素組成，所述聚乙烯吡咯烷酮和羥丙甲基纖維素的質量比為（1~2.5）：（2~3）。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白質包括酪蛋白、黏液蛋白和白蛋白中的一種或多種；所述蛋白質的質量百分數(shù)
6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述多糖包括羧甲基殼聚糖、葡聚糖和糖胺聚糖中的一種或多種；所述多糖的質量百分數(shù)為0.3%~2％；可選地，所述多糖的質量百分數(shù)為0.5％~0.8％，所述多糖為羧甲基殼聚糖或葡聚糖。
7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述無機鹽為非有毒金屬離子無機鹽，包括氯化鈉、氯化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、磷酸鈉鹽和磷酸鉀鹽中的一種或多種；所述無機鹽的質量百分數(shù)可為0.2%~2％；可選地，所述無機鹽的質量百分數(shù)可為0.6％~0.8％，所述無機鹽為氯化鈉。
8.一種質控品，其特征在于，所述質控品含有權利要求1~7任一項所述的痰液基質。
9.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒含有權利要求1~7任一項所述的痰液基質，或者含有權利要求8所述的質控品。
10.權利要求1~7任一項所述的痰液基質，或者權利要求8所述的質控品，或者權利要求9所述的試劑盒在檢測樣本中的病原菌的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種模擬痰液基質的制備方法，其特征在于，包括天然親水膠體、表面活性劑、蛋白質、多糖、無機鹽和水。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述親水膠體包括黃原膠、阿拉伯膠和槐豆膠中的一種或多種；所述親水膠體的質量百分數(shù)為1%~5％，可選地，所述親水膠體的質量百分數(shù)為1％~2％，所述親水膠體為黃膠原或阿拉伯膠。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述表面活性劑包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和羥丙甲基纖維素中的至少兩種；所述表面活性劑的質量百分數(shù)為3%~10％。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述表面活性劑包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和羥丙甲基纖維素中的至少兩種；所述表面活性劑的質量百分數(shù)可為3%~10％；可選地，所述表面活性劑的質量百分數(shù)為4％~6％，所述表面活性劑由聚乙烯吡咯烷酮和羥丙甲基纖維素組成，所述聚乙烯吡咯烷酮和羥丙甲基纖維素的質量比為（1~2.5）：（2~3）。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白質包括酪蛋白、黏液蛋白和白蛋白中的一種或多種；所述蛋...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：劉美江，李婷婷，孫康俊，
申請(專利權)人：江蘇美克醫(yī)學技術有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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