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    一種藥用植物美冠蘭的組培方法技術

    技術編號:44491046 閱讀:4 留言:0更新日期:2025-03-04 17:56
    本發明專利技術涉及植物組培技術領域,本發明專利技術公開了一種藥用植物美冠蘭的組培方法,包括如下步驟:步驟(1):以美冠蘭的種子作為外植體采用植物組織培養方法,依次誘導原球莖、類原球莖、芽和根;步驟(2):隨后將生根的小苗進行壯苗培養后煉苗移栽。借助該組培方法實現的繁殖系數大于1:28。將壯苗培養后的苗移入離體保存培養基中繼代周期可達到24個月以上。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及植物組培,具體涉及一種藥用植物美冠蘭的組培方法。


    技術介紹

    1、本節中的陳述僅提供與本申請公開相關的背景信息,并且可能不構成現有技術。

    2、美冠蘭(eulophia?graminea),隸屬于蘭科(orchidaceae)美冠蘭屬(eulophia),地生草本,假鱗莖圓錐形或近球形,綠色,部分露出地面。葉3-5枚,在花全部凋萎后出現,線形或線狀披針形。總狀花序直立,花葶從假鱗莖一側節上發出,中部以下具鞘,常有1-2個側分枝,疏生多數花。植株見花不見葉,可用于點綴庭院草坪、花壇或室內盆栽,是鮮切花潛在資源,極具園藝觀賞價值。美冠蘭是我國重要的藥用植物資源,國內主要分布于長江以南熱帶與亞熱帶地區,其假鱗莖入藥,民間應用廣泛,具有止血定痛的功能,用于外傷出血,蛇蟲咬傷等。在自然條件下,美冠蘭以種子繁殖為主,但種子萌發依賴真菌等因素,萌發率低,種群更新速度慢,加之藥用材料主要來源于野生資源,導致野生群體日趨減少,急需開展行之有效的保護及組培快繁相關研究,以緩解美冠蘭日益增長的市場需求和野生資源枯竭之間的矛盾。

    3、植物離體保存是指利用組織培養技術,將植物的組織、器官(如根、莖、葉、成熟或未成熟的胚等)在人工條件下進行保存,使其分化后重新生長為完整植株。離體培養技術可以快速、大量地實現植物個體的克隆快繁,為重要的野生植物資源以及珍稀瀕危的物種保存和快速繁殖提供了一種高效途徑。目前,關于美冠蘭通過組織培養技術進行離體保存相關方面的研究未見報道。


    技術實現思路

    <p>1、本專利技術的目的在于:針對目前市場需求和野生資源枯竭之間的矛盾,提供了一種藥用植物美冠蘭的組培方法,利用本申請的培養基可以完成外植體種子的萌發、類原球莖誘導、增殖和分化、生根誘導,壯苗培養,建立美冠蘭的快繁和離體保存體系,繼代周期達24個月以上,為具重要藥用和觀賞價值的野生植物資源的收集保護、引種馴化、開發利用提供技術支撐。

    2、本專利技術的技術方案如下:

    3、本專利技術一方面提供一種藥用植物美冠蘭的組培方法,包括如下步驟:

    4、步驟(1):以美冠蘭的種子作為外植體采用植物組織培養方法,依次誘導原球莖、類原球莖、芽和根;

    5、步驟(2):隨后將生根的小苗進行壯苗培養后煉苗移栽。

    6、根據一種優選的實施方式,步驟(1)包括如下子步驟:

    7、步驟(1.1):以美冠蘭的種子作為外植體,滅菌;

    8、步驟(1.2):將種子在萌發培養基中培養萌發形成原球莖,所述萌發培養基的配方為:1/2ms+naa0.5mg/l+蔗糖20g/l+瓊脂7g/l;

    9、步驟(1.3):將步驟(2)中制備的原球莖在增殖培養基中進行類原球莖誘導;所述增殖培養基的配方為:ms+ba0.5mg/l+tdz0.1mg/l+ac2g/l+蔗糖30g/l+瓊脂7g/l;

    10、步驟(1.4):將誘導得到的類原球莖接種到芽誘導培養基中進行誘導,所述芽誘導培養基的配方為:1/2ms+naa1.0mg/l+蔗糖20g/l+ac2g/l+瓊脂7g/l;

    11、步驟(1.5):將誘導分化的芽接種到生根培養基上進行生根誘導;所述生根培養基的配方為:1/2ms+iba1.0mg/l+ac2g/l+蔗糖20g/l+瓊脂7g/l;

    12、根據一種優選的實施方式,步驟(2)包括如下子步驟:

    13、步驟(2.1):將生根的小苗轉接到壯苗培養基上進行培養,所述壯苗培養基的配方為:花寶1號3g/l+tdz0.1mg/l+naa0.5mg/l+ac2g/l+蔗糖30g/l+瓊脂7g/l。

    14、步驟(2.2):煉苗移栽。

    15、根據一種優選的實施方式,所述步驟(1.3)中,類原球莖誘導進行三次繼代培養,繼代周期為25-35天。

    16、根據一種優選的實施方式,步驟(1)中的培養條件為光照強度2000lx,光照時間12h/d,溫度25℃。

    17、根據一種優選的實施方式,步驟(1.1)中的滅菌包括分別使用無菌水洗滌和使用二氯異氰尿酸鈉進行滅菌。

    18、根據一種優選的實施方式,所述滅菌操作在無菌dna純化柱中進行。本專利技術另一方面提供一種藥用植物美冠蘭的離體保存方法,包括如下步驟:

    19、步驟(1):以美冠蘭的種子作為外植體采用植物組織培養方法,依次誘導原球莖、類原球莖、芽和根;

    20、步驟(2):隨后將生根的小苗進行壯苗培養后轉移到離體保存培養基上進行離體保存。

    21、根據一種優選的實施方式,所述離體保存培養基的配方為:1/2ms+naa0.1mg/l+ac2g/l+蔗糖30g/l+瓊脂7g/l。

    22、與現有的技術相比本專利技術的有益效果是:

    23、1、藥用植物美冠蘭的組培方法,實現了高難度利用種子誘導類原球莖,進而培養得到美冠蘭植株;并且繁殖系數還很高,大于1:28;誘導得到的植株的移栽成活率達到95%以上;解決了美冠蘭難以快速、大量地實現植物個體的克隆快繁的問題;

    24、2、藥用植物美冠蘭的組培方法,利用本申請優化的培養基和組培方法,能夠在更少的激素量的情況下實現更好的培養效果;

    25、3、藥用植物美冠蘭的組培方法,基于本申請的組培方法,能夠完整建立美冠蘭的離體保存體系,離體保存的繼代周期達24個月以上,具有極大的利用價值。

    本文檔來自技高網
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    【技術保護點】

    1.一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,步驟(1)包括如下子步驟:

    3.根據權利要求1所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,步驟(2)包括如下子步驟:

    4.根據權利要求2所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,所述步驟(1.3)中,類原球莖誘導進行三次。

    5.根據權利要求4所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,繼代周期為25-35天。

    6.根據權利要求2所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,步驟(1)中的培養條件為光照強度2000lx,光照時間12h/d,溫度25℃。

    7.根據權利要求2所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,步驟(1.1)中的滅菌包括分別使用無菌水洗滌和使用二氯異氰尿酸鈉進行滅菌。

    8.根據權利要求7所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,所述滅菌在無菌DNA純化柱中進行。

    9.一種藥用植物美冠蘭的離體保存方法,其特征在于,包括如下步驟:

    10.根據權利要求9所述的一種藥用植物美冠蘭的離體保存方法,其特征在于,所述離體保存培養基的配方為:1/2MS+NAA0.1mg/L+AC?2g/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L。

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    【技術特征摘要】

    1.一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,步驟(1)包括如下子步驟:

    3.根據權利要求1所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,步驟(2)包括如下子步驟:

    4.根據權利要求2所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,所述步驟(1.3)中,類原球莖誘導進行三次。

    5.根據權利要求4所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,繼代周期為25-35天。

    6.根據權利要求2所述的一種藥用植物美冠蘭的組培方法,其特征在于,步驟(1)中的培養條...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:孫華英,趙倩男郭英,何俊,
    申請(專利權)人:云南中醫藥大學
    類型:發明
    國別省市:

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