【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及抗菌肽，尤其是涉及一種小分子活性肽及其制備方法與應用。
技術介紹
1、幽門螺旋桿菌是存在于胃及十二指腸球部的一種螺旋狀細菌，該細菌為革蘭氏陰性菌，長期穩定地定居于胃竇部，能夠通過產尿素酶分解尿素產生氨，此外還會分泌細胞毒素，引起炎癥及免疫反應。幽門螺旋桿菌感染是一種感染性疾病，全球感染率高達50％，其與消化不良、胃炎、消化性潰瘍和胃癌的發生密切相關。而根除幽門螺桿菌可減輕胃黏膜炎癥，促進潰瘍愈合，降低胃癌發生風險。
2、相關技術中，抗生素是治療幽門螺桿菌的常用藥物，臨床上獲得較好的治療效果，但是長期使用容易導致該菌的耐藥率逐漸升高。在幽門螺旋桿菌治療中，通常對于原發性感染，克拉霉素和左氧氟沙星耐藥率為20％～40％，甲硝唑耐藥率為60％～90％；對于繼發性感染，克拉霉素耐藥率70～80％，左氧氟沙耐藥率60～70％，甲硝唑耐藥率均>90％。然而隨著阿莫西林、呋喃唑酮、四環素等藥物的不斷使用，幽門螺旋桿菌耐藥率也在悄然升高，導致三聯甚至含甲硝唑的四聯根除治療幽門螺旋桿菌的方案的成功率難以達到c級(85％～89％)。
3、抗菌肽是廣泛存在于生物體內的一種具有生物活性的小分子多肽，通常由12～50個氨基酸殘基組成，無高度保守的序列，大多數是短的、兩親性的、高度陽離子的分子。目前已被證實的抗菌肽作用機制有細胞膜靶向機制、細胞壁靶向機制、細胞內靶向機制、雙重或多重機制。然而抗菌肽最普遍的作用機制是通過它們在病原體細胞膜上的直接活性起效，這是由于很多的抗菌肽具有凈正電荷，抗菌肽的帶電性有助于它們與
4、tilapia?piscidin?4(tp4，氨基酸序列：fihhiigglfsagkaihrl?irrrrr，分子量：2982g/mol)是一種從羅非魚中分離出的抗菌肽，對幽門螺旋桿菌具有很強的抗菌殺菌作用，顯示出治療幽門螺旋桿菌感染的較強潛力。然而在溶血試驗中，當tp4濃度為100μg/ml時，其溶血率達到100％，由于其具有過高的溶血活性，且分子量較大，生產成本高，限制其在人類中的臨床應用。
5、因此，開發新的能針對耐藥幽門螺旋桿菌菌株的小分子活性肽就顯得非常必要。
技術實現思路
1、本專利技術旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本專利技術提出一種小分子活性肽及其制備方法與應用，該小分子活性肽對幽門螺旋桿菌菌株具有優異的抗菌活性，且細胞毒性試驗顯示其安全性高，對細胞基本沒有毒性。
2、本專利技術的第一方面，提供了一種小分子活性肽，包括式i所示化合物，或式i所示化合物的立體異構體、互變異構體、氮氧化物、溶劑化物、水合物、代謝產物、藥學上可接受的鹽、藥學上可接受的酯、藥學上可接受的醚或前藥：
3、
4、其中，所述r1和r2均獨立選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷氨基、鹵代烷基或環烷基，或者，r1和r2相連形成環烷基。
5、根據本專利技術實施例的小分子活性肽，至少具有如下有益效果：
6、(1)成本低、穩定性好，本專利技術的小分子活性肽是基于tp4(tilapia?piscidin?4)多肽序列改造得到，相對于tp4具有更少的氨基酸數目(由25個減少至3個)，極大地降低了合成的難度和成本，同時本專利技術在其基礎上還引入了d-型氨基酸，有助于提高化合物的穩定性。
7、(2)優異的抗菌效果，本專利技術的小分子活性肽兼具類似于tp4端位連續排列的精氨酸結構，在生理條件下該活性小肽所帶正電荷為4(tp4為7)，在針對幽門螺旋桿菌抗菌活性測試中顯示出優異的抗菌能力。如當r1和r2為13～15碳烷基長鏈時，該活性小肽對幽門螺旋桿菌atcc43504菌株的最小抑菌濃度(minimum?inhibitory?concentration，mic)為0.25μg/ml。
8、(3)安全性高，本專利技術的小分子活性肽具有低溶血性特點，且細胞毒性試驗顯示，該活性小肽細胞半數中毒濃度cc50>200ug/ml，說明基本沒有細胞毒性，安全性高。
9、(4)優異的抗蛋白水解效果，本專利技術的小分子活性肽引入d型氨基酸結構，使得該活性小肽具有超強的抗胰蛋白酶/胃蛋白酶等蛋白酶水解的能力。
10、在本專利技術的一些實施方式中，所述r1和r2均獨立選自c1～18烷基、c2～18烯基、c2～18炔基、c1～18烷氧基、c1～18烷氨基、鹵代c1～18烷基或環c3～18烷基，或者，r1和r2相連形成環c3～18烷基。
11、在本專利技術的一些實施方式中，所述r1和r2均獨立選自c6～18烷基、c6～18烯基、c6～18炔基、c6～18烷氧基、c6～18烷氨基、鹵代c6～18烷基或環c6～18烷基，或者，r1和r2相連形成環c6～18烷基。
12、在本專利技術的一些實施方式中，所述r1和r2均獨立選自c6～18烷基、c6～18烯基、c6～18炔基或c6～18烷氨基。
13、在本專利技術的一些實施方式中，所述r1和r2均獨立選自c12～16烷基。
14、在本專利技術的一些實施方式中，所述r1和r2均獨立選自c13～15烷基。
15、在本專利技術的一些實施方式中，所述r1和r2均獨立選自c14或c15烷基。
16、在本專利技術的一些實施方式中，所述式i所示化合物選自如下式i-1～式i-18所示化合物中的任一種：
17、
18、
19、
20、在本專利技術的一些實施方式中，“藥學上可接受的鹽”是指本專利技術式i所示化合物的鹽，由本專利技術發現的具有特定取代基的化合物與相對無毒的酸或堿制備。當本專利技術的化合物中含有相對酸性的功能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的堿與這類化合物的游離體形式接觸的方式獲得堿加成鹽。當本專利技術的化合物中含有相對堿性的官能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的酸與這類化合物的游離體形式接觸的方式獲得酸加成鹽。
21、在本專利技術的一些實施方式中，所述藥學上可接受的鹽包括但不僅限于三氟乙酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、芳基磺酸鹽、苯甲酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、丁二酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、烷基磺酸鹽和芳基磺酸鹽。
22、在本專利技術的一些實施方式中，所述烷基磺酸鹽包括但不僅限于甲基磺酸鹽和乙基磺酸鹽中。
23、在本專利技術的一些實施方式中，所述芳基磺酸鹽包括但不僅限于苯磺酸鹽和對甲苯磺酸鹽中。
24、優選地，所述藥學上可接受的鹽為三氟乙酸鹽。
25、本專利技術的第二方面，提供一種如第一方面所述的小分子活性肽的制本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種小分子活性肽，其特征在于：包括式I所示化合物，或式I所示化合物的立體異構體、互變異構體、氮氧化物、溶劑化物、水合物、代謝產物、藥學上可接受的鹽、藥學上可接受的酯、藥學上可接受的醚或前藥：
2.根據權利要求1所述的小分子活性肽，其特征在于：所述R1和R2均獨立選自C1～18烷基、C2～18烯基、C2～18炔基、C1～18烷氧基、C1～18烷氨基、鹵代C1～18烷基或環C3～18烷基，或者，R1和R2相連形成環C3～18烷基；
3.根據權利要求1所述的小分子活性肽，其特征在于：所述R1和R2均獨立選自正己烷、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、2,3-二甲基丁烷和2,2-二甲基丁烷、正庚烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、2,4-二甲基戊烷、2,3-二甲基戊烷、2,2-二甲基戊烷、3,3-二甲基戊烷、3-乙基戊烷、2,2,3-三甲基丁烷、正辛烷、2,2-二甲基己烷、3,3-二甲基己烷、2,3-二甲基己烷、2,4-二甲基己烷、2,5-二甲基己烷、3,4-二甲基己烷、3-乙基己烷、正壬烷、正癸烷、正十一烷、正十二烷、正十三烷、正十四烷、正十五烷、正十六烷、正十七烷或正
4.根據權利要求1所述的小分子活性肽，其特征在于：所述式I所示化合物選自如下式I-1～式I-18所示化合物中的任一種：
5.一種如權利要求1所述的小分子活性肽的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述脫保護基處理包括采用三氟乙酸或二氯甲烷處理。
7.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述X1和X2獨立選自Boc基團、Cbz基團、Fmoc基團、Alloc基團、Teoc基團、甲(乙)氧羰基基團、Pht基團、Tos基團、Tfa基團、Trt基團、PMB基團、Bn基團中的任一種。
8.一種藥物組合物，其特征在于：包括如權利要求1至4任一項所述的小分子活性肽，及藥學上可接受的輔料。
9.如權利要求1至4任一項所述的小分子活性肽或權利要求8所述的藥物組合物在制備抗菌藥物中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述抗菌藥物為抗幽門螺旋桿菌的藥物。
...【技術特征摘要】
1.一種小分子活性肽，其特征在于：包括式i所示化合物，或式i所示化合物的立體異構體、互變異構體、氮氧化物、溶劑化物、水合物、代謝產物、藥學上可接受的鹽、藥學上可接受的酯、藥學上可接受的醚或前藥：
2.根據權利要求1所述的小分子活性肽，其特征在于：所述r1和r2均獨立選自c1～18烷基、c2～18烯基、c2～18炔基、c1～18烷氧基、c1～18烷氨基、鹵代c1～18烷基或環c3～18烷基，或者，r1和r2相連形成環c3～18烷基；
3.根據權利要求1所述的小分子活性肽，其特征在于：所述r1和r2均獨立選自正己烷、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、2,3-二甲基丁烷和2,2-二甲基丁烷、正庚烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、2,4-二甲基戊烷、2,3-二甲基戊烷、2,2-二甲基戊烷、3,3-二甲基戊烷、3-乙基戊烷、2,2,3-三甲基丁烷、正辛烷、2,2-二甲基己烷、3,3-二甲基己烷、2,3-二甲基己烷、2,4-二甲基己烷、2,5-二甲基己烷、3,4-二甲基己烷、3-乙基己烷、正壬烷、正癸烷、正十一烷、正十二烷、正十三烷...
【專利技術屬性】
技術研發人員：陳偉強，何頌恒，李金輝，趙志榮，盧智俊，
申請(專利權)人：廣州朗圣藥業有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。