【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及流式細胞儀，尤其涉及一種使用空白微球進行自動調節本底的方法及流式細胞儀。
技術介紹
1、流式細胞儀廣泛應用于生物醫學、藥物研發和臨床診斷等領域，其通過激光光源激發細胞中的熒光標記物，進而檢測細胞的特性，然而，流式細胞儀在使用過程中常常受到環境光和儀器本身噪聲的影響，導致本底信號(背景信號)的變化，而本底信號會影響細胞的熒光信號，導致測量結果的準確性和重復性降低，從而影響測量的準確性和重復性。因此，設置合適的本底信號閾值，對于區分真實信號和背景噪聲至關重要。
2、空白微球是指沒有任何標記物的微小球體，通常由聚合物或其他生物相容材料制成?？瞻孜⑶?，常用于流式細胞儀和其他生物技術實驗中，主要目的是為了校準和評估儀器的性能，尤其是在測量本底信號和熒光強度方面，在沒有細胞樣本的情況下，通過檢測空白微球的信號，可以評估儀器的本底水平，確保在分析真實樣本時，能夠準確區分信號和噪聲。
3、目前，傳統的流式細胞儀通常通過手動設定本底信號閾值的方法來調整本底信號，需要在采集過程中，不斷地對每一個流式圖形的數據分布進行手動圈門，根據本底信號數據位置，給每一個熒光通道的高度信號與面積信號，手動設置高度本底閾值與面積本底閾值，然后手動進行重新采集，直到測量的本底信號能夠達到設定的目標范圍，才能停止調試過程。傳統的本底調試過程繁瑣，調試時間長，調試效率低，且調試效果依賴于調試人員的經驗，結果容易受人為主觀因素影響，不同的調試者或者同一調試者在不同調試過程中，均存在結果的差異，進而導致儀器測量的準確性與重復性得不到保證。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種使用空白微球進行自動調節本底的方法及流式細胞儀，解決了現有的流式細胞儀通常通過手動設定本底信號閾值的方法來調整本底信號，調試過程繁瑣，調試時間長，調試效率低，且調試效果依賴于調試人員的經驗，結果易受人為主觀因素影響而存在結果差異，從而導致儀器測量的準確性與重復性得不到保證的技術問題。
2、為實現上述目的，第一方面，本專利技術提供了一種流式細胞儀，包括激光光源模塊、光學檢測模塊、信號處理單元模塊和計算機數據處理與用戶界面，所述激光光源模塊、所述光學檢測模塊、所述信號處理單元模塊和所述計算機數據處理與用戶界面依次連接；
3、所述激光光源模塊，用于激發樣本；
4、所述光學檢測模塊，用于檢測激發后的樣本所發出的熒光信號；
5、所述信號處理單元模塊，用于對采集的信號進行處理和分析，并將分析結果傳輸給計算機系統；
6、所述計算機數據處理與用戶界面，用于對接收到的分析結果進行數據處理，并對處理后的測量結果進行顯示。
7、第二方面，本專利技術還提供了一種使用空白微球進行自動調節本底的方法，包括以下步驟：
8、空白微球配置，選擇適當的空白微球，配置所述空白微球的試劑；
9、本底信號采集，啟動流式細胞儀，使用激光光源激發所述空白微球，實時監測其熒光信號，并記錄本底信號數據；
10、數據預處理，對采集的信號進行去噪聲處理和歸一化，以提高數據質量；
11、本底信號分析，統計分析所述空白微球的熒光信號，確定本底信號的中值和標準差；
12、本底閾值計算，根據本底信號的統計特性計算信號閾值；
13、信號分類與分析，將采集到的信號與閾值進行比較，分類有效信號和背景信號，并進行聚合分析；
14、反饋與調整，根據實時分析結果，判斷信號閾值的適用性，并進行動態調整；
15、結果輸出，將處理后的數據和分析結果展示在用戶界面上，并存儲于數據庫中以供后續分析。
16、其中，所述本底信號采集的具體步驟為：
17、啟動流式細胞儀，讓所述流式細胞儀產生激光光源激發空白微球，并在激發后，將所述空白微球試管放置到進樣器上；
18、打開軟件自動本底調節界面，點擊“自動本底調節”按鈕，開始自動采集所述空白微球所發出的熒光信號；
19、在對所述空白微球所發出的熒光信號進行實時采集后，實時記錄采集的熒光信號數據，實現本底信號數據的記錄。
20、其中，所述數據預處理的具體步驟為：
21、去噪聲處理，采用中值濾波器對采集到的本底信號數據進行濾波處理，以平滑信號，去除所述信號中的高頻噪聲；
22、信號歸一化，在去噪聲處理后，將所述本底信號數據的信號強度進行歸一化處理，以消除樣本濃度或激光強度變化的影響。
23、其中，所述本底信號分析的具體步驟為：
24、通過fsc-h、ssc-h散點圖的數據分布，采用meanshift均值偏移聚類算法，得到空白微球群體，自動計算矩形門，使得所述空白微球全部包含在所述矩形門內；
25、通過ampd峰值檢測算法，自動直方圖上識別每個熒光通道的信號峰值，通過自動計算線性門位置，讓每一個熒光通道的直方圖內的所述空白微球包含在線性門內，并計算所述空白微球的信號的中值和標準差；
26、以此為基礎，評估所有的本底信號的特性，確定正常范圍。
27、其中，所述本底閾值計算的具體步驟為：
28、計算每個熒光通道的本底信號的測量中值；
29、再計算測量值與目標中值位置的差值；
30、設定本底閾值，將所述差值設置為所述本底閾值。
31、其中，所述反饋與調整的具體步驟為：
32、實時反饋，將分析結果與預設靶值進行對比，判斷當前信號閾值是否需要調整；
33、若信號中值在目標中值范圍內，則不需要繼續調整，若信號中值在靶值中值范圍之外，則需要自動進行重復采集并調整本底閾值；
34、動態更新，根據實時采集的數據，不斷更新本底信號的估計和閾值計算，并自動發送計算的本底閾值到儀器，自動進行重新采集；
35、當所有通道滿足靶值條件或者達到設定的迭代次數后，自動停止采集；
36、在停止采集后，自動通過采集的數據中值與本底閾值進行判斷是否滿足設定的靶值條件，是，則調試成功，通過；否，則調試失敗，通過自動判定過程，確保測量的準確性。
37、本專利技術的一種使用空白微球進行自動調節本底的方法及流式細胞儀，通過自動調節本底信號，減少背景噪聲的影響，使得目標信號更加清晰，測量結果更為準確，能夠提高測量精度。實時監測和調整機制確保儀器在不同環境條件下始終保持最佳性能，減少了因環境變化導致的測量不穩定性，增強儀器穩定性。簡化的操作界面和自動調節功能使得即使是新手用戶也能快速上手，降低了培訓成本，增加用戶友好性。利用空白微球進行實時監測和自動調整，增強了儀器的操作便捷性，適應不同實驗條件，確保流式細胞儀在出廠前能夠自動調節本底信號，從而提供一致且可靠的性能，減少調試時間，顯著提高調試效率與儀器測試的準確性。自動化流程減少了用戶手動調試本底的需求，使得實驗人員能夠專注于數據分析和實驗設計，提高工作效率，節省時間和人力成本。...
【技術保護點】
1.一種流式細胞儀，其特征在于：
2.一種使用空白微球進行自動調節本底的方法，應用于權利要求1所述的流式細胞儀，其特征在于，包括以下步驟：
3.如權利要求2所述的流式細胞儀，其特征在于：
4.如權利要求2所述的使用空白微球進行自動調節本底的方法，其特征在于：
5.如權利要求2所述的使用空白微球進行自動調節本底的方法，其特征在于：
6.如權利要求2所述的使用空白微球進行自動調節本底的方法，其特征在于：
7.如權利要求2所述的使用空白微球進行自動調節本底的方法，其特征在于：
【技術特征摘要】
1.一種流式細胞儀，其特征在于：
2.一種使用空白微球進行自動調節本底的方法，應用于權利要求1所述的流式細胞儀，其特征在于，包括以下步驟：
3.如權利要求2所述的流式細胞儀，其特征在于：
4.如權利要求2所述的使用空白微球進行自動調節本底...
【專利技術屬性】
技術研發人員：饒云，蘇存，胡鈺靜，邱藝，肖昌林，
申請(專利權)人：桂林優利特醫療電子有限公司，
類型：發明
國別省市：
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