【技術實現步驟摘要】
本申請屬于醫用配制品，具體涉及一種新型芳香烴受體信號通路激動劑及其應用。
技術介紹
1、芳香烴受體(ahr)是一種高度進化保守的配體激活轉錄因子，廣泛分布于人體內的多種組織和細胞中，調控多種生物和毒理效應。ahr已被證明在多種組織中有表達，如腎臟、肝臟、肺等，并在各種生理和病理過程中發揮重要作用。近年來，針對ahr的研究日益深入，其作為藥物作用靶點的研究也日益增多。ahr可以被一些內源性和外源性化合物激活：外源性配體包括多環芳烴(pahs)、二惡英(tcdd)、多氯聯苯(pcbs)等；ahr的內源性配體包括色氨酸代謝產物的犬尿氨酸(kyn)和6-甲酰基吲哚[3,2-b]咔唑(ficz)等。這些配體與ahr結合后能夠介導毒性效應、調控細胞增殖、調節免疫系統等，如：kyn可以通過ahr刺激心肌細胞增殖和心臟血管生成；ficz可以通過ahr促進骨再生等。另外，wu等人在博來霉素誘導小鼠肺纖維化的實驗中發現，相比野生型小鼠，ahr敲除的小鼠肺纖維化加重。這些證據都表明ahr參與著復雜多樣的生理及病理過程，是重要的作用靶點。
2、ahr與多種肝臟和腎臟疾病密切相關。研究發現，ahr在肝臟中參與化學防御和內源性物質的代謝調控，同時在腎臟中調控氧化應激和細胞凋亡。kyn通過激活ahr在中樞神經系統和外周組織中發揮重要作用，包括抑制免疫反應和參與癌癥發生等過程。ficz能夠促進肝臟細胞的再生和修復，減輕肝臟損傷。同時，ficz還能夠通過調節腎臟細胞的代謝過程，改善腎臟功能。此外，ahr的活性還影響腎臟的纖維化和炎癥反應，研究表明ah
3、馬兜鈴酸類化合物是一類重要的天然產物，在中草藥中廣泛存在。既往研究發現，馬兜鈴酸類化合物對肝臟和腎臟具有顯著的毒性和致癌性，導致嚴重的肝臟和腎臟損傷，表現為肝細胞壞死、腎小管間質纖維化等病理變化。kim等人發現馬兜鈴酸通過誘導氧化應激和dna損傷，在體內發揮致癌和致毒效應。
技術實現思路
1、本申請的目的是：提供用于芳香烴受體信號通路研究的細胞模型并用于芳香烴受體信號通路研究。
2、本申請提供制備芳香烴受體信號通路被激活的目的腎小管上皮細胞的方法，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體(ahr)的激動劑進行接觸，獲得目的腎小管上皮細胞。
3、本申請還提供激活腎小管上皮細胞中芳香烴受體信號通路的方法，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體(ahr)的激動劑進行接觸，以激活腎小管上皮細胞中芳香烴受體信號通路。
4、本申請還提供上調、提高或增加腎小管上皮細胞中的ahr下游基因ahrr和cyp1a1的表達的方法，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體(ahr)的激動劑進行接觸，以上調、提高或增加腎小管上皮細胞中的ahr下游基因ahrr和cyp1a1的表達。
5、進一步地，所述的方法中，所述芳香烴受體(ahr)的激動劑為馬兜鈴內酰胺i。
6、進一步地，所述的方法中，實現使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體(ahr)的激動劑進行接觸的體系中馬兜鈴內酰胺i的含量為10-10m、10-9m、10-8m、10-7m、10-6m或10-5m，
7、進一步地，所述馬兜鈴內酰胺i的添加劑量10-7m或10-6m。
8、本申請中“ahr”是指芳香烴受體，是一個堿性螺旋-環-螺旋(basic?helix-loop-basic?helix，bhlh)per-arnt-sim同源域(per-arnt-sim?homology?domain，pas)蛋白，屬于bhlh超家族的轉錄因子。所述芳香烴受體信號通路是指當位于細胞質中的ahr與進入細胞內的配體結合后，會通過核孔進入細胞核內并與芳香烴受體核轉位因子(arylhydrocarbon?receptor?nuclear?translocator,arnt)形成二聚體。形成的二聚體可以與dna中的異源響應元件(xenobiotic?response?element，xre)結合，促進或調控下游基因的表達的細胞內信號傳導的過程。
9、所述芳香烴受體信號通路激動劑可為激活芳香烴受體信號通路的物質。
10、所述激動劑可為激活腎小管上皮細胞中芳香烴受體信號通路的物質。
11、所述激活芳香烴受體信號通路或芳香烴受體信號通路被激活可體現為上調、提高或增加腎小管上皮細胞中的ahr下游基因的表達。
12、所述ahr下游基因可為ahrr(ncbi?reference?sequence:nm_001377236，更新時間：2024-10-29)和cyp1a1(ncbi?reference?sequence:nm_000499，更新時間：2024-10-15)。
13、所述馬兜鈴內酰胺i制備的激動劑可用于制備ahr信號通路被激活的腎小管上皮細胞。ahr信號通路被激活的腎小管上皮細胞可用于篩選新的抗emt藥物(抗腎小管上皮間充質轉化(epithelial-to-mesenchymal?transition，emt)的藥物)。
14、芳香烴受體(aryl?hydrocarbon?receptor,ahr)是一種在細胞內可以結合配體的轉錄調控因子。正常情況下，ahr存在于細胞質中，與多種伴侶蛋白形成復合物。但ahr在與配體結合后，會通過核孔進入細胞核內并與芳香烴受體核轉位因子(aryl?hydrocarbonreceptor?nuclear?translocator,arnt)形成二聚體。形成的二聚體可以與dna中的異源響應元件(xenobiotic?response?element，xre)結合，促進下游基因表達。ahr在核內同時也能與其他轉錄因子結合，從而影響受到結合的轉錄因子調控的基因的表達。
15、進一步地，所述的方法中，所述腎小管上皮細胞可為離體的細胞。
16、上述方法可用于制備ahr信號通路被激活的腎小管上皮細胞。ahr信號通路被激活的腎小管上皮細胞可用于篩選新的抗emt藥物(抗腎小管上皮間充質轉化(epithelial-to-mesenchymal?transition，emt)的藥物)。
17、本申請中，所述馬兜鈴內酰胺i的化學結構式如式(ⅰ)，其cas號為：13395-02-3(chemicalbook：https://www.chemicalbook.com/productindex.aspx)。
18、
19、本申請還提供馬兜鈴內酰胺i在制備芳香烴受體信號通路的激動劑中的應用。
20、本申請還提供細胞模型，所述細胞模型為按照包括如下步驟的方法獲得的目的腎小管上皮細胞：使離體的腎小管上皮細胞和芳香烴受體(ahr)的激動劑進行接觸，獲得目的腎小管上皮細胞，所述目的腎小管上皮細胞中所述纖維化標志基因的表達水平高于所述離體的腎小管上皮細胞。
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1.制備芳香烴受體信號通路被激活的目的腎小管上皮細胞的方法，其特征在于，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸，獲得目的腎小管上皮細胞。
2.激活腎小管上皮細胞中芳香烴受體信號通路的方法，其特征在于，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸，以激活腎小管上皮細胞中芳香烴受體信號通路。
3.上調、提高或增加腎小管上皮細胞中的AhR下游基因AhRR和CYP1A1的表達的方法，其特征在于，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸，以上調、提高或增加腎小管上皮細胞中的AhR下游基因AhRR和CYP1A1的表達。
4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其特征在于，所述芳香烴受體的激動劑為馬兜鈴內酰胺I。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，實現使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸的體系中馬兜鈴內酰胺I的含量為10-10M、10-9M、10-8M、10-7M、10-6M或10-5M，
6.馬兜鈴內酰胺I在制備芳香烴受體信號通路的激動劑中的應用。>
7.細胞模型，其特征在于，所述細胞模型為按照包括如下步驟的方法獲得的目的腎小管上皮細胞：使離體的腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸，獲得目的腎小管上皮細胞，所述目的腎小管上皮細胞中所述纖維化標志基因的表達水平高于所述離體的腎小管上皮細胞。
8.根據權利要求7所述的細胞模型，其特征在于，所述細胞模型中，使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸的體系中馬兜鈴內酰胺I的含量為10-10M、10-9M、10-8M、10-7M、10-6M或10-5M，
9.組合物在下述任一項中的應用，所述組合物包括馬兜鈴內酰胺I和哺乳動物細胞的培養基，
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述腎小管上皮細胞為離體的細胞。
...【技術特征摘要】
1.制備芳香烴受體信號通路被激活的目的腎小管上皮細胞的方法，其特征在于，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸，獲得目的腎小管上皮細胞。
2.激活腎小管上皮細胞中芳香烴受體信號通路的方法，其特征在于，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸，以激活腎小管上皮細胞中芳香烴受體信號通路。
3.上調、提高或增加腎小管上皮細胞中的ahr下游基因ahrr和cyp1a1的表達的方法，其特征在于，所述方法包括使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸，以上調、提高或增加腎小管上皮細胞中的ahr下游基因ahrr和cyp1a1的表達。
4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其特征在于，所述芳香烴受體的激動劑為馬兜鈴內酰胺i。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，實現使所述腎小管上皮細胞和芳香烴受體的激動劑進行接觸的體系中馬兜鈴內酰胺i...
【專利技術屬性】
技術研發人員：謝群慧，朱芮弘，趙斌，徐麗，陳旸升，
申請(專利權)人：中國科學院生態環境研究中心，
類型：發明
國別省市：
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