【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于醫學檢測，具體涉及一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒。
技術介紹
1、膽固醇是人體不可缺少的重要物質，它參與形成質膜，是合成膽汁酸、維生素d及甾體激素的原料。膽固醇等脂質在血清中與脫輔蛋白質結合生成脂蛋白，根據其物理性質的差異，可分為乳糜微粒?(cm)、極低密度脂蛋白(vldl)、低密度脂蛋白(ldl)以及高密度脂蛋白(hdl)。低密度脂蛋白(ldl)具有異質性，其中，顆粒較小密度較大的ldl稱為小而密低密度脂蛋白(small?dense?low-density?lipoprotein,?sdldl)，顆粒較大密度較小的ldl稱大而輕低密度脂蛋白，介于二者之間的亞組份稱為中密度低密度脂蛋白。相比之下，小而密低密度脂蛋白(sdldl)致動脈粥樣硬化的能力更強，更容易引起心血管疾病的發生。
2、小而密低密度脂蛋白膽固醇的檢測方法有密度梯度超速離心法、梯度凝膠電泳法、高效液相色譜法和酶法等。其中酶法分析時間短、準確度高，在臨床上應用較為廣泛。其它方法操作較繁瑣，不能滿足臨床批量檢測的需求。
3、采用酶法檢測小而密低密度脂蛋白膽固醇，是基于一種保護劑抑制小而密低密度脂蛋白膽固醇與試劑成分中的膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶反應，由于抑制效果不同，對檢測結果的準確性影響較大。保護劑的種類和配比差異，將影響檢測結果以及試劑的穩定性。傳統市售酶法小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒中存在以下問題，第一：保護劑配比復雜、效果不佳，部分小而密低密度脂蛋白膽固醇已與試劑成分中的膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶反應從而降低了整
技術實現思路
1、本專利技術針對現有技術的不足，提供了一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，該試劑盒的保護劑組分更加合理、檢測結果更加準確、穩定性更高。更適用于臨床上對動脈硬化的輔助診斷。
2、本專利技術采用技術方案為：
3、一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，該試劑盒包括試劑1試劑2，其中試劑1的主要成分為：2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）、膽固醇氧化酶（cod）、膽固醇酯酶（che）、過氧化氫酶（cat）、磷脂酶、n-乙基-n-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（toos）、表面活性劑、防腐劑；試劑2的主要成分為：2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）、過氧化物酶（pod）、4-氨基安替比林（4-aap）、triton?x-100、防腐劑。
4、優選地，試劑1中2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）濃度為50-500?mmol/l，膽固醇氧化酶（cod）濃度為0.4-2.0?ku/l，膽固醇酯酶（che）濃度為2.5-5.0?ku/l，過氧化氫酶（cat）濃度為1.0-2.0?ku/l，磷脂酶濃度為1.5-3.0?ku/l，n-乙基-n-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（toos）濃度為1.0-2.0?g/l，表面活性劑濃度為0.5-1.0?g/l，防腐劑濃度為0.2-0.4‰；試劑2中2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）濃度為50-500?mmol/l，過氧化物酶（pod）濃度為4.0-5.0?ku/l，4-氨基安替比林（4-aap）濃度為2.0-4.0?mmol/l，tritonx-100濃度為0.5-1.0?g/l，防腐劑濃度為0.2-0.4‰。
5、優選地，所述試劑1中：2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）濃度為100?mmol/l，膽固醇氧化酶（cod）濃度為1.0?ku/l，膽固醇酯酶（che）濃度為5.0?ku/l，過氧化氫酶（cat）濃度為1.2?ku/l，磷脂酶濃度為2.5?ku/l，n-乙基-n-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（toos）濃度為1.2?g/l，表面活性劑濃度為1.0?g/l，防腐劑濃度為0.2‰；試劑2的主要成分為：2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）濃度為100?mmol/l，過氧化物酶（pod）濃度為5.0ku/l，4-氨基安替比林（4-aap）濃度為4.0?mmol/l，triton?x-100濃度為1.0?g/l，防腐劑濃度為0.2‰。
6、優選地，所述試劑1中表面活性劑為乙醇聚醚-4-羧酸和萘磺酸甲醛聚合物，其濃度分別為0.5g/l。
7、優選地，所述試劑1和試劑2中防腐劑為2-羥基吡啶-n-氧化物（hopo）。
8、優選地，該試劑盒可用于檢測人體血清中小而密低密度脂蛋白膽固醇含量，試劑與樣本的比例為：試劑1:試劑2:樣本=300:?100:?3。
9、本專利技術具有如下有益效果：
10、1.通過在試劑1中加入表面活性劑乙醇聚醚-4-羧酸和萘磺酸甲醛聚合物，抑制小而密低密度脂蛋白膽固醇與試劑成分中的膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶進行反應而造成的假陰性，解決反應度低的問題，提高了試劑的準確度。
11、2.試劑1和試劑2中防腐劑選取2-羥基吡啶-n-氧化物(hopo)，與常規防腐劑proclin-300相比，不具有還原性對酶活無抑制作用，且防腐作用較好，可提高試劑的準確度和穩定性，有利于試劑的貯存。
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1.一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括試劑1試劑2，其中試劑1的主要成分為：2-(N-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（pH6.3）、膽固醇氧化酶（COD）、膽固醇酯酶（CHE）、過氧化氫酶（CAT）、磷脂酶、N-乙基-N-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（TOOS）、表面活性劑、防腐劑；試劑2的主要成分為：2-(N-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（pH6.3）、過氧化物酶（POD）、4-氨基安替比林（4-AAP）、Triton?X-100、防腐劑。
2.?如權利要求1所述的一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，試劑1中2-(N-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（pH6.3）濃度為50-500?mmol/L，膽固醇氧化酶（COD）濃度為0.4-2.0?KU/L，膽固醇酯酶（CHE）濃度為2.5-5.0?KU/L，過氧化氫酶（CAT）濃度為1.0-2.0KU/L，磷脂酶濃度為1.5-3.0?KU/L，N-乙基-N-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（TOOS）濃度為1.0-2.0?g/L，表面活性劑濃度為0.5-1.0?g/L，防腐劑濃度為0
3.?如權利要求1或2所述的一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑1中：2-(N-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（pH6.3）濃度為100?mmol/L，膽固醇氧化酶（COD）濃度為1.0?KU/L，膽固醇酯酶（CHE）濃度為5.0?KU/L，過氧化氫酶（CAT）濃度為1.2?KU/L，磷脂酶濃度為2.5?KU/L，N-乙基-N-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（TOOS）濃度為1.2g/L，表面活性劑濃度為1.0?g/L，防腐劑濃度為0.2‰；試劑2的主要成分為：2-(N-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（pH6.3）濃度為100?mmol/L，過氧化物酶（POD）濃度為5.0?KU/L，4-氨基安替比林（4-AAP）濃度為4.0?mmol/L，Triton?X-100濃度為1.0?g/L，防腐劑濃度為0.2‰。
4.?如權利要求1、2或3所述的一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑1中表面活性劑為乙醇聚醚-4-羧酸和萘磺酸甲醛聚合物，濃度分別為0.5?g/L。
5.如權利要求1、2或3所述的一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑1和試劑2中防腐劑為2-羥基吡啶-N-氧化物（HOPO）。
6.?一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒可用于檢測人體血清中小而密低密度脂蛋白膽固醇含量，試劑與樣本的比例為：試劑1:試劑2:樣本=300:100:?3。
...【技術特征摘要】
1.一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括試劑1試劑2，其中試劑1的主要成分為：2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）、膽固醇氧化酶（cod）、膽固醇酯酶（che）、過氧化氫酶（cat）、磷脂酶、n-乙基-n-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（toos）、表面活性劑、防腐劑；試劑2的主要成分為：2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）、過氧化物酶（pod）、4-氨基安替比林（4-aap）、triton?x-100、防腐劑。
2.?如權利要求1所述的一種小而密低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于，試劑1中2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）濃度為50-500?mmol/l，膽固醇氧化酶（cod）濃度為0.4-2.0?ku/l，膽固醇酯酶（che）濃度為2.5-5.0?ku/l，過氧化氫酶（cat）濃度為1.0-2.0ku/l，磷脂酶濃度為1.5-3.0?ku/l，n-乙基-n-(2-羥基-3-苯磺酸)-3-甲基苯胺鈉鹽（toos）濃度為1.0-2.0?g/l，表面活性劑濃度為0.5-1.0?g/l，防腐劑濃度為0.2-0.4‰；試劑2中2-(n-嗎啉代)乙磺酸緩沖液（ph6.3）濃度為50-500?mmol/l，過氧化物酶（pod）濃度為4.0-5.0ku/l，4-氨基安替比林（4-aap）濃度為2.0-4.0?mmol/l，triton?x-100濃度為0.5-1.0?g/l，防腐劑濃度為0.2-0.4‰...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王凈，孟廣宇，范瀟，王偉，
申請(專利權)人：江蘇邁源生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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