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【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術涉及生物檢測領域,具體為一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝。
技術介紹
1、生物胺是一類具有生物活性的含氮低分子量有機化合物,它們在動植物體內及食品中普遍存在。
2、生物胺化合物本身缺少發(fā)色基團,本身既無紫外吸收又無熒光及電化學活性,使得常規(guī)分析測定比較困難,已有多種植物組生物胺的提取檢測方法,但已有方法各有缺點,如前處理周期繁瑣、需要衍生化、靈敏度低、回收率低等技術難題。
3、因此,亟需一種工藝簡單且可批量進行的檢測植物組生物胺的工藝來解決上述問題。
技術實現(xiàn)思路
1、(一)解決的技術問題
2、針對現(xiàn)有技術的不足,本專利技術提供了一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,具備可快速處理大批量植物樣品等優(yōu)點,解決了上述
技術介紹
中的問題。
3、(二)技術方案
4、為實現(xiàn)上述可快速處理大批量植物樣品的目的,本專利技術提供如下技術方案:一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,包括以下檢測步驟:流動相配置、生物胺提取以及色譜儀與質譜儀讀數(shù)計算。
5、優(yōu)選的,所述流動相分為有機相和無機相,所述有機相為100%乙腈。
6、優(yōu)選的,所述無機相配置包括以下具體步驟:
7、取0.1%甲酸水溶液,取超純水900ml加入1l容量瓶,加入1ml甲酸,以超純定容至1l,顛倒混勻。
8、優(yōu)選的,所述生物胺提取包括以下具體步驟:
9、步驟a1:將植物樣品于液氮中研磨至粉末,稱取0.
10、步驟a2:冰水浴中超聲提取30min;
11、步驟a3:在控制溫度4℃下,10000g離心3min,取上清,沉淀以4ml20%乙腈再提取一次;
12、步驟a4:合并步驟a3中得到的兩次上清液,并以100%乙腈溶液定容至10ml;
13、步驟a5:將定容后的提取液混勻,取上清1ml,加入100μl甲酸,過0.22μm有機相濾膜,上機檢測。
14、優(yōu)選的,所述色譜儀液相條件為:
15、色譜儀液相條件:
16、色譜柱:waters?uplc?hss?t3?3.0×100mm?1.8μm;;
17、柱溫:35℃;
18、流動相:a:b=(水/0.1%甲酸):(乙腈);
19、流速:0.3ml/min;
20、進樣體積:2μl。
21、優(yōu)選的,所述質譜儀質譜參數(shù)為:
22、電離方式:esi正離子模式;
23、掃描類型:mrm;
24、氣簾氣:45psi;
25、噴霧電壓:+4000v;
26、霧化氣壓力:65psi;
27、輔助氣壓力:70psi;
28、霧化溫度:350℃。
29、優(yōu)選的,所述試樣溶液注入液相色譜質譜聯(lián)用儀中,得到相應色譜峰響應值,根據(jù)標準曲線得到待測液中多胺的濃度,并用以下公式計算多胺含量:
30、xii=pi*vv/m
31、式中:
32、xi為試樣中多胺含量,單位為納克每克(ng/g);
33、ρi為從標準曲線上得到的多胺溶液濃度,單位為納克每毫升(ng/ml);
34、v為樣液最終定容體積,單位為毫升(ml);
35、m為稱取的試樣質量,單位為克(g)。
36、(三)有益效果
37、與現(xiàn)有技術相比,本專利技術提供一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,具備以下有益效果:
38、該利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝通過優(yōu)化樣品提取方法和上機條件,可快速處理大批量植物樣品,對植物組生物胺進行同時檢測,通過較為簡便的植物前處理方法,快速處理植物樣品,以液質聯(lián)用方法檢測快速、準確檢測樣品中精胺、亞精胺、腐胺、尸胺的含量。
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1.一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:包括以下檢測步驟:流動相配置、生物胺提取以及色譜儀與質譜儀讀數(shù)計算。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述流動相分為有機相和無機相,所述有機相為100%乙腈。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述無機相配置包括以下具體步驟:
4.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述生物胺提取包括以下具體步驟:
5.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述色譜儀液相條件為:
6.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述質譜儀質譜參數(shù)為:
7.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述試樣溶液注入液相色譜質譜聯(lián)用儀中,得到相應色譜峰響應值,根據(jù)標準曲線得到待測液中多胺的濃度,并用以下公式計算多胺含量:
【技術特征摘要】
1.一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:包括以下檢測步驟:流動相配置、生物胺提取以及色譜儀與質譜儀讀數(shù)計算。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述流動相分為有機相和無機相,所述有機相為100%乙腈。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征在于:所述無機相配置包括以下具體步驟:
4.根據(jù)權利要求1所述的一種利用液質聯(lián)用檢測植物組生物胺的工藝,其特征...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員:柳曹枝,劉萍,孫甜,徐辰宵,
申請(專利權)人:南京瑞源生物技術有限公司,
類型:發(fā)明
國別省市:
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