【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于中藥鑒別，具體涉及基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法及應用。
技術介紹
1、近些年來，中藥因其獨特的療效在全世界范圍越來越受到歡迎和認可，是許多國家衛生保健系統的重要組成部分或補充部分。使用正確的中藥材品種并確保其制品在生產中真實投料，是保證中藥療效的關鍵，因此對中藥材及其制品進行準確鑒別，是保證中藥質量和守護人民生命健康的重要一環。
2、目前，中藥材及其制品(如中成藥，中藥配方顆粒，中藥提取物等)的鑒別方法可分為四大類：性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別和分子生物學鑒別(如dna條形碼鑒別)。上述方法具有適用性窄、專屬性差、操作繁瑣、耗時長及使用大量有毒、管控試劑等缺點(表1)。更重要的是，部分藥典品種及非藥典品種標準的質量控制水平偏低。中國食品藥品檢定研究院于2023年發表的一篇研究發現，當承檢機構按更高的標準對執行標準較低的品種質量進行考察時，往往會發現不投料或少投料的情況(聶黎行,吳炎培,劉靜,等.中成藥質量標準研究有關問題思考[j].藥學學報,2023,58(08):2260-2270)。因此，急需開發一種簡單快捷、準確全面、耐用性好的中藥材及其制品的鑒別方法。
3、表1中藥材及其制品現有鑒別方法的特點
4、
5、
6、液相色譜-質譜聯用(lc-ms)技術具有高靈敏度和優越的定性能力。近年來，該技術在中藥及其制品的鑒定中得到了廣泛應用。例如，在《中國藥典》(2020年版)中，阿膠、龜甲膠和鹿角膠均采用串聯質譜lc-ms/ms的特征mrm離子對
7、目前，有采用超高效液相色譜-高分辨質譜進行中藥及其制品鑒別的報道，但均未通過實驗和計算機編程去系統地挖掘各中藥材的特有離子群，也未提出基于各中藥材的特有離子進行中藥材及其制品鑒別的思路，而是把思路局限于依靠少數液質離子或少數特定的化合物進行鑒別。其分析流程為先通過人工篩選各組方中藥材存在于該中藥制品中的特征離子，這類離子非特有離子，即同一特征離子可能會存在于多種中藥材，并將此類特征離子用于中藥制品的鑒別。更具體地說,是找到一個中成藥組方中藥之間，彼此間相對特有的離子，而不是想著去找這個中藥相對更大范圍的特有離子。該類處理流程往往僅針對某一具體品種的中藥制品，如需將其應用于其他中藥制品時往往需要重新尋找離子，甚至重新開發方法，耗時長，普適性較差，難以用于組成復雜的中藥制品的鑒別。另外，基于人工篩選的特征離子用于鑒別各中藥材的專屬性差，而且也未對眾多中藥材的特有離子群進行系統的挖掘和發現。如專利技術專利cn?112903890(一種基于高分辨質譜技術鑒別食品中中藥材成分的方法)為人工指定70種中藥的特征組分(每種中藥的特征組分約5～10種非特異性離子)，當待測樣品中檢測到某一種中藥的全部特征組分時，則認為待測樣品中可能存在該中藥。特征組分通過綜述中藥化學、中藥分析等領域的文獻來確定，而非通過系統性的實驗研究確定，成分的特有性或專屬性缺乏具體的實驗證據。另外，該專利技術只適用于提出的70種中藥的鑒別，若想增加其他中藥品種則需要重新構建該品種的特征組分，繁瑣耗時。此外，重要的是該專利選取的特征性成分專屬性較差，如在山茱萸和川牛膝項下均有胡蘿卜苷，沙苑子中的毛蕊異黃酮、芒柄花素等成分也存在于黃芪等藥材中，因此對于組方復雜的樣品，可能會出現假陽性的結果。此外，對于生產工藝較為復雜的中藥制品，可能會因為某些中藥的特征組分無法傳遞到最終成品中，而導致假陰性結果。
8、如何通過系統的、真實的實驗研究篩選出各中藥材特有的、可用于鑒別的離子是制約超高效液相色譜-高分辨質譜技術用于中藥材及其制品鑒別方法的關鍵，這也是迄今為止為何只有少數幾種中藥材和中成藥采用本法進行鑒別的重要原因。盡管專利技術專利cn108152434(一種基于可視化質譜信息的中藥特異成分的查找方法)提出了一種基于可視化質譜信息的中藥特異成分的查找方法，但是該方法只能針對兩組(兩種)樣品查找差異成分，難以用于多種中藥(數十種及以上)的差異成分查找，且并未研究尋找到的差異成分能否用于中藥制品的鑒定。因此，需要開發一種能夠自動、快速識別各中藥材特有離子的方法，并將其用于中藥材及其制品的鑒別。
技術實現思路
1、針對現有鑒別方法的缺點，本專利技術提供一種基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法并將其應用于中藥材及其制品的鑒別。相較傳統鑒別方法，本專利技術中的待測樣品僅需超聲提取、液質分析和結果導出后就可得到鑒別結果，無需復雜的前處理，且在鑒別過程中僅使用甲醇、0.1％水、乙腈共計約50ml。相較目前已有的基于超高效液相色譜-高分辨質譜技術的鑒別方法，本專利技術能夠自動篩選出各中藥材特有一級離子并將其用于鑒別，這些特有一級離子的專屬性更強，且一次篩選所得的各中藥材特有一級離子可應用于所有含該中藥的制品，無需重新開發分析條件，具有很好的耐用性。
2、本專利技術所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，包括以下步驟：
3、(1-1)取各對照中藥材，分別加溶劑進行提取，得各對照中藥材溶液；
4、(1-2)將步驟(1-1)得到的各對照中藥材溶液，采用超高效液相色譜-高分辨質譜技術分析；
5、(1-3)將所有超高效液相色譜-高分辨質譜分析所得原始數據導出為包含全部超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子的質荷比和保留時間的峰值表；
6、(1-4)使用各對照中藥材的峰值表數據，以質荷比和保留時間篩選各中藥材特有的超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子。
7、步驟(1-1)所述的溶劑為醇或醇與水的混合液，優選甲醇或甲醇-水或水或乙醇或乙醇-水。
8、步驟(1-1)所述的提取方法為超聲提取法或回流提取法或索氏提取法或煎煮法。
9、步驟(1-4)所述的各中藥材特有超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子的篩選方法包括：
10、(1-4-1)選出一個對照中藥材的峰值表，將其余對照中藥材的峰值表合并；將單個中藥材的峰值表中的全部超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子與合并峰值表中的所有超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子數據進行比對；如果單個中藥材的峰值表中的超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子與合并峰值表中的超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子的質荷比的差小于閾值，且保留時間的差小于閾值，則表明該離子不是該中藥材特有的超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子，并將其排除，剩下的超高效液相色本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-1)所述的溶劑為醇或醇與水的混合液。
3.根據權利要求1所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-1)所述的提取方法為超聲提取法或回流提取法或索氏提取法或煎煮法。
4.根據權利要求1所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-4)所述的各中藥材特有超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子的篩選方法包括：
5.根據權利要求4所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-4-1)所述的一級離子質荷比的差的閾值小于等于±0.02Da，保留時間的差的閾值小于±0.5min。
6.根據權利要求1所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，選擇超高效液相色譜-高分辨質譜進行分析；
7.權利要求1-6任一項所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方
8.根據權利要求7所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法在鑒定中藥材及其制品中的應用，其特征在于，
9.根據權利要求8所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法在鑒定中藥材及其制品中的應用，其特征在于，待測樣品中檢測到的某中藥材的特有一級離子數量大于等于10個，則認為該待測樣品中含有該中藥材。
...【技術特征摘要】
1.基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-1)所述的溶劑為醇或醇與水的混合液。
3.根據權利要求1所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-1)所述的提取方法為超聲提取法或回流提取法或索氏提取法或煎煮法。
4.根據權利要求1所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-4)所述的各中藥材特有超高效液相色譜-高分辨質譜一級離子的篩選方法包括：
5.根據權利要求4所述的基于高分辨液質確定各中藥材特有一級離子的方法，其特征在于，步驟(1-4-1)所述...
【專利技術屬性】
技術研發人員：徐風，陳麗枝，李洋，湛鵬，薛書亞，蔡少青，劉廣學，尚明英，李長坤，李強，李月琪，黃濤宏，
申請(專利權)人：北京大學，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。