【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術屬于屬于生物學檢測領域，具體涉及一種血液處理液及利用該處理液進行染色體核型分析的方法。
技術介紹
1、染色體疾病是導致人類出生缺陷的重要因素，因此，對染色體疾病進行產(chǎn)前診斷尤為重要。染色體檢測是診斷染色體疾病及人類開展遺傳學研究和臨床細胞遺傳學診斷的重要手段。雖然超聲診斷技術發(fā)展迅速，但許多胎兒解剖結(jié)構(gòu)異常在妊娠中晚期才被發(fā)現(xiàn)，導致錯過了診斷救治的最佳時機。介入性產(chǎn)前診斷能夠在孕中早期對胎兒遺傳性疾病診斷及宮內(nèi)狀態(tài)評價，其中臍血標本較于羊水標本具有培養(yǎng)時間短、方法簡單、易操作、較少受孕周限制等優(yōu)點。采用臍血染色體核型分析檢查可較早發(fā)現(xiàn)患者核型異常，可細化到數(shù)目異常或結(jié)構(gòu)異常分型，是臨床診斷染色體病的重要依據(jù)，對臨床產(chǎn)前診斷具有重要意義。
2、盡管臍血染色體檢查有諸多優(yōu)勢，但臍血當中存在大量紅細胞，成熟紅細胞無細胞核，也無細胞器，胞質(zhì)內(nèi)充滿血紅蛋白，在細胞培養(yǎng)后阻礙染色體觀察，影響臨床診斷。同時，經(jīng)過處理的臍帶血，往往在后期淋巴細胞培養(yǎng)的過程當中出現(xiàn)細胞增殖緩慢，異常發(fā)育的情況。淋巴細胞培養(yǎng)、細胞收獲、滴片和染色體顯帶是臍血淋巴細胞染色體制備過程中重要的環(huán)節(jié)，任何一個環(huán)節(jié)的操作失誤都會導致染色體制備失敗。
3、因此，目前繼續(xù)一種能夠降低紅細胞干擾并誘導淋巴細胞迅速增殖的血液處理液。
技術實現(xiàn)思路
1、本專利技術的目的在于提供一種血液處理液，本專利技術提供的處理液不僅能夠降低紅細胞干擾還能誘導淋巴細胞迅速增殖。
2、為了實現(xiàn)上述目的，本專利
3、本專利技術提供了一種血液處理液，包括處理液a和處理液b；
4、所述處理液a包括：0.1～0.2m氯化銨、0.01～0.03m碳酸氫鉀、0.1～0.2mm?edta-2na、0.8～1.2mm硫酸葡聚糖、0.05～0.1mm氨磷汀、0.1～0.15mmβ-胡蘿卜素、0.08～0.12mm依克多因、0.12～0.18mm磺胺苯吡唑；
5、所述處理液b包括：0.5～0.8μg/ml?okt3、80～120ng/ml?il-2、0.03～0.06m葡萄糖、0.02～0.04m人轉(zhuǎn)鐵蛋白、15～30μg/ml維生素c、1.5～2.5mm谷氨酰胺。
6、本專利技術還提供了一種利用上述處理液進行染色體核型分析的方法，具體包括以下步驟：
7、s1、處理液a與血液混合，除去上清液保留細胞沉淀；
8、s2、利用處理液b重懸細胞沉淀，孵育后加入培養(yǎng)基培養(yǎng)；
9、s3、終止培養(yǎng)前2h，加入20μg/ml秋水仙素搖勻，放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)；
10、s4、制片：將培養(yǎng)好的細胞收獲后進行染色體制片；
11、s5、鏡檢：將制片后的染色體標本進行染色體核型分析。
12、優(yōu)選地，所述處理液a：血液：處理液b的體積比為10：10：1。
13、優(yōu)選地，所述血液為孕早期胎兒臍帶血。
14、優(yōu)選地，步驟s2中所述培養(yǎng)基為bc-705培養(yǎng)基，加入培養(yǎng)基后的后細胞濃度范圍值為1.5×106～2.0×106cells/ml。
15、優(yōu)選地，步驟s3中所述加入秋水仙素的量為：使溶液中秋水仙素的最終濃度為0.1μg/ml。
16、優(yōu)選地，步驟s4中染色體制片過程包括將收獲的細胞進行低滲處理、預固定、離心、固定、離心、再固定、離心、制備細胞懸液、滴片和染色。
17、更優(yōu)選地，所述預固定過程所用固定液包括甲醇和冰醋酸，所述甲醇和冰醋酸的體積比為3：1。
18、更優(yōu)選地，所述染色過程所用染液包括giemsa液原液和ph?6.8的磷酸緩沖液，所述giemsa液原液和ph?6.8的磷酸緩沖液的質(zhì)量比為1：9。
19、本專利技術還提供了上述處理液或上述進行染色體核型分析的方法，在孕早期胎兒臍帶血染色體核型分析中的應用。
20、本專利技術的有益效果：
21、本專利技術血液處理液及利用該處理液進行染色體核型分析的方法能夠在不對臍帶血中淋巴細胞造成損害的前提下，對成熟紅細胞進行破壞，富集血液中的白細胞并對淋巴細胞高效增殖，用于后續(xù)的染色體制備，確保核型正常，對臨床醫(yī)學檢驗具有重要意義。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術保護點】
1.一種血液處理液，其特征在于，包括處理液A和處理液B；
2.一種利用權(quán)利要求1所述處理液進行染色體核型分析的方法，其特征在于，包括以下步驟：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述處理液A：血液：處理液B的體積比為10：10：1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述血液為孕早期胎兒臍帶血。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，步驟S2中所述培養(yǎng)基為BC-705培養(yǎng)基，加入培養(yǎng)基后的后細胞濃度范圍值為1.5×106～2.0×106cells/mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，步驟S3中所述加入秋水仙素的量為：使溶液中秋水仙素的最終濃度為0.1μg/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，步驟S4中染色體制片過程包括將收獲的細胞進行低滲處理、預固定、離心、固定、離心、再固定、離心、制備細胞懸液、滴片和染色。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述染色體制片過程，其特征在于，所述預固定過程所用固定液包括甲醇和冰醋酸，所述甲醇和冰醋酸的體積比為3：1。
9.根據(jù)權(quán)利
10.權(quán)利要求1所述處理液或權(quán)利要求2-9任一項所述方法在孕早期胎兒臍帶血染色體核型分析中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種血液處理液，其特征在于，包括處理液a和處理液b；
2.一種利用權(quán)利要求1所述處理液進行染色體核型分析的方法，其特征在于，包括以下步驟：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述處理液a：血液：處理液b的體積比為10：10：1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述血液為孕早期胎兒臍帶血。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，步驟s2中所述培養(yǎng)基為bc-705培養(yǎng)基，加入培養(yǎng)基后的后細胞濃度范圍值為1.5×106～2.0×106cells/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，步驟s3中所述加入秋水仙素的量為：使溶液中秋水仙素的最終濃度為0....
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：邱顯榮，孔偉圣，藍欣，朱寶康，
申請(專利權(quán))人：珠海醫(yī)米諾賽醫(yī)學檢驗有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。