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【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于電化學生物傳感器領域,具體涉及一種基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的自支撐電化學免疫傳感器及其制備方法和應用。
技術介紹
1、赭曲霉毒素a(ota)由于對人體腎臟和肝臟的毒性和致癌性,被國際癌癥研究機構列為2b類致癌物,一直受到人們的廣泛關注。ota通常會存在于農產品中,對農產品的質量造成巨大的影響,同時還會通過飼料進入動物體內,進而威脅人類的生命健康。
2、目前,許多方法已被應用于ota的測定,如酶聯免疫分析、薄層色譜、光電化學免疫分析、高效液相色譜法、電化學免疫分析等。盡管這些方法具有很高的靈敏度,但食品工業仍然專注于開發更簡單、快速和經濟有效的ota測定方法。電化學生物傳感器因其操作簡便、選擇性好、響應迅速和動態濃度響應范圍寬等方面的特殊優勢,已成為一種有應用前景廣闊的分析技術,用于食品工業中赭曲霉毒素a的特異性檢測分析。
3、組裝電化學生物傳感器用來進行電化學分析測試的核心在于靈敏的信號發生器,包括酶、染料和金屬離子,已被用于這些傳感器中。金屬離子由于具有優越的導電性和電活性,不需要進行復雜的改性,可以直接用于進行電化學測試。然而,金屬材料不可持續的性質限制了廣泛的實際實施。例如專利cn106855534b公開了一種基于au八面體等離子膠體的赭曲霉毒素a免疫傳感器的構建,利用au八面體分散液為基底材料,au八面體等離子膠體負載的甲苯胺藍為二抗標記物,通過層層自組裝構建了夾心型電化學免疫傳感器。該免疫傳感器構建方法復雜,且成本高,不利于推廣應用。因此,有必要提供一種基于au修飾的
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的自支撐電化學免疫傳感器及其制備方法和應用,利用金的還原電位高于銅,使用電置換法避免了使用額外的還原劑,縮短了反應時間,且制備得到的異質結構自支撐電極具有良好的生物傳感性能。
2、為實現上述目的,第一方面,本專利技術提供了一種基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的制備方法,包括以下步驟:
3、s1、將可溶性銅鹽、表面活性劑、堿和還原劑溶于水,配成混合溶液,然后靜置反應,反應完成后離心、洗滌、干燥,得到氧化亞銅多面體;
4、s2、將所述氧化亞銅多面體在溶劑中形成分散液,然后加入氯金酸,在冰水浴中攪拌反應,反應完成后,離心、洗滌、干燥,得到au修飾的cu2o/cuo異質結構。
5、優選地,步驟s1中,先將可溶性銅鹽和表面活性劑加入預熱的水中,溶解完全后,再依次加入堿和還原劑。
6、進一步的,步驟s1中,所述可溶性銅鹽包括氯化銅、硝酸銅、醋酸銅、硫酸銅中的一種或多種,優選為氯化銅;
7、和/或,所述表面活性劑為十二烷基硫酸鈉(sds)、十二烷基苯磺酸鈉或十六烷基三甲基溴化銨,優選sds;
8、和/或,所述堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀;
9、和/或,所述還原劑包括鹽酸羥胺、抗壞血酸、葡萄糖中的一種或多種,優選為鹽酸羥胺。
10、進一步的,步驟s1中,所述可溶性銅鹽、表面活性劑、堿和還原劑的物質的量之比為1:(5.5-6.5):(3-4):(4-5),優選為1:6:3.6:4.7;優選地,所述混合溶液中可溶性銅鹽的濃度為5-10mmol/l,優選為6-7mmol/l;
11、步驟s2中,所述氧化亞銅多面體和氯金酸的質量比為1:(0.05-0.2),優選為1:0.1。
12、進一步的,步驟s1中,所述靜置反應的溫度為15-40℃,優選為25-35℃;時間為0.5-2h;
13、步驟s2中,所述溶劑為乙醇;所述分散液中氧化亞銅多面體的濃度為1-2g/l;所述攪拌反應的時間為12-30h。
14、在一些具體實施方式中,一種基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的制備方法,包括以下步驟:
15、s1、將氯化銅溶液、sds、氫氧化鈉溶液、鹽酸羥胺溶液溶于30℃水中,混合均勻得到混合溶液;將混合溶液在30℃下靜置1小時后,用乙醇和水混合液洗滌三次,干燥,得到氧化亞銅多面體;
16、s2、將氧化亞銅多面體加入乙醇中,進行分散,得到分散液,加入氯金酸溶液,冰水浴中連續攪拌24小時,用乙醇和水混合液洗滌三次,冷凍干燥,得到異質結構。
17、步驟s1所述氯化銅溶液的濃度為0.1mol/l、氫氧化鈉溶液的濃度為1mol/l、鹽酸羥胺溶液的濃度為0.1mol/l,sds作為表面活性劑,在水中的質量分數為1.95%,形成的混合液中,sds的質量分數為1.16%。
18、步驟s1所述混合溶液制備是通過先加入氯化銅和sds,待sds完全溶解再加入氫氧化鈉和鹽酸羥胺,溶液顏色由藍色變為綠色。
19、步驟s1中所述混合溶液靜置一段時間后顏色由綠色變為橙色。
20、步驟s1所述乙醇和水混合液的體積比為1:1。
21、步驟s2所述氯金酸溶液的濃度為50mmol/l,氯金酸和氧化亞銅的質量比為(0.05-0.2):1,例如為0.05:1、0.1:1、0.15:1和0.2:1,優選地,氯金酸和氧化亞銅的質量比為0.1:1。
22、步驟s2所述冷凍干燥的溫度為-10~-60℃,時間為24~36小時。
23、步驟s2所述分散為采用超聲分散,所述超聲分散的功率為80~100w,超聲時間為0.5~1.5小時。
24、第二方面,本專利技術提供一種基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的自支撐電化學免疫傳感器的制備方法,包括:將以上任一項所述的制備方法得到的au修飾的cu2o/cuo異質結構在水中形成分散液,然后浸涂于電極上;再將赭曲霉毒素a抗體(ota抗體)分散在電極上,孵育,最后在電極上分散bsa溶液,得到自支撐電化學免疫傳感器。
25、進一步的,所述分散液中au修飾的cu2o/cuo異質結構的濃度為0.5-2mg/ml,優選為1mg/ml;
26、所述赭曲霉毒素a抗體的濃度為20-30μg/ml,優選為25μg/ml;
27、所述分散液、赭曲霉毒素a抗體和bsa溶液的體積用量比為(1.5-2.5):(2-6):1,優選為2:4:1;
28、所述bsa溶液中溶質的質量分數為0.05%-0.2%,優選為0.1%。
29、進一步的,所述孵育的溫度為1-5℃,時間為0.5-2h。
30、進一步的,所述電極為碳紙電極,所述電極的厚度為0.1-0.15mm,當所述電極的長為2.5cm,寬為0.2cm時,所述分散液的浸涂體積為18-22μl,所述赭曲霉毒素a抗體的體積為35-60μl,所述bsa溶液的體積為8-12μl。
31、優選地,所述ota抗體的濃度為25μg/ml,體積為20-100μl,優選地,抗體體積為40μl。
32、第三方面,本專利技術提供一種基于a本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種基于Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
2.根據權利要求1所述的基于Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的制備方法,其特征在于,步驟S1中,所述可溶性銅鹽包括氯化銅、硝酸銅、醋酸銅、硫酸銅中的一種或多種;
3.根據權利要求1所述的基于Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的制備方法,其特征在于,步驟S1中,所述可溶性銅鹽、表面活性劑、堿和還原劑的物質的量之比為1:(5.5-6.5):(3-4):(4-5);優選地,所述混合溶液中可溶性銅鹽的濃度為5-10mmol/L,優選為6-7mmol/L;
4.根據權利要求1所述的基于Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的制備方法,其特征在于,步驟S1中,所述靜置反應的溫度為15-40℃,優選為25-35℃;時間為0.5-2h;
5.一種基于Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的自支撐電化學免疫傳感器的制備方法,其特征在于,包括:將權利要求1-4任一項所述的制備方法得到的Au修飾的Cu2O/CuO異質結構在水中形成分散液,然后浸涂于電極上;再將赭曲霉毒素A抗體
6.根據權利要求5所述的制備方法,其特征在于,所述分散液中Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的濃度為0.5-2mg/mL,優選為1mg/mL;
7.根據權利要求5所述的制備方法,其特征在于,所述電極為碳紙電極,所述電極的厚度為0.1-0.15mm,當所述電極的的長為2.5cm,寬為0.2cm時,所述分散液的浸涂體積為18-22μL,所述赭曲霉毒素A抗體的體積為35-60μL,所述BSA溶液的體積為8-12μL。
8.一種基于Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的自支撐電化學免疫傳感器,其特征在于,由權利要求5-7任一項所述的制備方法制備得到。
9.一種權利要求9所述的基于Au修飾的Cu2O/CuO異質結構的自支撐電化學免疫傳感器的應用,其特征在于,所述自支撐電化學免疫傳感器用于食品中赭曲霉毒素A的特異性檢測。
10.根據權利要求9所述的應用,其特征在于,所述自支撐電化學免疫傳感器對食品中赭曲霉毒素A的特異性檢測方法包括:
...【技術特征摘要】
1.一種基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
2.根據權利要求1所述的基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的制備方法,其特征在于,步驟s1中,所述可溶性銅鹽包括氯化銅、硝酸銅、醋酸銅、硫酸銅中的一種或多種;
3.根據權利要求1所述的基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的制備方法,其特征在于,步驟s1中,所述可溶性銅鹽、表面活性劑、堿和還原劑的物質的量之比為1:(5.5-6.5):(3-4):(4-5);優選地,所述混合溶液中可溶性銅鹽的濃度為5-10mmol/l,優選為6-7mmol/l;
4.根據權利要求1所述的基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的制備方法,其特征在于,步驟s1中,所述靜置反應的溫度為15-40℃,優選為25-35℃;時間為0.5-2h;
5.一種基于au修飾的cu2o/cuo異質結構的自支撐電化學免疫傳感器的制備方法,其特征在于,包括:將權利要求1-4任一項所述的制備方法得到的au修飾的cu2o/cuo異質結構在水中形成分散液,然后浸涂于電極上;再將赭曲...
【專利技術屬性】
技術研發人員:張艷,韓明慧,彭丹妮,何小華,
申請(專利權)人:湖北工業大學,
類型:發明
國別省市:
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