【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物材料制備，具體涉及一種透明質酸水凝膠及其制備方法與在制備角膜損傷修復材料中的應用。
技術介紹
1、角膜是位于眼球壁前端1/6無血管的透明纖維膜，其含有豐富的感覺神經末梢，任何微小刺激、損傷或發炎皆能引起疼痛、流淚。角膜損傷是指角膜因外力因素或機體因素對角膜造成的傷害，包括角膜擦傷、深層角膜組織缺失、角膜挫傷、角膜層間撕裂傷、角膜穿透傷和破裂傷等。角膜損傷修復的具體方法根據角膜損傷的具體程度而定；如果眼角膜損傷較大，出現角膜裂傷或撕裂等癥狀則需要進行手術修復。而在角膜損傷手術修復的過程中，角膜損傷修復材料是必備材料。
2、中國專利技術專利cn200910237605.1公開了一種透明質酸和海藻酸鈉復合水凝膠及其制備方法。該復合水凝膠是按照包括下述步驟的方法制備得到的：1)將透明質酸和海藻酸鈉溶于水中，得到溶液1，2)將交聯劑加入所述溶液1中，并用緩沖溶液調節ph值為4.0-5.5，得到溶液2；3)向所述溶液2中加入羧基激活劑并攪拌，攪拌過程中用緩沖溶液調控所述溶液2的ph值在2.0-5.5直至形成凝膠，即得到透明質酸和海藻酸鈉復合水凝膠。該方法制備的復合改性物具有較高的機械性能、抗透明質酸酶降解能力、生物相容性等優點，在外科手術、組織工程方面有著潛在的用途。但是，專利技術人在研究中發現，通過該方法制備得到的角膜損傷修復材料其對于角膜上皮細胞增殖作用有待進一步提高。
技術實現思路
1、為了克服現有技術中存在的至少之一的技術問題，本專利技術提供了一種透明質酸
2、本專利技術的技術方案如下：
3、本專利技術首先提供了一種透明質酸水凝膠的制備方法，包含如下步驟：
4、s1.制備透明質酸溶液；
5、s2.在透明質酸溶液中加入交聯劑，調節至酸性ph，得溶液a；
6、s3.在溶液a中加入羧基激活劑，攪拌，得到透明質酸水凝膠；
7、步驟s1中透明質酸溶液的制備方法為：取透明質酸，加入到中藥提取液中，攪拌均勻后得透明質酸溶液。
8、專利技術人在研究中發現，在透明質酸水凝膠的制備過程中，將透明質酸溶解得到中藥提取液中制備得到的透明質酸水凝膠，其具有促進角膜上皮細胞增殖作用。這是由于中藥提取液中含有多種具有促進角膜上皮細胞增殖作用的活性成分；其參與透明質酸的交聯，使得制備得到的透明質酸水凝膠中交聯了促進角膜上皮細胞增殖作用的活性成分，進而使得制備得到的透明質酸水凝膠具有促進角膜上皮細胞增殖作用。
9、優選地，步驟s1中，透明質酸與中藥提取液的用量比為0.2～2g：100ml。
10、最優選地，步驟s1中，透明質酸與中藥提取液的用量比為1g：100ml。
11、優選地，所述的中藥提取液通過如下方法制備得到：
12、取中藥混合后得混合中藥原料，接著加入水中進行加熱回流提取，提取結束后進行抽濾，即得所述的中藥提取液。
13、優選地，所述的中藥包含決明子、菊花以及金銀花。
14、專利技術人在研究中發現，將透明質酸溶解得到以決明子、菊花以及金銀花等中藥味原料提取得到的中藥提取液中制備得到的透明質酸水凝膠，其具有較好的促進角膜上皮細胞增殖作用。
15、優選地，決明子、菊花以及金銀花的重量比為2～4:1～3:1～2；
16、最優選地，決明子、菊花以及金銀花的重量比為3:2:1。
17、優選地，混合中藥原料與水的用量比為1g：10～20ml；
18、最優選地，混合中藥原料與水的用量比為1g：15ml。
19、優選地，所述的加熱回流提取是指在80～100℃下進行加熱回流提取1～2h；
20、最優選地，所述的加熱回流提取是指在100℃下進行加熱回流提取1.5h。
21、進一步優選地，所述的中藥包含決明子、菊花、金銀花、女貞子以及黨參。
22、專利技術人在進一步的研究中發現，本專利技術中藥提取液提取過程中，中藥原料的組成，對于制備得到的透明質酸水凝膠的促進角膜上皮細胞增殖作用起著重要的影響；研究表明，在決明子、菊花以及金銀花的基礎上，進一步加入女貞子以及黨參；采用以決明子、菊花、金銀花、女貞子以及黨參為原料提取得到的中藥提取液，相比于采用以決明子、菊花以及金銀花等中藥味原料提取得到的中藥提取液，其可以大幅提高制備得到的透明質酸水凝膠的促進角膜上皮細胞增殖作用。
23、進一步優選地，決明子、菊花、金銀花、女貞子以及黨參的重量比為2～4:1～3:1～2:1～3:1～3；
24、最優選地，決明子、菊花、金銀花、女貞子以及黨參的重量比為3:2:1:2:2。
25、優選地，步驟在s2中交聯劑與透明質酸溶液的用量比為0.1～1g：100ml；
26、最優選地，步驟在s2中交聯劑與透明質酸溶液的用量比為0.5g：100ml。
27、優選地，步驟在s3中羧基激活劑與溶液a的用量比為1.5～3g：100ml；
28、最優選地，步驟在s3中羧基激活劑與溶液a的用量比為2g：100ml。
29、優選地，所述的交聯劑為己二酸二酰肼；
30、所述的羧基激活劑為1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳。
31、本專利技術還提供一種由上述制備方法制備得到的透明質酸水凝膠。
32、本專利技術還提供了一種上述透明質酸水凝膠在制備角膜損傷修復材料中的應用。
33、有益效果：本專利技術提供了一種全新的透明質酸水凝膠的制備方法；研究表明，由本專利技術所述方法制備得到的透明質酸水凝膠具有促進角膜上皮細胞增殖作用；因此，將其作為角膜損傷修復材料具有重要的應用價值。
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1.一種透明質酸水凝膠的制備方法，包含如下步驟：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S1中，透明質酸與中藥提取液的用量比為0.2～2g：100mL；
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的中藥提取液通過如下方法制備得到：
4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的中藥包含決明子、菊花以及金銀花。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，決明子、菊花以及金銀花的重量比為2～4:1～3:1～2；
6.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，混合中藥原料與水的用量比為1g：10～20mL；
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟在S2中交聯劑與透明質酸溶液的用量比為0.1～1g：100mL；
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟在S3中羧基激活劑與溶液A的用量比為1.5～3g：100mL。
9.權利要求1～8任一項所述的制備方法制備得到的透明質酸水凝膠。
10.權利要求9所述的透明質酸水凝膠在制備角膜損傷修
...【技術特征摘要】
1.一種透明質酸水凝膠的制備方法，包含如下步驟：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中，透明質酸與中藥提取液的用量比為0.2～2g：100ml；
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的中藥提取液通過如下方法制備得到：
4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的中藥包含決明子、菊花以及金銀花。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，決明子、菊花以及金銀花的重量比為2～4:1～3:1～2；
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【專利技術屬性】
技術研發人員：官習鵬，鐘杏霞，陳詩浩，韋曉慧，
申請(專利權)人：廣州悅清再生醫學科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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