【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及醫(yī)藥，具體涉及一種包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的指紋圖譜構(gòu)建方法及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、根據(jù)《中華人民共和國中醫(yī)藥法》，古代經(jīng)典名方是指“至今仍廣泛應(yīng)用、療效確切、具有明顯特色與優(yōu)勢的古代中醫(yī)典籍所記載的方劑”。古代經(jīng)典名方在我國有著歷史悠久、豐富的人用歷史并應(yīng)用至今，是歷代醫(yī)家臨床實(shí)踐精華的總結(jié)，承載著數(shù)千年來中醫(yī)藥燦爛文明的深厚積淀，是中醫(yī)藥理論經(jīng)過幾千年的錘煉，是歷代臨床經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，是中醫(yī)藥偉大寶庫中最精華的部分。對中藥經(jīng)典名方進(jìn)行深入的研究與開發(fā)，是挖掘傳統(tǒng)中醫(yī)藥寶庫的一把金鑰匙。
2、中藥經(jīng)典名方湯劑作為傳統(tǒng)的中醫(yī)臨床用藥的最常用的劑型，具有組方合理、起效迅速、療效顯著、易于吸收等優(yōu)點(diǎn)，深受廣大患者的信賴。卻因調(diào)配、攜帶、臨時(shí)煎煮、久置容易發(fā)生霉敗變質(zhì)、湯液味苦和量大，以及標(biāo)準(zhǔn)難以統(tǒng)一，嚴(yán)重影響其臨床療效等缺點(diǎn)，不能適應(yīng)現(xiàn)代人的生活要求。為了保持湯劑的優(yōu)勢，克服湯劑的種種不足，國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心于2021年08月31日發(fā)布的《按古代經(jīng)典名方目錄管理的中藥復(fù)方制劑藥學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》中明確指出按古代經(jīng)典名方目錄管理的中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量應(yīng)與經(jīng)典名方基準(zhǔn)樣品的質(zhì)量基本一致。基準(zhǔn)樣品代表了制劑的整體內(nèi)在質(zhì)量，除了成型工藝外，基準(zhǔn)樣品與制劑的其余質(zhì)量控制指標(biāo)均基本一致。因此基準(zhǔn)樣品是制劑內(nèi)在質(zhì)量的實(shí)物對照，是大生產(chǎn)工藝優(yōu)化及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的參照物。基準(zhǔn)樣品是經(jīng)典名方乃至所有中藥研發(fā)的基準(zhǔn)，是保證藥物的安全性和有效性的對照物。經(jīng)典名方復(fù)方制劑生產(chǎn)工藝路線制定、參數(shù)的優(yōu)化和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定
3、指紋圖譜是基于中藥物質(zhì)群整體作用的認(rèn)識，借助于波譜和色譜技術(shù)獲得中藥化學(xué)成分的光譜或色譜圖，是實(shí)現(xiàn)鑒別中藥真實(shí)性、評價(jià)質(zhì)量一致性和產(chǎn)品穩(wěn)定性的可行模式，具有信息量大、特征性強(qiáng)、整體性和模糊性等特點(diǎn)。中藥指紋圖譜能較全面地反映藥材所含化學(xué)成分的相對關(guān)系，體現(xiàn)了中藥成分的復(fù)雜性和相關(guān)性，與中醫(yī)藥的傳統(tǒng)理論相適應(yīng)，能真正對中藥內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行有效表征、綜合評價(jià)和全面控制，尤其適用于有效成分不完全明確或不需要完全明確的情況下，對中藥材及中藥產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制。中藥指紋圖譜除能用于考察中藥材產(chǎn)地、采收季節(jié)、采收部位、炮制加工、儲存時(shí)間等因素，以提供依據(jù)鑒別生產(chǎn)前原料藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣，更可用于中藥生產(chǎn)過程的質(zhì)量控制：追蹤制劑中某些化學(xué)成分的變化，監(jiān)測原料藥材與成品之間、成品的各批次間質(zhì)量的一致性及穩(wěn)定性。與指標(biāo)成分含量測定的質(zhì)量分析方法相比，指紋圖譜能夠比較全面地反映中藥化學(xué)成分的種類和數(shù)量，在中藥復(fù)方制劑有效成分尚未完全闡明的現(xiàn)狀下，可實(shí)現(xiàn)對中藥內(nèi)在質(zhì)量的綜合評價(jià)和對其整體物質(zhì)的有效控制，是目前中藥及其制劑質(zhì)量控制的有效手段之一。
4、目前，尚未見文獻(xiàn)報(bào)道對本專利技術(shù)所要求保護(hù)的包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的化學(xué)成分進(jìn)行全面地分析以及指紋圖譜研究，現(xiàn)有技術(shù)中，僅對該中藥復(fù)方中的單一成分進(jìn)行質(zhì)量分析，尚無較全面、系統(tǒng)的質(zhì)量控制方法反映本專利技術(shù)的中藥復(fù)方及成品中主要基準(zhǔn)樣品成分的質(zhì)量狀況，無法對其生產(chǎn)過程及產(chǎn)品質(zhì)量有效控制，不能較好地保證其臨床療效，故需采用能全面控制本專利技術(shù)的中藥復(fù)方整體質(zhì)量的指紋圖譜的質(zhì)控方法控制其關(guān)鍵質(zhì)量。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、基于此，本專利技術(shù)提供了一種包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的指紋圖譜構(gòu)建方法，該構(gòu)建方法包括如下步驟：
2、中藥組合物供試品溶液的制備：取適量的包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物煎液，置于容器中，加入溶劑，超聲處理一段時(shí)間，定容，搖勻，離心，取上清液濾過，取續(xù)濾液，得到該中藥組合物供試品溶液；其中，該中藥組合物包括當(dāng)歸、肉桂、白芍、生姜、大棗和甘草；
3、對照品溶液的制備：稱取適量的沒食子酸、芍藥苷、阿魏酸、肉桂酸、桂皮醛、甘草酸、6-姜辣素、藁本內(nèi)酯對照品，添加甲醇配制成沒食子酸、芍藥苷、阿魏酸、肉桂酸、桂皮醛、甘草酸、6-姜辣素、藁本內(nèi)酯濃度分別為1～100μg/ml的該對照品溶液；
4、根據(jù)高效液相檢測該中藥組合物供試品溶液和該對照品溶液的結(jié)果，獲得中藥組合物指紋圖譜；
5、該高效液相檢測的色譜條件為：采用填料為十八烷基鍵合硅膠的色譜柱，流動相a選自乙腈、甲醇和四氫呋喃中的一種或多種，流動相b為酸水溶液、堿水溶液和/或緩沖鹽水溶液，梯度洗脫程序?yàn)椋?～10min，95％→94％b；10～12min，94％b→88％b；12～20min，88％b；20～21min，88％→84％b；21～38min，84％b；38～48min，84％b→80％b；48～52min，80％→75％b；52～58min，75％b→71％b；58～62min，71％→68％b；62～80min，68％b→44％b；80～83min，44％b→26％b；83～88min，26％b→15％b；88～89min，15％b→95％b；89～100min，95％b；流速為0.5～1.5ml/min，柱溫為10～40℃，檢測波長為180～350nm，進(jìn)樣量為1～20μl。
6、進(jìn)一步地，該甘草為炒甘草。
7、進(jìn)一步地，在該中藥組合物供試品溶液的制備中，該溶劑為醇，例如甲醇。
8、進(jìn)一步地，該容器為容量瓶。
9、進(jìn)一步地，該中藥組合物煎液的質(zhì)量為5～30g，例如約15g。
10、進(jìn)一步地，該中藥組合物煎液與該溶劑之間的質(zhì)量體積之比值為0.4～0.8，例如約0.6，單位為g/ml。
11、進(jìn)一步地，該超聲處理的功率為400～600w，例如約500w。
12、進(jìn)一步地，該超聲處理的頻率為30～50khz，例如約40khz。
13、進(jìn)一步地，該超聲處理的時(shí)間為20～40min，例如約30min。
14、進(jìn)一步地，該離心的轉(zhuǎn)速為4000～6000rpm/min，例如約5000rpm/min。
15、進(jìn)一步地，該離心的時(shí)間為5～15min，例如約10min。
16、進(jìn)一步地，該當(dāng)歸、該肉桂、該白芍、該生姜、該大棗與該甘草之間的質(zhì)量之比為(45～60):(30～50):(70～90):(30～50):(25～45):(20～40)。
17、進(jìn)一步地，該當(dāng)歸、該肉桂、該白芍、該生姜、該大棗與該甘草之間的質(zhì)量之比為約55.2:約41.4:約82.8:約41.4:約36:約27.6。
18、進(jìn)一步地，該包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物煎液的制備方法包括：稱取適量的當(dāng)歸、肉桂、白芍、生姜、大棗和甘草，破碎至粗顆粒，置于容器中，加水浸泡，煎煮至沸并煮沸一段時(shí)間，接著保持微沸一段時(shí)間，濾網(wǎng)趁熱過濾取濾液，得到該包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物煎液。
19、進(jìn)一步地，該水與該包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的體積/質(zhì)量之比為5～10，例如約7。
20、進(jìn)一步地，該容器為陶瓷煎藥壺或電陶爐。
21、進(jìn)一步本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的指紋圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，所述構(gòu)建方法包括如下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述甘草為炒甘草。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，在所述中藥組合物供試品溶液的制備中，所述溶劑為醇，例如甲醇；
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述對照品溶液中阿魏酸的濃度為10～25μg/ml，例如約18μg/ml；
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述高效液相檢測的所述流速為0.8～1.2ml/min，例如約1.0ml/min；
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，流動相A為乙腈；
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，在第0分鐘至第77分鐘之間的所述檢測波長為250nm，在第77分鐘至第100分鐘之間的所述檢測波長為210nm時(shí)，所述指紋圖譜包括1-14號峰，所述1-14號峰的保留時(shí)間分別對應(yīng)為約8.968min、約21.263min、約27.481min、約29.945min、約38.938min、約4
8.一種包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述質(zhì)量控制方法包括如下步驟：
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述符合要求包括以下的一種或多種：
10.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的構(gòu)建方法或根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的質(zhì)量控制方法在包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的質(zhì)量檢測和/或質(zhì)量評價(jià)和/或質(zhì)量控制中的用途。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種包含當(dāng)歸和肉桂的中藥組合物的指紋圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，所述構(gòu)建方法包括如下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述甘草為炒甘草。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，在所述中藥組合物供試品溶液的制備中，所述溶劑為醇，例如甲醇；
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述對照品溶液中阿魏酸的濃度為10～25μg/ml，例如約18μg/ml；
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述高效液相檢測的所述流速為0.8～1.2ml/min，例如約1.0ml/min；
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，流動相a為乙腈；
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，在第0分鐘至第77分鐘之間的所述檢測波長為250nm，在第77分鐘至第100分鐘之...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：易躍能，王贊文，付猛，朱亞文，史石元，王碧霞，
申請(專利權(quán))人：湖南易能生物醫(yī)藥有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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