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【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及l-丙氨酸高產菌株的,特別涉及一種l-丙氨酸高產菌株、提取方法及提取設備。
技術介紹
1、l-丙氨酸是一種重要的氨基酸,在食品、醫藥和化工等領域具有廣泛的應用價值。為了提高l-丙氨酸的生產效率,科研人員通過基因工程技術培育出了高產菌株。
2、高產菌株是指在發酵生產過程中,能夠產生更多l-丙氨酸的微生物菌株。通過優化菌株的基因組,調控相關代謝途徑以及發酵條件等方法,科研人員成功構建了一系列高產l-丙氨酸的微生物菌株。
3、如公開號為cn103602609a的中國專利公開了一種發酵生產l-丙氨酸的高產菌株,該菌株是以“德氏乳桿菌保加利亞亞種”為出發菌株,采用低能離子注入法誘變處理細胞,并通過可逆抑制測定法篩選出的突變株,該菌株的生長溫度范圍為35-40℃,最佳生長溫度為37℃;最適ph值為7.0;使用的斜面培養基為mrs培養基,該菌株以葡萄糖等糖類物質為底物,在厭氧條件下發酵生產l-丙氨酸,提純過程中使用超濾膜過濾和納濾膜過濾去除雜質,保證了產品質量,適合大規模工業化生產。
4、然而,上述l-丙氨酸高產菌株提取方法在實際使用的過程中還有一些不足之處:
5、1、首先,現有的l-丙氨酸高產菌株在提取的過程中,混合溶液內會摻雜一些雜質以及在攪拌過程中所產生的一些代謝廢氣產物,導致混合溶液中提取l-丙氨酸高產菌株的效率差,并且混合溶液中提取l-丙氨酸高產菌株,混合溶液易發生流動,從而加劇l-丙氨酸高產菌株提取的難度。
6、2、其次,現有的l-丙氨酸高產菌株的提取方法較
7、因此,在上述陳述的觀點之下,現有的l-丙氨酸高產菌株提取方法還有可提高的空間。
技術實現思路
1、為了解決上述問題,本專利技術提供了一種l-丙氨酸高產菌株及其提取方法,采用如下的技術方案:
2、第一方面,本申請涉及一種l-丙氨酸高產菌株,通過含有誘變劑的培養基對大腸桿菌進行突變,突變后進行培養制得含有l-丙氨酸基因的高產菌株。
3、含有誘變劑的培養基成分如下所示:
4、蛋白胨占8-15g/l;
5、酵母提取物占4-10g/l;
6、鹽占2.5-10.7g/l;
7、葡萄糖占1-10g/l;
8、氨基酸占0.1-1.0g/l;
9、乙基甲磺酸乙酯占1-10g/l。
10、第二方面,本申請還提供一種l-丙氨酸高產菌株提取方法,準備一靜置的提取平臺,于提取平臺上等間距設置有提取支架,還設置有提取導軌以及菌株提取器;三組所述提取導軌設置在提取支架上,并且三組所述提取導軌成三角分布,所述菌株提取器通過電驅動的方式滑動設在三組提取導軌上;
11、l-丙氨酸高產菌株提取方法,包括如下步驟:
12、(1):從菌株庫中篩選出具有高產潛力的菌株,即大腸桿菌作為起始菌株進行初步培養和鑒定,使其恢復菌株的活力;
13、(2):在溫度為30-37攝氏度環境下,將大腸桿菌暴露在含有誘變劑的培養基中10-180分鐘,同時輔以紫外線照射5分鐘,使其產生突變;
14、(3):當大腸桿菌完成誘變之后將其稀釋,將稀釋后并發生誘變的大腸桿菌接種到富含l-丙氨酸的培養基中進行培養,使起始菌株內富含l-丙氨酸;
15、(4):起始菌株完成培養之后,對混合后的溶液進行結晶處理,通過菌株提取器將混合溶液中的雜質以及代謝產物剔除;
16、(5):接著將結晶后的混合溶液重新放置到觀察儀器上,篩選出產生高產l-丙氨酸基因的突變起始菌株。
17、第三方面:還涉及一種l-丙氨酸高產菌株提取設備,提取設備包括提取平臺、提取支架、提取導軌以及提取器;
18、所述菌株提取器包括若干相鄰分布的提取濾板,所述提取濾板兩側設有驅使提取濾板掛設在三組提取導軌上的掛鉤,且若干所述提取濾板的中部均開設有供完成培養并與培養基混合的起始菌株輸送的輸送圓孔,所述提取濾板的內部開設有工作內腔,并且所述提取濾板的工作內腔中設有微波發生器。
19、所述提取濾板的兩側開設有工作外腔,供混合的起始菌株進行結晶作業。
20、所述提取濾板的工作內腔上還等間距開設有往工作內腔內通氣并與之聯動的通氣通槽。
21、優選的,所述提取濾板寬度方向的一側設有用于密封的密封膠條,所述提取濾板寬度方向的另外一側開設供相鄰提取濾板上設置的密封膠條抵觸的密封凹槽。
22、優選的,所述菌株提取器還包括兩個對稱分布的導向板,所述導向板上開設有導向滑槽,兩所述導向板的導向滑槽內共同滑動安裝有導向桿,所述導向桿的底部依次設有通氣接口以及輸液接口,所述通氣接口的尾部通過氣體管道連接有氣泵設備,所述輸液接口的尾部通過液體管道連接有儲存混合溶液的儲存器。
23、優選的,所述提取平臺上還設有對若干提取濾板進行擠壓的壓緊部件,所述壓緊部件包括壓緊電機、雙向壓緊螺桿、壓緊移塊、升降壓緊塊、壓緊柱以及兩個壓緊板。
24、所述壓緊電機通過電機座安裝于提取平臺上,所述雙向壓緊螺桿通過軸承轉動安裝于提取平臺上,并與之長度方向平行,所述壓緊電機的輸出端與雙向壓緊螺桿相連,兩所述壓緊移塊通過螺接的方式對稱安裝在雙向壓緊螺桿上,所述升降壓緊塊沿著壓緊移塊的高度方向設于其上端,并且升降壓緊塊的兩側與壓緊柱相連,所述壓緊柱滑動穿設至兩個壓緊板上,所述壓緊板上開設供壓緊柱滑移的壓緊導槽,所述壓緊板設于提取平臺上。
25、優選的,所述提取平臺上的壓緊部件與菌株提取器上的導向桿之間還設置有聯動部件,所述聯動部件包括聯動皮帶、聯動螺紋桿、聯動塊以及聯動豎板,所述聯動螺紋桿通過軸承轉動安裝在提取平臺上,且所述聯動螺紋桿與雙向壓緊螺桿平行分布,兩者之間還套設有聯動皮帶,所述聯動塊螺接于聯動螺紋桿上,并且聯動塊與聯動豎板一體化連接,所述聯動豎板上開設有條形卡槽,兩導向板上滑動設置的導向桿也滑動設在聯動豎板的條形卡槽內。
26、優選的,所述提取濾板兩側開設的工作外腔還貼合有均熱板。
27、優選的,若干相鄰的提取濾板的掛鉤之間設有復位壓簧。
28、優選的,所述提取濾板厚度方向上的通氣通槽錯位分布,一側通氣通槽位于提取濾板的底部、另外一側通氣通槽位于提取濾板的頂部。
29、綜上所述,本申請包括以下至少一種有益技術效果:
30、一、本申請對混合溶液進行結晶化,使得溶液從液態變為固態,此時即可將對其進行篩分,將結晶狀產品中的雜質以及代謝物剔除,此時在進行l-丙氨酸高產菌株的提取,能夠大大的避免雜質對l-丙氨酸高產菌株提取的影響,保證l-丙氨酸高產菌株提取的效率。
31、二、本申請中的l-丙氨酸高產菌株通過代謝工程改造和發酵技術的應用,不僅提高了生產效率和產量,還降低了生產成本,并且具有顯著本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種L-丙氨酸高產菌株,通過含有誘變劑的培養基對大腸桿菌進行突變,突變后進行培養制得含有L-丙氨酸基因的高產菌株,其特征在于:
2.一種L-丙氨酸高產菌株提取方法,采用權利要求1中所述的一種L-丙氨酸高產菌株,其特征在于:
3.一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,采用權利要求2中所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取方法,其特征在于:提取設備包括提取平臺(1)、提取支架(2)、提取導軌(3)以及提取器(4);
4.根據權利要求3所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述提取濾板(40)寬度方向的一側設有用于密封的密封膠條(400),所述提取濾板(40)寬度方向的另外一側開設供相鄰提取濾板(40)上設置的密封膠條(400)抵觸的密封凹槽(401)。
5.根據權利要求3所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述菌株提取器(4)還包括兩個對稱分布的導向板(47),所述導向板(47)上開設有導向滑槽(48),兩所述導向板(47)的導向滑槽(48)內共同滑動安裝有導向桿(49),所述導向桿(49)的底部依次設有通氣接口(50
6.根據權利要求3所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述提取平臺(1)上還設有對若干提取濾板(40)進行擠壓的壓緊部件(6),所述壓緊部件(6)包括壓緊電機(60)、雙向壓緊螺桿(61)、壓緊移塊(62)、升降壓緊塊(63)、壓緊柱(64)以及兩個壓緊板(65);
7.根據權利要求6所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述提取平臺(1)上的壓緊部件(6)與菌株提取器(4)上的導向桿(49)之間還設置有聯動部件(7),所述聯動部件(7)包括聯動皮帶(70)、聯動螺紋桿(71)、聯動塊(72)以及聯動豎板(73),所述聯動螺紋桿(71)通過軸承轉動安裝在提取平臺(1)上,且所述聯動螺紋桿(71)與雙向壓緊螺桿(61)平行分布,兩者之間還套設有聯動皮帶(70),所述聯動塊(72)螺接于聯動螺紋桿(71)上,并且聯動塊(72)與聯動豎板(73)一體化連接,所述聯動豎板(73)上開設有條形卡槽(74),兩導向板(47)上滑動設置的導向桿(49)也滑動設在聯動豎板(73)的條形卡槽(74)內。
8.根據權利要求3所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述提取濾板(40)兩側開設的工作外腔(45)還貼合有均熱板(402)。
9.根據權利要求3所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:若干相鄰的提取濾板(40)的掛鉤(41)之間設有復位壓簧(403)。
10.根據權利要求3所述的一種L-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述提取濾板(40)厚度方向上的通氣通槽(46)錯位分布,一側通氣通槽(46)位于提取濾板(40)的底部、另外一側通氣通槽(46)位于提取濾板(40)的頂部。
...【技術特征摘要】
1.一種l-丙氨酸高產菌株,通過含有誘變劑的培養基對大腸桿菌進行突變,突變后進行培養制得含有l-丙氨酸基因的高產菌株,其特征在于:
2.一種l-丙氨酸高產菌株提取方法,采用權利要求1中所述的一種l-丙氨酸高產菌株,其特征在于:
3.一種l-丙氨酸高產菌株提取設備,采用權利要求2中所述的一種l-丙氨酸高產菌株提取方法,其特征在于:提取設備包括提取平臺(1)、提取支架(2)、提取導軌(3)以及提取器(4);
4.根據權利要求3所述的一種l-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述提取濾板(40)寬度方向的一側設有用于密封的密封膠條(400),所述提取濾板(40)寬度方向的另外一側開設供相鄰提取濾板(40)上設置的密封膠條(400)抵觸的密封凹槽(401)。
5.根據權利要求3所述的一種l-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述菌株提取器(4)還包括兩個對稱分布的導向板(47),所述導向板(47)上開設有導向滑槽(48),兩所述導向板(47)的導向滑槽(48)內共同滑動安裝有導向桿(49),所述導向桿(49)的底部依次設有通氣接口(50)以及輸液接口(51),所述通氣接口(50)的尾部通過氣體管道(52)連接有氣泵設備,所述輸液接口(51)的尾部通過液體管道(53)連接有儲存混合溶液的儲存器。
6.根據權利要求3所述的一種l-丙氨酸高產菌株提取設備,其特征在于:所述提取平臺(1)上還設有對若干提取濾板(40)進行擠壓的壓緊部件(6),所述壓緊部件(6...
【專利技術屬性】
技術研發人員:盧正東,雷華,鄒榮華,王維,徐小竹,史建勛,
申請(專利權)人:廣濟藥業濟寧有限公司,
類型:發明
國別省市:
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