【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物材料，具體涉及一種含微球和交聯透明質酸或其鹽的組合物及其制備方法和應用。
技術介紹
1、透明質酸是一種天然粘多糖，由(1-β-4)d-葡糖醛酸和(1-β-3)n-乙酰基-d-氨基葡糖雙糖單位重復連接而成，是人和動物皮膚、玻璃體、關節潤滑液和軟骨組織的重要成分，透明質酸鈉在人體內具有多種作用，包括：空間填充、水合作用、關節潤滑、以及提供細胞可以通過其遷移的基質，雖然透明質酸的優點眾多，但是天然的透明質酸力學性能薄弱、在體內容易被降解等性質限制了其在生物材料方面的應用。交聯透明質酸鈉是透明質酸鈉通過化學交聯修飾得到的高分子凝膠，彌補了天然透明質酸鈉存留時間短的缺點。
2、專利文件cn106279726b公開了一種交聯透明質酸鈉凝膠及其制備方法，在超聲條件下，向透明質酸鈉的堿性水溶液中滴加交聯劑進行交聯反應，反應結束后，用酸調節體系ph值7.1-7.5，攪拌1-2h，然后用無水乙醇沉淀，即得交聯透明質酸鈉凝膠。但該方法中并沒有除去交聯劑的步驟，容易造成交聯劑的殘留。
3、專利文件cn112940300b公開了一種交聯透明質酸凝膠的制備方法，包括以下步驟：
4、(1)使包含交聯劑與透明質酸、其金屬鹽、或其混合物的水溶液在非中性環境下混合均勻，形成混合溶液；(2)將上述混合溶液置于低于0℃且高于混合溶液共晶點的溫度下并保持足以形成固液異相體系的時間以形成固液異相體系；(3)將該異相體系置于低于0℃且高于混合溶液共晶點的溫度下進行交聯反應；(4)將交聯反應后的異相體系中的固相融化，任選地
5、聚酯微球、膠原蛋白微球、絲素蛋白微球、羥基磷灰石微球等，由于其具有生物相容性、生物可降解性和無毒性，通常作為一種新型的醫美用填充材料進行使用，但是目前研究的微球與基質等載體混合后進行滅菌時，載體不能很好的保護微球，使得產品注射填充后，還是易存在微球降解過快，與注射部位組織不相容，發生炎癥等問題。
6、綜上所述，現有技術無法兼顧透明質酸凝膠制備工藝簡單，安全性好，有效去除交聯劑，粘滯性強，內聚性高，吸水率低等產業化需求，也難以有效保證微球的降解效果，實現膠原的再生。
技術實現思路
1、本專利技術克服了現有技術中存在的缺陷，提供了一種含微球和交聯透明質酸或其鹽的組合物及其制備方法和應用，通過semo交聯技術(soft?elastic?mosaic?cross-linkingtechnology，簡寫semo交聯技術)，先制備得到交聯透明質酸或其鹽凝膠，再與微球混合，凝膠中剛性微球的進入，可進一步增強了軟彈性嵌合結構的支撐性能，使組合物既具有凝膠的軟彈性功能，又具有剛性支撐性能，二者具有協同效應；同時凝膠能在濕熱滅菌時有效保護微球，減少微球的降解，延長微球刺激膠原再生的效果，適用的皮膚層次及填充的部位更加廣泛，并提高了組合物使用的安全性。
2、本專利技術的第一方面，提供了一種含微球和交聯透明質酸或其鹽的組合物，所述組合物中交聯透明質酸或其鹽的制備方法包括如下步驟：
3、(1)將透明質酸i或其鹽、透明質酸ⅱ或其鹽、第一堿性溶液和交聯劑混合，反應，得到交聯透明質酸i′或其鹽；
4、(2)將透明質酸ⅲ或其鹽、第二堿性溶液和交聯劑混合，反應，得到交聯透明質酸ⅱ′或其鹽；
5、(3)將步驟(1)所得交聯透明質酸i′或其鹽加水稀釋后，加入步驟(2)所得交聯透明質酸ⅱ′或其鹽及透明質酸iv或其鹽，混合反應，得到所述的交聯透明質酸或其鹽。
6、進一步地，所述第一堿性溶液的質量濃度高于所述第二堿性溶液的質量濃度。
7、進一步地，所述透明質酸i或其鹽的分子量高于所述透明質酸ⅱ、iii、iv或其鹽的分子量。
8、進一步地，步驟(1)中第一堿性溶液的濃度為10～100mg/ml(如10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、35mg/ml、36mg/ml、37mg/ml、38mg/ml、39mg/ml、40mg/ml、41mg/ml、42mg/ml、43mg/ml、44mg/ml、45mg/ml、46mg/ml、47mg/ml、48mg/ml、49mg/ml、50mg/ml、51mg/ml、52mg/ml、53mg/ml、54mg/ml、55mg/ml、56mg/ml、57mg/ml、58mg/ml、59mg/ml、60mg/ml、70mg/ml、80mg/ml、90mg/ml、100mg/ml)，優選12～90mg/ml，更優選15～80mg/ml。
9、進一步地，步驟(2)中第二堿性溶液的濃度為0.1～50mg/ml(如0.1mg/ml、1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17mg/ml、18mg/ml、19mg/ml、20mg/ml、21mg/ml、22mg/ml、23mg/ml、24mg/ml、25mg/ml、26mg/ml、27mg/ml、28mg/ml、29mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、50mg/ml)，優選1～40mg/ml，更優選5～30mg/ml。
10、進一步地，所述透明質酸i或其鹽的分子量為900～3000kda(如900kda、950kda、1000kda、1100kda、1200kda、1300kda、1400kda、1500kda、1600kda、1700kda、1800kda、1900kda、2000kda、2500kda、3000kda)，優選1000～2000kda，更優選1200～1600kda。
11、在本專利技術的一個實施方式中，所述透明質酸i或其鹽的分子量為1500kda。
12、進一步地，所述透明質酸ⅱ、iii、iv或其鹽的分子量為100～1000kda(如100kda、150kda、200kda、250kda、300kda、350kda、400kda、450kda、500kda、550kda、560kda、570kda、580kda、590kda、600kda、610kda、620kda、630kda、640kda、650kda、700kda、750kda、800kda、850kda、900kda、1000kda)，優選300～800kda，更優選400～700kda。
13、進一步地，所述透明質酸ⅱ、iii、iv或其鹽的分子量的可以相同或不同。
14、在本專利技術的一個實施方式中，所述透明質酸ⅱ、iii、iv或其鹽的分子量為600kda。
15、進一步地，步驟(1)中所述透明質酸i或其鹽與透明質酸ⅱ或其鹽的質量比為2-10:1，優選3-9:1。
16、在本專利技術的一個實施方式中，步驟(1)所述透明質酸i或其鹽與透明質酸ⅱ或其鹽的質量比為3:1。
17、進一步地，所本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種含微球和交聯透明質酸或其鹽的組合物，其特征在于，所述組合物包括交聯透明質酸或其鹽、微球；所述交聯透明質酸或其鹽的制備方法包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述步驟(1)中第一堿性溶液的濃度為10～100mg/mL，優選12～90mg/mL，更優選15～80mg/mL；所述步驟(2)中第二堿性溶液的濃度為0.1～50mg/mL，優選1～40mg/mL，更優選5～30mg/mL。
3.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述透明質酸I或其鹽的分子量為900～3000kDa，優選1000～2000kDa，更優選1200～1600kDa；所述透明質酸Ⅱ、III、IV或其鹽的分子量為100～1000kDa，優選300～800kDa，更優選400～700kDa。
4.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，步驟(1)中所述透明質酸I或其鹽與透明質酸Ⅱ或其鹽的質量比為2-10:1，優選3-9:1；
5.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，所述透明質酸IV或其鹽相對于透明質酸I或其鹽而言
6.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，步驟(1)、(2)、(3)中所述反應的溫度為20～30℃；優選地，步驟(1)、(2)、(3)中所述反應的時間為4～30h。
7.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，其中透明質酸鹽選自：透明質酸鈉、透明質酸鉀、透明質酸鈣、透明質酸鎂、透明質酸銨、透明質酸四丁基銨、透明質酸鉍和透明質酸鋅中的任一種，優選為透明質酸鈉；
8.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，所述微球選自聚酯微球、膠原蛋白微球、絲素蛋白微球和羥基磷灰石微球中的一種或幾種；優選為聚酯微球；更優選地，聚酯微球選自PLLA、PDLA、PDLLA、PLGA、PMMA、PCL、PEG-PLLA和HA-PLLA中的一種或幾種。
9.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，所述組合物中微球的含量為1％～35％，優選10％～32％，更優選15％～30％；
10.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，所述組合物還包括非交聯透明質酸或其鹽、磷酸鹽緩沖液、及任選的局部麻醉藥和/或水溶性纖維素；
11.一種如權利要求1-10任一項所述組合物的制備方法，其包括如下步驟：
12.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，在調節體系pH值至中性后，還可加入磷酸鹽緩沖液、非交聯透明質酸或其鹽，及任選的加入局部麻醉藥和/或水溶性纖維素。
13.一種如權利要求1-10任一所述的組合物或權利要求11-12任一項所述的制備方法制備所得的組合物在制備藥品、組織工程材料或化妝品中的應用；
...【技術特征摘要】
1.一種含微球和交聯透明質酸或其鹽的組合物，其特征在于，所述組合物包括交聯透明質酸或其鹽、微球；所述交聯透明質酸或其鹽的制備方法包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述步驟(1)中第一堿性溶液的濃度為10～100mg/ml，優選12～90mg/ml，更優選15～80mg/ml；所述步驟(2)中第二堿性溶液的濃度為0.1～50mg/ml，優選1～40mg/ml，更優選5～30mg/ml。
3.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述透明質酸i或其鹽的分子量為900～3000kda，優選1000～2000kda，更優選1200～1600kda；所述透明質酸ⅱ、iii、iv或其鹽的分子量為100～1000kda，優選300～800kda，更優選400～700kda。
4.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，步驟(1)中所述透明質酸i或其鹽與透明質酸ⅱ或其鹽的質量比為2-10:1，優選3-9:1；
5.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，所述透明質酸iv或其鹽相對于透明質酸i或其鹽而言，其加入量為透明質酸i或其鹽的5-30％。
6.根據權利要求1-3任一項所述的組合物，其特征在于，步驟(1)、(2)、(3)中所述反應的溫度為20～30℃；優選地，步驟(1)、(2)、(3)中所述反應的時間為4～30h。
【專利技術屬性】
技術研發人員：肖莉，張堃，
申請(專利權)人：愛美客技術發展股份有限公司，
類型：發明
國別省市：
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