【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及藥物分析檢測領域，具體涉及一種用高效液相色譜法測定左卡尼汀產品中的右卡尼汀的方法。
技術介紹
1、左卡尼汀，又名左旋肉堿，其化學名稱為(3r)-3-羥基-4-(三甲基銨)丁酸內鹽，分子式為c7h15no3，其化學結構式如下：
2、
3、左卡尼汀是哺乳動物能量代謝中必需的體內天然物質，是一種廣泛存在于機體組織內的特殊氨基酸，其主要功能是促進脂類代謝。左卡尼汀的補充可緩解其因體內缺乏引起的脂肪代謝紊亂、骨骼肌和心肌等組織的功能障礙，具有改善腎臟病患者腎性貧血、改善心肌缺血、改善心功能、保護肝臟、治療男性不育癥等作用，在臨床上應用廣泛。左卡尼汀口服溶液是此類藥物的一種制劑類型。
4、左卡尼汀結構中存在一個手性中心，故存在左卡尼汀對映異構體，即右卡尼汀。右卡尼汀對肉堿乙酰轉移酶(cat)和肉堿脂肪酰轉移酶(ptc)有競爭性抑制作用，在生化過程中產生毒副作用，因此考慮到用藥的安全性，需要嚴格控制右卡尼汀的含量。
5、右卡尼汀化學名稱為(d-3-羧基-2-羥基丙基)三甲基銨內鹽，分子式為c7h15no3，結構式如下：
6、
7、左卡尼汀法定標準中只有《美國藥典》(usp2024)對左卡尼汀中對映異構體進行了控制，但該方法中用到的衍生化試劑不易獲得，且成本較高；左卡尼汀口服溶液法定標準暫未收載對右旋異構體控制的方法，因此，有必要對檢測左卡尼汀產品中右卡尼汀含量的方法進行開發。左卡尼汀口服溶液質量標準(ybh09082022)對右卡尼汀進行了控制，色譜條件中高
8、因此，本專利技術旨在提供一種經濟且安全有效的測定左卡尼汀產品中右卡尼汀的方法，實現對左卡尼汀原料及其制劑的質量可控。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是提供一種安全有效的測定左卡尼汀產品中的右卡尼汀的方法，可用于左卡尼汀原料藥、左卡尼汀制劑的制備過程及最終產品的質量控制。
2、本專利技術的方法包括以下步驟：
3、(1)制備系統適用性溶液；
4、(1.1)分別取適量的左卡尼汀對照品、右卡尼汀對照品加溶劑制成含左卡尼汀2mg/ml、右卡尼汀4μg/ml的混合溶液；
5、(1.2)衍生化：取10ml上述混合溶液置100ml燒瓶中，滴加1滴酚酞指示液，1～2滴1mol/l氫氧化鉀溶液，再加2-溴苯乙酮100mg，搖勻，攪拌加熱回流30min；
6、(1.3)萃取：冷卻，加50ml乙酸乙酯萃取，取水相2ml置10ml量瓶中，用所述溶劑稀釋至刻度，搖勻，獲得上述系統適用性溶液；
7、(2)制備供試品溶液和空白溶液；
8、(2.1)取左卡尼汀待測樣品適量，加所述溶劑制成含左卡尼汀2mg/ml的左卡尼汀貯備溶液；
9、(2.2)衍生化和萃取：取上述左卡尼汀貯備溶液和溶劑各10ml分別依次按照步驟(1.2)、(1.3)獲得上述供試品溶液和空白溶液；
10、(3)利用高效液相色譜進行檢測
11、依次分別將空白溶液、系統適用性溶液和供試品溶液注入高效液相色譜儀，并記錄色譜圖，按峰面積歸一化法計算出所述左卡尼汀待測樣品中右卡尼汀的含量，計算公式：
12、
13、式中ax-----供試品溶液中右卡尼汀衍生物峰的峰面積；
14、ar-----供試品溶液中左卡尼汀衍生物峰的峰面積。
15、高效液相色譜的條件為
16、色譜柱：用纖維素-三-(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)為填充劑；
17、流動相：六氟磷酸鹽緩沖液-乙腈，體積比為77∶23～69∶31；
18、柱溫：15～25℃；
19、流速：0.3～0.5ml/min；
20、檢測波長：246nm。
21、優選地，上述流動相六氟磷酸鹽緩沖液-乙腈的體積比為72：28，等度洗脫。
22、優選地，上述六氟磷酸鹽為六氟磷酸鈉，濃度為0.05mol/l，ph值為3.8。
23、優選地，上述色譜柱規格為4.6mm×250mm，填料粒徑5μm。
24、優選地，上述色譜柱為chiral?md(2)-rh-5u色譜柱。
25、優選地，上述左卡尼汀待測樣品為選自左卡尼汀原料、左卡尼汀口服溶液中間產品和左卡尼汀口服溶液中的任意一種。
26、本專利技術中所述“右卡尼汀”是指左卡尼汀的右旋異構體。
27、本專利技術通過對色譜條件的探索確定了有效分離左卡尼汀與右卡尼汀的色譜條件，并驗證了本專利技術方法具有專屬性好、分離度佳、重現性好的優點，對產品質量控制及穩定性樣品檢測具有重要的意義。
28、本專利技術方法適用于左卡尼汀原料、左卡尼汀制劑包括左卡尼汀口服溶液中間產品和左卡尼汀口服溶液的檢測。本專利技術的檢測方法準確，操作簡單，試劑易得，可以充分滿足左卡尼汀和右卡尼汀的分離要求，較好地控制待測樣品中右卡尼汀的含量，保證產品質量，在實際質量控制工作中實用性強。
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1.一種利用高效液相色譜測定左卡尼汀產品中的右卡尼汀的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述流動相六氟磷酸鹽緩沖液-乙腈的體積比為72∶28，等度洗脫。
3.根據權利要求1所述的方法，其中所述六氟磷酸鹽為六氟磷酸鈉。
4.根據權利要求3所述的方法，其中所述六氟磷酸鈉緩沖液的濃度為0.0375mol/L～0.075mol/L，pH值為3.6～4.0。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述色譜條件為：
6.根據權利要求1所述的方法，其中所述色譜柱為CHIRAL?MD(2)-RH-5U色譜柱。
7.根據權利要求6所述的方法，其中所述色譜柱的規格為4.6mm×250mm，粒徑為5μm。
8.根據權利要求1所述的方法，其中所述溶劑為無水乙醇-水，無水乙醇-水的體積比為33∶67。
9.根據權利要求1所述的方法，其中所述色譜條件為：色譜柱為CHIRAL?MD(2)-RH-5U(4.6mm×250mm，5μm)，流動相為0.05mol/L六氟磷酸鈉緩沖液-
10.根據權利要求1-9中任一項所述的方法，其特征在于，所述左卡尼汀待測樣品為左卡尼汀原料、左卡尼汀制劑及其中間產品。
...【技術特征摘要】
1.一種利用高效液相色譜測定左卡尼汀產品中的右卡尼汀的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述流動相六氟磷酸鹽緩沖液-乙腈的體積比為72∶28，等度洗脫。
3.根據權利要求1所述的方法，其中所述六氟磷酸鹽為六氟磷酸鈉。
4.根據權利要求3所述的方法，其中所述六氟磷酸鈉緩沖液的濃度為0.0375mol/l～0.075mol/l，ph值為3.6～4.0。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述色譜條件為：
6.根據權利要求1所述的方法，其中所述色譜柱為chiral?md(2)-rh-5u色譜柱。
7.根據權利要求6所述的方法...
【專利技術屬性】
技術研發人員：高媛，嚴悅梅，伍法杰，張佳旭，
申請(專利權)人：深圳海王醫藥科技研究院有限公司，
類型：發明
國別省市：
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