本發明專利技術提供了一種高效地從肉蓯蓉中同時提取肉蓯蓉苷、毛蕊花糖苷及松果菊苷的方法，首先，將肉蓯蓉切片在65%乙醇中浸提，所得浸提液在DM301樹脂柱吸附，然后依次用40%甲醇和0.1?0.2wt％醋酸水溶液按體積比為20：80組成的洗脫液、60%甲醇和0.1?0.2wt％醋酸水溶液按體積比為30：70組成的洗脫液、80%甲醇和0.1?0.2wt％醋酸水溶液按體積比為40：60組成的洗脫液洗脫，依次得到肉蓯蓉苷、毛蕊花糖苷及松果菊苷。相對于現有工藝，本發明專利技術提高了毛蕊花糖苷和松果菊苷的產量，同時分離了肉蓯蓉苷，大大降低了生產成本，提高了產品效益。
1、肉蓯蓉[cistanches?salsa(ca.aley)eibeck]，別名疆蕓、寸蕓、蓯蓉、查干告亞(蒙語)，屬瀕危種。肉蓯蓉多寄生在其30-100厘米深的側根上，生于海拔225-1150m的荒漠中，寄生在藜科植物梭梭、白梭梭等植物的根上，主產于新疆、內蒙古阿拉善盟，甘肅、寧夏也有分布。肉蓯蓉全世界大概有20多種，在我國主要有荒漠肉蓯蓉、管花肉蓯蓉、鹽生肉蓯蓉和白花鹽蓯蓉，其中現廣泛使用的是新疆種植的管花肉蓯蓉為主，該品種肉質莖含松果菊甘、麥角甾苷、肉蓯蓉甙(cistanoside)a、b、c、h，洋丁香酚甙(acteoside)，2-乙酰基洋丁香酚甙(2-acetylacteoside)，海膽甙(echinacoside)等20多種苯乙醇甙成分，還含鵝掌楸甙(lirio-dendrin)，8-表馬錢子甙酸(8-epiloganic?acid)，胡蘿卜甙(daucos-terol)，甜菜堿(betaine)，β-谷甾醇(β-sitosterol)，甘露醇(mannitol)，n，n-二甲基甘按酸甲酯(n，n-dimethylglycinemethyl?ester)和苯丙氨酸(phenylalanine)，纈氨酸(valine)，亮氨酸(leucine)，異亮氨酸(isoleacine)，賴氨酸(lysine)，蘇氨酸(serine)等十五種氨基酸及琥珀酸(succinic?acid)，三十烷醇(tcmlibiacontanol)，多糖類等。
>2、現代藥理研究表明,肉蓯蓉具有提高性功能、抗衰老、提高學習記憶能力、抗老年癡呆癥、通便等多方面的作用,廣泛用于中醫臨床處方、中成藥和保健產品。研究表明，毛蕊花糖苷在補腎壯陽、保護肝臟、改善神經、抗氧化、抗衰老、改善記憶力、松弛血管、抑制前列腺增生等方面均有較明顯的改善作用，具備較高的藥用價值。3、新疆出產的管花肉蓯蓉因含糖量低，其他有效成分含量較高，鮮材的松果菊苷和毛蕊花糖苷(麥角甾苷)一般含量在100g當中含1.5g-4g不等，容易被按照不同純度量化提取，因此在制藥方面應用非常廣泛，如腎寶片，鴻茅藥酒，勁酒等選用管花肉蓯蓉為主要原料，其他品種如荒漠肉蓯蓉等的有效含量較低，松果菊苷和毛蕊花糖苷(麥角甾苷)一般含量在100g當中含0.3g左右，提取難度較大。
4、石萬銀等(cn110092805a)通過乙醇水溶液粗提、c18反向色譜柱梯度洗脫，控制洗脫液的組成配比和洗脫時間，分別收集到松果菊苷和毛蕊花糖苷。馮昌寅(馮昌寅.肉蓯蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷提取純化工藝研究[d].東北林業大學.)將常規醇提取、水超聲提取、ils提取和傳統熱回流提取方法進行對比，表明ils提取肉蓯蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的得率最高，同時還通過靜態吸附、解吸附篩選6種大孔吸附樹脂，進而篩選出最優樹脂。裴文靜(裴文靜.管花肉蓯蓉中苯乙醇苷的分離純化研究[d].石河子大學.)對比了高剪切均質化提取法(hshe)、微波輔助提取法(maem)和超聲波輔助提取法(uaem)，認為最優提取方法為高剪切均質化提取法(hshe)，最佳提取工藝參數為：提取溫度70℃，乙醇濃度50％，高剪切均質乳化機轉速16000rpm，工作2分鐘，管花肉蓯蓉粉末與乙醇溶液質量比1:9，提取次數1次。進一步研究了介孔碳吸附法和分子印跡法純化松果菊苷(ech-gs)和毛蕊花糖苷(act-gs)。劉朋龍等(劉朋龍,王亮.應用大孔樹脂分離純化管花肉蓯蓉中苯乙醇苷研究[j].農產品加工,2018(12):4.doi:cnki:sun:ncpj.0.2018-23-005.)應用ab-8型大孔樹脂分離純化管花肉蓯蓉,得到最佳純化工藝為上樣液質量濃度1.2mg/ml，上樣流速1.5bv/h，吸附時間1.5h，解析時間4h，洗脫的乙醇體積分數為40％，洗脫流速為1.5bv/h。
5、上述方法多具有工藝簡單，技術純熟，大孔樹脂可再生，成本低廉等優點。然而，現有技術中，傳統工藝分離出來的毛蕊花糖苷和松果菊苷含量普遍較低，產品純度較低。同時，傳統工藝未能充分利用肉蓯蓉的有效成分，大部分工藝只是分離了毛蕊花糖苷和松果菊苷，且含量不高，原料利用率不高。
技術實現思路
1、針對現有技術存在的缺點，本專利技術提出了一種肉蓯蓉的高效提取方法，該方法能夠得到高純度的產品，同時提取出肉蓯蓉苷，充分利用原料，提高收率，降低生產成本。
2、為實現上述目的，本專利技術所采用的技術方案是：
3、一種肉蓯蓉的高效提取方法，包括如下步驟：
4、(1)將肉蓯蓉切片或者粉碎；
5、(2)將處理過的肉蓯蓉置于60-70％的乙醇中進行浸提，得浸提液；
6、(3)濃縮浸提液，靜置或離心后取上層清液，將清夜過dm301樹脂柱吸附；
7、(4)采用40％甲醇和0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為20：80組成的洗脫液進行第一次洗脫，提純洗脫液得肉蓯蓉苷；
8、(5)采用50-60％甲醇和0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為30：70組成的洗脫液進行第二次洗脫，提純洗脫液得毛蕊花糖苷；
9、(6)采用80-90％甲醇和0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為40：60組成的洗脫液進行第三次洗脫，提純洗脫液得松果菊苷。
10、進一步地，步驟(1)將肉蓯蓉干燥后進行切片。
11、進一步地，步驟(2)用65％的乙醇液作為提取溶劑，按料液比1：10，浸提3次。
12、進一步地，步驟(2)的三次浸提，分別是，第一次在80℃下浸提2h，第二次在70℃下浸提1.5h，第三次在60℃下浸提1.5h，浸提完成后，過濾并合并濾液。
13、進一步地，步驟(3)首先將浸提液濃縮至比重為1.15g/ml，靜置24小時，取上清液，將濾液過dm301樹脂柱吸附，上柱流速60ml/h，吸附完成。
14、進一步地，步驟(4)使用40％甲醇和0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為20：80組成的洗脫液洗脫，洗脫流速為40ml/h，濃縮洗脫液。
15、進一步地，步驟(4)的洗脫時間為0-20min。
16、進一步地，步驟(4)洗脫液濃縮后，回收甲醇和醋酸溶劑，噴霧干燥，得肉蓯蓉苷。
17、進一步地，步驟(5)使用60％甲醇和0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為30：70組成的洗脫液洗脫，洗脫流速為30ml/h，濃縮洗脫液。
18、進一步地，步驟(5)的洗脫時間為21-40min。
19、進一步地，步驟(5)洗脫液濃縮后，回收甲醇和醋酸溶劑，用甲醇萃取，將濃縮洗脫液在甲醇溶劑中按體積比為10：90，溫度60℃，萃取50min，萃取2次。
20、進一步地，步驟(5)洗脫的萃取液經膜過濾得濃縮液，將甲醇溶劑揮去，用熱乙醇在70℃下溶解濃縮液，趁熱過濾，回收乙醇，在-10℃下冷卻結晶24h本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種肉蓯蓉的高效提取方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)采用60-70％的乙醇液作為提取溶劑，按料液質量比1：10，浸提3次；第一次在80℃下浸提2h；第二次在70℃下浸提1.5h；第三次在60℃下浸提1.5h；浸提完成后，過濾并合并濾液。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)采用65％乙醇浸提肉蓯蓉切片。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)將步驟1)得到的浸提液濃縮至比重為1.15g/ml；靜置；取上清液，過濾后，將上清液過DM301樹脂柱吸附。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)用40％甲醇與0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為20：80組成的洗脫液洗脫，洗脫流速為40mL/h，洗脫時間為0-20min；濃縮洗脫液，回收甲醇和醋酸，噴霧干燥，得肉蓯蓉苷。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)用60％甲醇與0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為30：70組成的洗脫液洗脫，洗脫流速為30mL/h，洗脫時間為21-40min；濃縮洗脫液，回收甲醇和醋酸；用甲醇萃取，濃縮洗脫液：甲醇體積比為10：90，溫度60℃；萃取完成后，將萃取液經膜過濾得濃縮萃取液，將甲醇揮去；用熱乙醇在70℃下溶解濃縮萃取液，趁熱過濾；回收乙醇，在-10℃下冷卻結晶；抽濾，水洗，真空干燥，得毛蕊花糖苷。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)洗脫完成后，用截留分子量為550-600Da的陶瓷膜進行膜過濾，得濃縮液，濃縮液重結晶后得到毛蕊花糖苷。
8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟5)用80％甲醇與0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為40：60組成的洗脫液洗脫，洗脫流速為20mL/h，洗脫時間為41-50min；濃縮洗脫液，回收甲醇和醋酸；用甲醇萃取，濃縮洗脫液：甲醇體積比為10：90，溫度60℃；萃取完成后，將萃取液經膜過濾得濃縮萃取液，將甲醇揮去；用熱乙醇在70℃下溶解濃縮萃取液，趁熱過濾；回收乙醇，在-10℃下冷卻結晶；抽濾，水洗，真空干燥，得松果菊苷。
9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟5)洗脫完成后，用截留分子量為700-800Da的陶瓷膜進行膜過濾，得濃縮液，濃縮液重結晶后得到松果菊苷。
10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：
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【技術特征摘要】
1.一種肉蓯蓉的高效提取方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)采用60-70％的乙醇液作為提取溶劑，按料液質量比1：10，浸提3次；第一次在80℃下浸提2h；第二次在70℃下浸提1.5h；第三次在60℃下浸提1.5h；浸提完成后，過濾并合并濾液。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)采用65％乙醇浸提肉蓯蓉切片。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)將步驟1)得到的浸提液濃縮至比重為1.15g/ml；靜置；取上清液，過濾后，將上清液過dm301樹脂柱吸附。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)用40％甲醇與0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為20：80組成的洗脫液洗脫，洗脫流速為40ml/h，洗脫時間為0-20min；濃縮洗脫液，回收甲醇和醋酸，噴霧干燥，得肉蓯蓉苷。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)用60％甲醇與0.1-0.2wt％醋酸水溶液按體積比為30：70組成的洗脫液洗脫，洗脫流速為30ml/h，洗脫時間為21-40min；濃縮洗脫液，回收甲醇和醋酸；用甲醇萃取，濃縮洗脫...
【專利技術屬性】
技術研發人員：李輝，何西，侯小強，
申請(專利權)人：陜西青溪生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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