【技術實現步驟摘要】
本申請涉及生物醫藥，具體涉及一種可注射水凝膠微球的制備方法及其應用。
技術介紹
1、傳統的給藥系統具有固有的局限性，例如靶向性差和治療指數低，這會導致系統性的副作用并增加治療的成本和持續時間。為了克服這些缺點，已經為不同的治療應用開發了各種納米遞送系統。其中，脂質體(自組裝脂質囊泡)是迄今為止臨床應用研究最多的納米系統之一。脂質體由微米或納米大小的磷脂囊泡組成，其膜由磷脂雙層組成，將其內部水腔與外部水環境隔離開來。由于其雙層磷脂能通過磷酸膽堿頭形成的潤滑層而具備多孔性和可注射性，從而應用于制藥和醫學。因為表現出脂質雙層，并允許在管腔或雙層本身內封裝各種生物分子且具有完全生物相容性、無毒，因此在生物學領域備受關注。
2、水凝膠是3d交聯的聚合物網絡，具有類似于身體組織的高吸水能力，這使它們能夠封裝藥物并在生理條件下保護它們。水凝膠的遞送機理通常由被動擴散控制，被動擴散很大程度上取決于水凝膠結構(如水凝膠孔徑、交聯程度、刺激敏感水凝膠容量等)。然而，由于存在不希望的立即釋放藥物的可能性，這會增加藥物的局部濃度，從而引起意想不到的體內毒性。
3、肌少癥是一種影響老年人群的生活質量且與年齡增長密切相關的疾病。線粒體功能障礙是以nad+水平降低引起的能量代謝紊亂為核心，引起骨骼肌衰老的關鍵。補充煙酰胺單核苷酸(nmn)可提高體內nad+水平改善能量代謝，即便采用上述給藥方式，現目前仍然缺乏作用時間長、高效的補充策略。
技術實現思路
1、針對現有技術存在的上述不足，本申
2、為了解決上述技術問題，本申請采用如下技術方案：
3、一種可注射水凝膠微球的制備方法，具體包括如下步驟：
4、步驟1：nmn脂質體微粒的制備：
5、室溫下通過微流控設備將水相和脂相進行組裝，獲得載有nmn脂質體微粒nmn@lipo-s；其中，在組裝過程中，水相流速為700～800μl·min-1，脂相流速為200～300μl·min-1；所述水相為β-煙酰胺單核苷酸水溶液，其濃度為3～5mg/l；所述脂相為脂質體；
6、步驟2：甲基丙烯酰化氧化透明質酸的制備；
7、采用高碘酸鈉對透明質酸在室溫下進行氧化處理得到氧化透明質酸，對得到的氧化透明質酸進行透析以去除雜質；然后在緩沖液中，采用甲基丙烯酸酐對氧化透明質酸進行修飾，室溫下避光反應0.5～2h，過濾烘干后得到水凝膠微球前體物質ahm；其中，高碘酸鈉與透明質酸的摩爾比為(1:1)～(5:1)，甲基丙烯酸酐與氧化透明質酸的摩爾比為(1:2)～(1:5)，所述緩沖液為ph為7～9的pbs緩沖液；
8、步驟3：負載nmn脂質體的水凝膠微球的制備：
9、將步驟2得到的ahm與步驟1得到的nmn@lipo-s混合，隨后向其中加入引發劑后得到混合物，將該混合物通入微流控設備，使ahm與nmn@lipo-s進行混合組裝，并在微流控設備中的混合位置處照射365nm或者405nm紫外光使其進行聚合反應，得到所述水凝膠微球nmn@lipo-s@ahm；
10、其中，按照質量百分比計算，在混合物中，ahm的用量為1％～12％，光引發劑的用量為0.1％～1％，表面活性劑的用量為0.1～2％；在混合物中，nmn@lipo-s濃度為0.1mg/ml～5mg/ml；油相為石蠟油或者二甲基硅油，表面活性劑為span80。
11、優選地，在步驟1中，所述脂質體包括中性脂質、陽離子脂質和ss31；所述中性脂質為膽固醇，所述陽離子脂質由dotap、dlin-k-c3-dma、sm102、dodac組成；其中，膽固醇、dotap、dlin-k-c3-dma、sm102、dodac和ss31的質量比為1:1.8:0.5:0.95:2:(0.12～0.4)。
12、優選地，ss31進行如下預處理：
13、將ss31與dspe-peg2k-nhs酯按摩爾比為(1.0～1.5)：1的比例混合，使用dmso溶解攪拌后，透析凍干，得到dspe-peg2k-ss31粉末。
14、本申請還提供了一種可注射水凝膠微球的應用，上述制備方法制備得到的水凝膠微球用于制備治療肌少癥的藥物。
15、與現有技術相比，本申請具有如下有益效果：
16、1、本申請通過將水凝膠的藥物遞送系統同微流控技術得到的脂質體微粒同整合，利用脂質體材料對nmn包裹，同時在脂質體中引入了線粒體靶向肽ss-31，實現更持久和穩定的釋放，從而可使nmn選擇性靶向細胞線粒體，提高應用效果。
17、2、本申請所述水凝膠微球(nmn@lipo-s@ahm)中，水凝膠微球負載nmn，實現nad+合成原材料的持續供給、緩釋，避免nmn的快速代謝；同時結合使用線立體靶向肽，將nmn向線粒體的靶向遞送，達到精準持續改善線粒體能量代謝，從而延緩骨骼肌細胞衰老的目的，為治療衰老相關疾病(例如肌少癥)提供了新的治療方案，是一種極具潛力的生物材料。
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1.一種可注射水凝膠微球的制備方法，其特征在于，具體包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，在步驟1中，所述脂質體包括中性脂質、陽離子脂質和SS31；所述中性脂質為膽固醇，所述陽離子脂質由DOTAP、DLin-K-C3-DMA、SM102和DODAC組成；其中，膽固醇、DOTAP、DLin-K-C3-DMA、SM102、DODAC和SS31的質量比為1:1.8:0.5:0.95:2:（0.12~0.4）。
3.根據權利要求2所述制備方法，其特征在于，所述SS31進行如下預處理：
4.一種可注射水凝膠微球的應用，其特征在于，權利要求1~3任意所述制備方法制備得到的水凝膠微球用于制備治療肌少癥的藥物。
【技術特征摘要】
1.一種可注射水凝膠微球的制備方法，其特征在于，具體包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，在步驟1中，所述脂質體包括中性脂質、陽離子脂質和ss31；所述中性脂質為膽固醇，所述陽離子脂質由dotap、dlin-k-c3-dma、sm102和dodac組成；其中，膽固醇、dotap、dlin-k-c...
【專利技術屬性】
技術研發人員：包微，周建瑜，
申請(專利權)人：重慶市巴南區人民醫院，
類型：發明
國別省市：
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