【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及核酸擴增領域，尤其涉及一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法。
技術介紹
1、在過去幾十年中，分子生物學領域取得了巨大的進步，其中核酸擴增技術的發展尤為引人注目。核酸擴增是一種重要的實驗技術，用于在實驗室中擴增dna或rna分子。其中最常用的方法是聚合酶鏈反應（pcr），它被廣泛應用于基因組學研究、醫學診斷、法醫學等領域。然而，傳統的pcr技術通常需要較大的反應體積、較長的擴增時間，并且在處理微量樣本時存在一定的局限性。近年來，隨著微流控技術的發展，人們開始探索在微小尺度內進行核酸擴增的可能性，以期實現更高效、更快速的擴增效果。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于解決現有技術中的上述問題，提供一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，在毛細管內壁固定多段不同的探針，在一根毛細管同時擴增多種dna產物，實現在毛細管內壁的多指標擴增。
2、為達到上述目的，本專利技術技術方案如下：
3、一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，包括以下步驟：
4、1）?毛細管內壁預處理與修飾：首先將毛細管浸沒于堿溶液中加熱，隨后用水清洗并氮氣吹干；將處理后的毛細管浸沒于由乙醇、水和aptes混合的溶液中，避光反應，之后用水清洗，氮氣吹干，并烘烤；將處理后的毛細管浸沒于戊二醛溶液中，室溫下避光處理，之后用丙酮和水依次清洗，氮氣吹干；
5、2）在毛細管內壁固定探針：首先使用注射泵控制注射器，交替抽取有機相和探針溶液進入毛細管，形成分段
6、3）采用步驟2）固定有探針的毛細管進行pcr核酸擴增。
7、步驟3）中，先將擴增溶液充滿已固定探針的毛細管，然后將毛細管安裝在具有溫度控制功能的平臺上，使用半導體制冷片對毛細管進行60~95℃的溫度循環。
8、所述半導體制冷片與毛細管之間設置有導熱墊。
9、所述導熱墊上設有供所述毛細管置入的凹槽。
10、步驟1）中，所述堿溶液采用氫氧化鈉溶液。
11、步驟1）中，所述乙醇、水和aptes按體積比95:3:2混合。
12、步驟2）中，固定針對不同目標序列的多種探針，以形成多指標擴增的探針陣列。
13、現對于現有技術，本專利技術具有以下突出的有益效果：
14、1、本專利技術通過對毛細管多步驟處理，對毛細管內壁進行表面修飾，由此可在毛細管內壁固定探針，并通過在毛細管內壁使用有機相間隔，形成探針陣列。
15、2、本專利技術方法可以設計針對不同目標序列的多種探針，形成多指標擴增的探針陣列，實現核酸擴增的高效率，從而可在一次實驗中同時檢測多個核酸目標，提高檢測的通量和效率。
16、3、本專利技術通過毛細管核酸擴增，使得目標核酸與探針的接觸機會大大增加，從而提高檢測的靈敏度，即使在低濃度下，也能有效地捕獲并擴增目標核酸。毛細管的小體積和高密度探針的設計使得反應物之間的接觸更加緊密，反應動力學得到優化，這有助于加快反應速度，縮短時間，提高實驗效率。
17、4、由于毛細管體積小巧且探針密度高，顯著減少試劑的消耗量。這對于降低實驗成本、減少環境污染以及實現可持續發展具有重要意義。且毛細管作為反應容器，減少了與外界環境的接觸，降低了污染的風險，保證了實驗的準確性和可靠性。
18、5、本專利技術使用溫度控制平臺能夠控制毛細管的溫度，確保pcr核酸擴增過程中的溫度循環，且由于毛細管體積小巧且易于處理，本專利技術易于與其他微流控技術或便攜式設備集成，實現檢測的便攜化和現場化。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：步驟3）中，先將擴增溶液充滿已固定探針的毛細管，然后將毛細管安裝在具有溫度控制功能的平臺上，使用半導體制冷片對毛細管進行60~95℃的溫度循環。
3.如權利要求2所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：所述半導體制冷片與毛細管之間設置有導熱墊。
4.如權利要求3所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：所述導熱墊上設有供所述毛細管置入的凹槽。
5.如權利要求1所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：步驟1）中，所述堿溶液采用氫氧化鈉溶液。
6.如權利要求1所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：步驟1）中，所述乙醇、水和APTES按體積比95:3:2混合。
7.如權利要求1所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：步驟2）中，固定針對不同目標序列的多種探
...【技術特征摘要】
1.一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：步驟3）中，先將擴增溶液充滿已固定探針的毛細管，然后將毛細管安裝在具有溫度控制功能的平臺上，使用半導體制冷片對毛細管進行60~95℃的溫度循環。
3.如權利要求2所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴增的方法，其特征在于：所述半導體制冷片與毛細管之間設置有導熱墊。
4.如權利要求3所述的一種在毛細管內壁固定探針進行核酸擴...
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。