本發(fā)明專利技術涉及農(nóng)業(yè)生物技術領域，具體涉及BnaC04.bZIP16基因在提高植物耐鹽性中的應用。本發(fā)明專利技術提供的BnaC04.bZIP16基因，其序列如SEQ?ID?NO.1所示，其編碼的蛋白序列如SEQ?ID?NO.2所示，本發(fā)明專利技術發(fā)現(xiàn)，野生型的甘藍型油菜在澆灌鹽水后會高表達BnaC04.bZIP16基因，同時過表達該基因的轉基因型甘藍型油菜能夠在鹽脅迫環(huán)境中更好地生長，敲除了BnaC04.bZIP16基因的油菜則更難以在鹽脅迫環(huán)境中生長，據(jù)此驗證了BnaC04.bZIP16基因作為正向調節(jié)因子在增強油菜耐鹽性中的作用，而且為開發(fā)具有高耐鹽性的甘藍型油菜新品種提供了關鍵的分子工具，該基因在農(nóng)業(yè)種植領域特別是提高農(nóng)作物耐鹽性及培育高耐鹽性轉基因作物中具有廣泛的應用潛力和商業(yè)價值。
【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術涉及植物基因工程，尤其涉及甘藍型油菜
bnac04.bzip16基因在增強植物對鹽脅迫的耐受性方面的應用。
技術介紹
1、隨著全球氣候變化和不合理的土地管理實踐，土壤鹽漬化已成為制約農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和作物生長的主要非生物逆境之一。除了通過合理的灌溉排水、土壤改良等手段外，通過基因工程等手段積極發(fā)展耐鹽作物也是一種有效的方式。
2、甘藍型油菜作為中國重要的油料作物，其生長受到土壤鹽漬化的顯著影響。土壤鹽漬化不僅限制了甘藍型油菜的生長，還影響了其產(chǎn)量和品質。而長江中下游地區(qū)作為我國重要的甘藍型油菜產(chǎn)地，其土壤受海水浸漬側滲和地下水返鹽影響含鹽量逐漸增高，低鹽土壤區(qū)逐漸增大，影響甘藍型油菜產(chǎn)業(yè)等相關作物產(chǎn)量。因此培育適于在含鹽土壤環(huán)境下生長的甘藍型油菜、培育能夠耐受鹽脅迫的甘藍型油菜是當務之急。
技術實現(xiàn)思路
1、本專利技術的目的是提供一種
bnac04.bzip16基因在提高植物耐鹽性中的應用。
2、本專利技術克隆了甘藍型油菜基因
bnac04.bzip16（bnac04g09600d），并發(fā)現(xiàn)其在提高植物耐鹽性中具有重要作用。
3、為實現(xiàn)本專利技術，第一方面，本專利技術提供甘藍型油菜基因
bnac04.bzip16在提高植物耐鹽性中的應用。
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p>4、本專利技術中，所述bnac04.bzip16蛋白的氨基酸序列為以下至少一種：5、(1)如seq?id?no.2所示。
6、(2)?與如seq?id?no.2所示的氨基酸序列具有至少90％同源性且具有同等功能蛋白的氨基酸序列。
7、(3)?將seq?id?no.2所示氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失和/或添加由seq?id?no.2衍生的且保持seq?id?no.2所示氨基酸序列功能的蛋白。
8、(4)在(1)-(3)任一種氨基酸序列的n端和/或c端連接標簽、酶切位點和/或連接肽序列得到的氨基酸序列。
9、第二方面，本專利技術提供一種甘藍型油菜
bnac04.bzip16基因在提高植物耐鹽性中的應用，其特征在于，所述
bnac04.bzip16基因的核苷酸序列為以下至少一種：
10、(1)如seq?id?no.1所示。
11、(2)?在嚴格條件下與seq?id?no.1所示序列雜交且表達相同功能蛋白的核苷酸序列，所述嚴格條件為在含0.1%?sds的0.1?×?sspe或含0.1%?sds的0.1?×?ssc溶液中，在65℃下雜交，并用該溶液洗膜。
12、(3)?將seq?id?no.1所示的核苷酸序列經(jīng)取代、缺失和/或增加一個或多個核苷酸且表達相同功能蛋白的核苷酸序列。
13、(4)與seq?id?no.1所示的核苷酸序列具有90%以上同源性且表達相同功能蛋白的核苷酸序列。
14、本專利技術發(fā)現(xiàn)，植物在鹽脅迫環(huán)境中會高表達
bnac04.bzip16基因所編輯的蛋白，同時通過基因工程手段改造出的高表達上述蛋白的植物也更能適應鹽脅迫環(huán)境，而敲除了該基因的植物則更容易受到鹽脅迫環(huán)境的影響導致產(chǎn)量降低。
15、第三方面，本專利技術提供一種提高植物耐鹽性的方法，具體為，增加所述的甘藍型油菜基因
bnac04.bzip16編碼的蛋白在植物中的表達量，其方法包括但不限于以下內容。
16、（1）通過基因工程手段將過表達
bnac04.bzip16基因的載體轉入植物中；或
17、（2）通過基因工程手段選擇和改造所述
bnac04.bzip16基因的啟動子為強啟動子；或
18、（3）通過基因工程手段導入增強子；或
19、（4）通過基因工程手段增加植物染色體中的
bnac04.bzip16基因拷貝數(shù)。
20、在一些實施例中，可通過將含有
bnac04.bzip16基因的質粒轉化至植物中，并育種至純合的方法使獲得的植物過表達
bnac04.bzip16基因，進而獲得更高的耐鹽性。在本專利技術中，通過農(nóng)桿菌將含有
bnac04.bzip16基因的質粒轉化至甘藍型油菜中，獲得過表達
bnac04.bzip16的轉基因油菜。
21、在一些實施例中，所述育種方法為可以是任何最終能獲得純合子的育種方法，包括個體選擇、單倍體育種、系譜法等，優(yōu)選為加代繁種。
22、第四方面，本專利技術提供一種提高植物中bnac04.bzip16蛋白表達量的方法，具體為將相應植物放在鹽脅迫環(huán)境中生長，所述bnac04.bzip16蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示，鹽脅迫環(huán)境中生長可增加植物中bnac04.bzip16蛋白的表達量。
23、第五方面，本專利技術提供甘藍型油菜
bnac04.bzip16基因、或其編碼的蛋白、或含有該基因的生物材料、或上述提高植物耐鹽性的方法在植物育種中的應用；
24、所述甘藍型油菜
bnac04.bzip16基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；或
25、所述蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示；
26、所述生物材料為重組dna、表達盒、轉座子、質粒載體、病毒載體、工程菌或非可再生的植物細胞或組織。
27、優(yōu)選地，所述在植物育種中的應用，為在培育高耐鹽性植物或培育高鹽土壤環(huán)境下生長的植物中的應用。
28、第六方面，本專利技術提供甘藍型油菜
bnac04.bzip16基因、或其編碼的蛋白、或含有該基因的生物材料、或上述提高植物耐鹽性的方法在提高植物在鹽脅迫環(huán)境下鮮重的應用；
29、所述甘藍型油菜
bnac04.bzip16基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；或
30、所述蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
31、所述生物材料為重組dna、表達盒、轉座子、質粒載體、病毒載體、工程菌或非可再生的植物細胞或組織。
32、第七方面，本專利技術提供甘藍型油菜
本文檔來自技高網(wǎng)
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【技術保護點】
1.一種甘藍型油菜BnaC04.bZIP16蛋白在提高植物耐鹽性中的應用，其特征在于，所述BnaC04.bZIP16蛋白的氨基酸序列為以下至少一種：
2.一種甘藍型油菜BnaC04.bZIP16基因在提高植物耐鹽性中的應用，其特征在于，所述BnaC04.bZIP16基因的核苷酸序列為以下至少一種：
3.一種提高植物耐鹽性的方法，其特征在于，增加BnaC04.bZIP16基因在植物中的表達量，其方法包括但不限于：
4.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于，將含有BnaC04.bZIP16基因的質粒轉化至植物中，加代繁種至純合。
5.一種提高植物中BnaC04.bZIP16蛋白表達量的方法，其特征在于，將相應植物放在鹽脅迫環(huán)境中生長，所述BnaC04.bZIP16蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。
6.一種甘藍型油菜BnaC04.bZIP16基因、或其編碼的蛋白、或含有該基因的生物材料、或權利要求3-5任一項所述的方法在植物育種中的應用；
7.根據(jù)權利要求6所述的應用，其特征在于，所述植物育種中的應用為培育高耐鹽性植物或培育高鹽土壤環(huán)境下生長的植物。
8.一種甘藍型油菜BnaC04.bZIP16基因、或其編碼的蛋白、或含有該基因的生物材料、或權利要求3-5任一項所述的方法在提高植物在鹽脅迫環(huán)境下植物鮮重中的應用；
9.一種甘藍型油菜BnaC04.bZIP16基因、或其編碼的蛋白、或含有該基因的生物材料、或權利要求3-5任一項所述的方法在植物種質資源遺傳改良中的應用；
10.根據(jù)權利要求1-2，6-9任一項所述的應用或權利要求3-5任一所述的方法，其特征在于，所述的植物為甘藍型油菜。
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【技術特征摘要】
1.一種甘藍型油菜bnac04.bzip16蛋白在提高植物耐鹽性中的應用，其特征在于，所述bnac04.bzip16蛋白的氨基酸序列為以下至少一種：
2.一種甘藍型油菜bnac04.bzip16基因在提高植物耐鹽性中的應用，其特征在于，所述bnac04.bzip16基因的核苷酸序列為以下至少一種：
3.一種提高植物耐鹽性的方法，其特征在于，增加bnac04.bzip16基因在植物中的表達量，其方法包括但不限于：
4.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于，將含有bnac04.bzip16基因的質粒轉化至植物中，加代繁種至純合。
5.一種提高植物中bnac04.bzip16蛋白表達量的方法，其特征在于，將相應植物放在鹽脅迫環(huán)境中生長，所述bnac04.bzip16蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：范成明，惠偉，趙麗麗，郭徐鵬，陳宇紅，胡贊民，
申請(專利權)人：中國科學院遺傳與發(fā)育生物學研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：
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