【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及i型人膠原蛋白，具體涉及重組i型人膠原蛋白、水凝膠及在制備醫美填充劑中的應用。
技術介紹
1、ⅰ型膠原蛋白是組成真皮中膠原纖維的唯一成分，在皮膚中的占比為80％以上；是真皮結締組織中最為豐富的成分。ⅰ型膠原蛋白是一種異源三聚體分子，每條鏈由1000多個氨基酸組成，i型膠原分子的長度約為300nm，寬度約為1-5nm，膠原三聚體有很高的抗拉強度。在大多數情況下，由兩條α1鏈和一條α2鏈組成，而α1同源三聚體以次要形式存在。
2、i型膠原蛋白為生物體提供了一種機械支撐作用，維護器官與組織的完整性，保障其正常功能的行使，這對于實質性器官而言非常重要。i型膠原蛋白是實質性器官一一基底膜的主要成分，在骨骼中超過80％的有機質就是i型膠原蛋白，i型膠原蛋白在骨骼與結締組織中發揮作用的主要方式是形成和保持骨架的完整性；除此之外，i型膠原在形成特定的細胞外微環境中也起到主要作用，而這些微環境對于維持細胞的完整性及傳遞細胞外信號非常關鍵作用。
3、i型膠原蛋白在醫學中的最初應用可以追溯到公元175年，galen醫生首次將膠原蛋白作為可吸收的腸衣縫合線使用。隨著工藝改進和修飾技術的發展，將膠原蛋白制成止血粉劑、燒傷敷料、藥物載體、心臟辦膜、血管、管和氣管等替代材料、外科縫合線等，配合各種用途使用，在臨床醫學上展現良好的應用前景。型膠原蛋白在醫藥、化妝品、食品等行業中也具有很廣泛的用途。
技術實現思路
1、有鑒于此，本專利技術提供了一種重組i型人膠原蛋白、水凝膠及在
2、本專利技術目的之一提供一種重組i型人膠原蛋白的制備方法，包括：
3、配制相同濃度的人ⅰ型前膠原氨基端肽的溶液和交聯肽的溶液，所述人ⅰ型前膠原氨基端肽如seq?id?no.1所示，所述交聯肽如seq?id?no.2所示；
4、將所述人ⅰ型前膠原氨基端肽的溶液與所述交聯肽的溶液以(1～2):(1～4)的體積比混合；
5、添加谷氨酰胺酶5～40u/g蛋白質；
6、充分混勻后，置于50℃反應0.5～6h；
7、反應結束后，取出樣品，置于沸水浴中滅酶，冷卻至室溫；
8、調節溶液ph調至4.6，使修飾產物沉淀并除去未混合交聯的交聯肽，10000×g離心15min，棄去上清液；
9、用ph?4.6的水清洗沉淀，所得沉淀為重組i型人膠原蛋白。
10、具體地，所述人ⅰ型前膠原氨基端肽的溶液與所述交聯肽的溶液以1:1、1:2、1:3、1:4或2:1的體積比混合。
11、具體地，所述谷氨酰胺酶的添加量為5u/g、10u/g、20u/g、30u/g或40u/g蛋白質。
12、具體地，所述反應時間為0.5h、1h、2h、4h或6h。
13、本專利技術目的之一提供一種復合水凝膠的制備方法，包括：
14、于0℃的冰浴下，配制含50g/l?1,5-二氮雜雙環[4.3.0]-5-壬烯和50g/l乙酰丙酸的離子液體；
15、于100℃油浴鍋機械攪拌下，向所述離子液體中同時加入納米纖維素和上述的制備方法制得的重組i型人膠原蛋白中，快速攪拌混合物，充分溶解；
16、取反應物置于培養皿中，常溫下靜置1d，再使用無水乙醇反復清洗。
17、具體地，所述納米纖維素的終濃度為1.25g/l，所述重組i型人膠原蛋白的終濃度為1.25g/l。
18、具體地，所述納米纖維素的直徑為4～10nm，長度為200nm。
19、本專利技術目的之一提供所述的方法制得的重組i型膠原蛋白。
20、本專利技術目的之一提供所述的方法制得的重組i型膠原蛋白在制備皮膚組織修復材料中的應用。
21、本專利技術目的之一提供所述的方法制得的重組i型膠原蛋白在制備生物學填充材料中的應用。
22、有益效果：
23、通過本專利技術提供的方法制得了一種重組i型人膠原蛋白，其具有高含量的異肽健。通過將這種高含量異肽健的重組i型人膠原蛋白與納米纖維素制備成為復合水凝膠，具有高度穩定型，低溶脹，高保重率，并且具有強的黏附力和止血能力，具有做皮膚組織修復材料的潛力。并且這種復合水凝膠能夠用于燒傷皮膚的修復，顯著降低燒傷皮膚的炎癥反應，促進傷口愈合。另外，這種復合水凝膠還能作為填充物或抑制物填充于小鼠體內，具有較低的炎癥反應，并且能夠促進小鼠體內膠原合成，長期作用促進血管和骨細胞生成，進而促進組織新生，為其作為醫美填充材料提供了技術基礎。
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1.一種重組I型人膠原蛋白，其特征在于，由如下方法制備而成：
2.根據權利要求1所述的重組I型人膠原蛋白，其特征在于，所述谷氨酰胺酶的添加量為5U/g、10U/g、20U/g、30U/g或40U/g蛋白質。
3.根據權利要求2所述的重組I型人膠原蛋白，其特征在于，所述反應時間為0.5h、1h、2h、4h或6h。
4.一種重組I型人膠原蛋白復合水凝膠的制備方法，其特征在于，包括：
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述納米纖維素的終濃度為1.25g/L，所述重組I型人膠原蛋白的終濃度為1.25g/L。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述納米纖維素的直徑為4～10nm，長度為200nm。
7.權利要求4-6任一項所述的方法制得的重組I型人膠原蛋白復合水凝膠。
8.權利要求1-3任一項所述的重組I型人膠原蛋白或權利要求7所述的重組I型人膠原蛋白復合水凝膠在制備皮膚組織修復材料中的應用。
9.權利要求1-3任一項所述的重組I型人膠原蛋白或權利要求7所述的重組I型人膠
...【技術特征摘要】
1.一種重組i型人膠原蛋白，其特征在于，由如下方法制備而成：
2.根據權利要求1所述的重組i型人膠原蛋白，其特征在于，所述谷氨酰胺酶的添加量為5u/g、10u/g、20u/g、30u/g或40u/g蛋白質。
3.根據權利要求2所述的重組i型人膠原蛋白，其特征在于，所述反應時間為0.5h、1h、2h、4h或6h。
4.一種重組i型人膠原蛋白復合水凝膠的制備方法，其特征在于，包括：
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述納米纖維素的終濃度為1.25g/l，所述...
【專利技術屬性】
技術研發人員：請求不公布姓名，
申請(專利權)人：杏林醫學科技江蘇有限公司，
類型：發明
國別省市：
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