【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于功能多肽，具體涉及一種從法氏囊中分離的四肽及其在免疫調(diào)節(jié)中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、法氏囊(bursa?of?fabricius，bf)是貼附于禽類泄殖腔背側(cè)肛道區(qū)的一個不太明顯的囊狀結(jié)構(gòu)。法氏囊(bursa?of?fabricus,bf)最早于1621年由意大利解剖學(xué)家hieronymus?fabricius發(fā)現(xiàn)，由此而得名。最初，法布里修斯推測，空心結(jié)構(gòu)的法氏囊很有可能是作為貯存精液的容器。然而事實并非如此，數(shù)百年里，法氏囊的功能一直困擾著眾多科研人員。由于法氏囊隨著性成熟而退化，其大小與精巢和腎上腺之間呈負相關(guān)關(guān)系，因而有研究人員推測，bf一定是與生長和性發(fā)育有關(guān)的某種內(nèi)分泌腺或淋巴腺。早在1956年，glick等意外發(fā)現(xiàn)去除法氏囊能減少雛禽沙門氏菌o型抗原的抗體產(chǎn)生，卻一度沒有引起眾人的注意。多年后這項工作的重要意義才被正確的對待，并且主流免疫學(xué)家也對雞的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生了極大的興趣。人們最終達成共識法氏囊是抗體(介導(dǎo))免疫所必需的器官，而同樣隨著性發(fā)育不斷退化的胸腺則是細胞(介導(dǎo))免疫所必需的器官。現(xiàn)在，法氏囊被確認為體液中樞免疫器官，它由一根導(dǎo)管連接并貼附于禽類肛道，是b淋巴細胞發(fā)育分化和成熟的場所，分化完全的b淋巴細胞由bf轉(zhuǎn)移至外周淋巴器官生活、繁衍，并主導(dǎo)著免疫功能，因而是b淋巴細胞(囊來源淋巴細胞)和禽類抗體譜發(fā)生所必需的。
2、bf是b細胞誘導(dǎo)分化和成熟的場所。淋巴干細胞(b淋巴細胞前體)從骨髓到bf，成熟的b細胞在此處誘導(dǎo)分化，參與免疫反應(yīng)通過血液循環(huán)和淋巴循環(huán)轉(zhuǎn)移到各個外周淋巴器官。
3、1976年baba等發(fā)現(xiàn)bf粗提物物可以讓胚胎期去除bf的雛雞bf復(fù)生,也能恢復(fù)誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫球蛋白特異性抗體。1977年baba等又報道了法氏囊提取液可恢復(fù)丙酸睪酮(tp)對法氏囊的發(fā)育抑制，促使雞的抗體水平提高并使抗體由igm向igg轉(zhuǎn)化。1976年，brand等發(fā)現(xiàn)雛雞骨髓細胞被bf提取液誘導(dǎo)表達抗原，促進早期細胞表達抗原的因子，而且囊提取液濃度與誘導(dǎo)細胞分化的能力成負相關(guān)。1982年，eerol等報道了體外培養(yǎng)的bf上皮細胞和其不含血清培養(yǎng)上清具備增強淋巴細胞分化的能力。此外,繆德年等分析bf提取物采用薄層層析法，發(fā)現(xiàn)bf提取物中有囊素和另外不少于8種不同肽類或著氨基酸成分。近年來，隨著對法氏囊活性肽的不斷研究，一些結(jié)構(gòu)和功能明確的活性肽被不斷地發(fā)現(xiàn)。
4、法氏囊抗類固醇肽(bursal?anti-steroidogenic?peptide，basp)是另一個研究眾多的法氏囊活性肽。體液免疫系統(tǒng)可能反饋調(diào)節(jié)新生兒的丘腦-垂體-性腺軸。byrd等研究了來源于青春期前的雞的法氏囊提取物的酸性溶液在體外對分離于最大的雞卵巢排卵前卵泡的顆粒細胞basal和lh-刺激的孕激素生物合成的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，3～5kda的粗提物顯著抑制lh-刺激的孕激素分泌(p<0.05)。采用反向高效液相技術(shù)，部分純化得到了一個法氏囊活性組分，在體外具有抑制類固醇肽的能力。該組分抑制lh-刺激的孕激素的生物合成，最大程度可抑制約79％。去掉該肽后，顆粒細胞具有l(wèi)h-刺激的孕激素生物合成的能力與對照細胞類似；而且法氏囊提取物明顯抑制camp類似物刺激的孕激素的生物合成。這些數(shù)據(jù)意味著來源于雞法氏囊的抗類固醇多肽是一種單一的熱不穩(wěn)定的、n端封閉的肽，具有顆粒細胞的生物活性(顆粒細胞不依賴促性腺激素受體)。
5、研究法氏囊活性肽已經(jīng)取得一定的進展，但目前而言對法氏囊活性肽的認知還是較為膚淺，關(guān)于它們的生物學(xué)特性及功能等方面還有很多待解決的方面，尤其是對已知的法氏囊活性肽的應(yīng)用幾乎是空白，還需深一步的研究。法氏囊是目前世界上唯一一個公認的中樞體液免疫器官。由于法氏囊重要的免疫調(diào)節(jié)活性以及法氏囊提取物具有廣泛的生物學(xué)活性。因此，研究法氏囊的活性物質(zhì)擁有相當寬闊的領(lǐng)域和廣泛的實際應(yīng)用意義。在疾病診斷和治療中，胸腺活性物已經(jīng)起到舉足輕重的地位了，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于肝炎(乙肝、丙肝等)、腫瘤(癌癥)的臨床治療和免疫缺陷等的研究中。不過，隨著對法氏囊活性肽的功能及作用機理的深入研究和不斷的臨床和實際應(yīng)用方面的試驗，不久的將來，一些法氏囊活性肽會同胸腺素一樣廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)和生產(chǎn)實踐。因此法氏囊活性肽具有廣泛的應(yīng)用前景，如免疫調(diào)節(jié)、免疫治療等領(lǐng)域。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的是提供一種從法氏囊中分離的四肽及其在免疫調(diào)節(jié)中的應(yīng)用，即一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的，從法氏囊中分離的四肽，及其在提高動物的免疫能力，提高疫苗的免疫效果及調(diào)節(jié)b細胞分化中的應(yīng)用。
2、本專利技術(shù)首先提供一種多肽，包括有：
3、1)氨基酸序列為vvmk(seq?id?no：1)的多肽；
4、2)在1)中的氨基酸中取代、缺失或添加一個或幾個氨基酸，由1)衍生的，且具有1)中多肽功能的多肽。
5、上述的多肽用于制備提高動物免疫力的疫苗或輔助制劑；
6、作為實施例的一種優(yōu)選，上述的多肽用于制備抗體；
7、作為實施例的一種優(yōu)選，上述的多肽還用于制備促進b細胞增殖和/或分化的制品。
8、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有的優(yōu)點及意義如下：
9、1、從法氏囊中發(fā)現(xiàn)一種新的四肽，分子量為529.7(m/z)，氨基酸序列為vvmk，該四肽是第一次從禽類的中樞體液免疫器官法氏囊中分離出來，從而說明法氏囊中存在多種活性分子，且可能發(fā)揮不同的免疫調(diào)節(jié)作用。
10、2、在實驗動物體內(nèi)具有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用。利用上述的法氏囊四肽，可驗證其對抗體的免疫調(diào)節(jié)作用。按照動物體重，每只使用0.8-20μg，與aiv疫苗混勻，注射免疫動物。其特征在于：活性肽在20μg/只時，按疫苗推薦劑量用于動物，活性肽效果更好。法氏囊四肽不僅對體液免疫具有誘導(dǎo)效應(yīng)(如調(diào)節(jié)抗體本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
1.一種多肽，其特征在于，所述的多肽包含有：
2.如權(quán)利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽是從法氏囊中分離的。
3.權(quán)利要求1所述的多肽在制備提高動物免疫力的疫苗或免疫增強劑中的應(yīng)用。
4.一種疫苗，其特征在于，所述的疫苗是以權(quán)利要求1所述的多肽作為抗原制備的。
5.權(quán)利要求1所述的多肽在制備抗體中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1所述的多肽在制備促進B細胞增殖和/或分化的制品中的應(yīng)用。
7.一種促進B細胞增殖和/或分化的制品，其特征在于，所述的制品包含有藥理有效濃度的權(quán)利要求1所述的多肽。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種多肽，其特征在于，所述的多肽包含有：
2.如權(quán)利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽是從法氏囊中分離的。
3.權(quán)利要求1所述的多肽在制備提高動物免疫力的疫苗或免疫增強劑中的應(yīng)用。
4.一種疫苗，其特征在于，所述的疫苗是以權(quán)利要求1所述的...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：劉曉東，別俊宏，馬曉菡，紀奕猛，李曉奇，母佳豪，
申請(專利權(quán))人：青島農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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