【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物，特別涉及一種重組細胞及其制備方法和應用。
技術介紹
1、mrc1蛋白指甘露糖受體c1（mannose?receptor?c?type?1），也被稱為cd206。這是一種跨膜蛋白，相對分子質量約為166?kda，在免疫系統中扮演著重要角色。mrc1主要分布在巨噬細胞和未成熟的樹突狀細胞的表面，作為模式識別受體（prr），它可以識別病原體表面的特定糖基結構，如甘露糖殘基或硫酸化的碳水化合物。
2、目前，mrc1蛋白的獲取途徑是通過選擇適當的宿主細胞進行表達純化后得到，然而常規的宿主細胞對mrc1蛋白的表達水平偏低，合成的蛋白純度、活度均較低。
技術實現思路
1、本專利技術的主要目的是提出一種重組細胞及其制備方法和應用，旨在提供一種穩定表達mrc1蛋白的重組細胞。
2、為實現上述目的，本專利技術提出一種重組細胞的制備方法，包括：
3、s10.合成mrc1基因序列，將mrc1基因序列克隆至質粒骨架中，得重組表達載體，其中，所述mrc1基因序列如seq?id?no.1所示；
4、s20.將所述重組表達載體轉染宿主細胞，得轉染細胞，其中，所述宿主細胞包括cho-k1細胞；
5、s30.將轉染細胞傳代培養，得重組細胞。
6、在一實施例中，步驟s20包括：
7、將馴化宿主細胞單克隆分選并擴增，將所述重組表達載體轉染擴增后的馴化宿主細胞，得轉染細胞。
8、在一實施例中，步驟s30中，轉
9、在一實施例中，步驟s30中，傳代培養時采用培養基a進行培養。
10、本專利技術還提出一種重組細胞，所述重組細胞包括按如前述的重組細胞的制備方法所制備得到的重組細胞。
11、本專利技術還提出一種重組細胞在合成mrc1蛋白中的應用，所述重組細胞包括如前述的重組細胞。
12、本專利技術的技術方案中，通過將mrc1基因序列構建為重組表達載體，再轉染至宿主細胞中，可在宿主細胞體內穩定表達，合成mrc1蛋白；通過采用cho-k1細胞作為宿主細胞，能夠高效地表達外源基因，且能夠進行復雜的后翻譯修飾，如糖基化、磷酸化等，進而改善蛋白質的穩定性及活性；通過將重組表達載體轉染至cho-k1細胞中，可將外源基因穩定整合到cho-k1細胞的基因組中，形成穩定表達細胞株，確保長期表達的一致性和可靠性，有利于批量擴增表達mrc1蛋白的細胞。
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1.一種重組細胞的制備方法，其特征在于，包括：
2.如權利要求1所述的重組細胞的制備方法，其特征在于，步驟S20包括：
3.如權利要求1所述的重組細胞的制備方法，其特征在于，步驟S30中，轉染細胞的方法為電穿孔法。
4.如權利要求1所述的重組細胞的制備方法，其特征在于，步驟S30中，傳代培養時采用培養基A進行培養，所述培養基A包括CD?CHO?AGT培養基、L-谷氨酰胺及HT補充液。
5.一種重組細胞，其特征在于，所述重組細胞包括按如權利要求1至4任一項所述的重組細胞的制備方法所制備得到的重組細胞。
6.一種重組細胞在合成MRC1蛋白中的應用，其特征在于，所述重組細胞包括如權利要求5所述的重組細胞。
【技術特征摘要】
1.一種重組細胞的制備方法，其特征在于，包括：
2.如權利要求1所述的重組細胞的制備方法，其特征在于，步驟s20包括：
3.如權利要求1所述的重組細胞的制備方法，其特征在于，步驟s30中，轉染細胞的方法為電穿孔法。
4.如權利要求1所述的重組細胞的制備方法，其特征在于，步驟s30中，傳代培養時采用...
【專利技術屬性】
技術研發人員：薛群，趙元曦，張春英，寇天賜，沈菊平，
申請(專利權)人：北海康成蘇州生物制藥有限公司，
類型：發明
國別省市：
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