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    一種JL轉座酶單克隆抗體及其檢測試劑盒制造技術
    
                            
    技術編號：44500813 閱讀：3 留言：0更新日期：2025-03-04 18:09
    
                        
    
                        
    
                            
                            本發明專利技術涉及一種JL轉座酶單克隆抗體及其檢測試劑盒。具體提供一種JL轉座酶結合分子，包含靶向JL轉座酶的抗體或其抗原結合片段，所述抗體含有本文所述的任一組CDR。本發明專利技術提供的檢測試劑盒，檢測特異性強，靈敏度高，穩定性好。
    
                            
                            
    


    
                            

                            
    【技術實現步驟摘要】
    
                                
    本專利技術涉及生物學領域；更具體而言，本專利技術涉及一種jl轉座酶單克隆抗體及其檢測試劑盒。

    技術介紹
    1、dna轉座子是一類能夠在基因組上可以自由跳躍(復制或移位)的可移動的dna序列，可以通過切割、重新整合等一系列過程從基因組的一個位置轉座到另一個位置。首先是由mc.clintock于20世紀40年代在玉米染色體中發現，以后又陸續在細菌、真菌及昆蟲等各種生物中發現。
    2、轉座子除了可以有效提高以顯微注射技術為基礎的轉基因動物的制備效率外，還可以用于基因治療。在基因治療中，轉座子介導基因轉移主要有安全、高效等優點。在過去十多年中，轉座子已發展成為基因治療中最常用的非病毒載體。除此之外，轉座子還可以制備突變體，開展基因捕獲，應用于功能基因組學研究。該技術近年來在人類基因治療、鼠和斑馬魚等模式動物的轉基因制備和功能基因組學研究上已經取得重要的進展。
    3、tc1/mariner轉座子是自然界中分布最廣泛的一類dna轉座子超家族，包括細菌、無脊柱動物和脊椎動物。在脊椎動物中，tc1/mariner轉座子在硬骨魚類中分布最為廣泛。在先申請披露了一種獨特的轉座催化結構域“d35d”的ps轉座子，屬于pogo轉座子超家族，其可以在哺乳動物細胞中表現出一定的轉座活性和剪切活性。雖然上述ps轉座子系統已經具備一定的轉基因應用價值，但是因為ps轉座酶序列為野生型天然氨基酸序列，所以其轉座效率較低。cn202310081106.8公開了對ps轉座子系統進行氨基酸/dna突變和/或工程化改造，獲得一種jl轉座子系統。
    <p>4、在使用jl轉座子系統進行基因寫入過程中，會殘留jl轉座酶，需要提供一種jl轉座酶的檢測方法，用于質量控制。

    技術實現思路
    1、基于上述現有技術中存在的問題，本申請提供了一種jl轉座酶的單克隆抗體，包含該抗體的一種基于elisa方法研制的檢測試劑盒，并利用該試劑盒成功完成了jl轉座酶的定量檢測。
    2、本專利技術第一方面提供一種jl轉座酶結合分子，其為靶向jl轉座酶的抗體或其抗原結合片段，或與所述抗體或其抗原結合片段具有至少85％序列相同性并保留其jl轉座酶結合活性的變體。
    3、在一個或多個實施方案中，所述抗體含有選自以下的任一組cdr：
    4、(a1)seq?id?no:1所示的hcdr1、seq?id?no:2所示的hcdr2、seq?id?no:3所示的hcdr3和seq?id?no:16所示的lcdr1、seq?id?no:17所示的lcdr2、seq?id?no:18所示的lcdr3；
    5、(a2)所述抗體含有：seq?id?no:4所示的hcdr1、seq?id?no:5所示的hcdr2、seq?idno:6所示的hcdr3和seq?id?no:19所示的lcdr1、seq?id?no:20所示的lcdr2、seq?id?no:21所示的lcdr3；
    6、(a3)所述抗體含有：seq?id?no:7所示的hcdr1、seq?id?no:8所示的hcdr2、seq?idno:9所示的hcdr3和seq?id?no:22所示的lcdr1、seq?id?no:23所示的lcdr2、seq?id?no:24所示的lcdr3；
    7、(a4)所述抗體含有：seq?id?no:10所示的hcdr1、seq?id?no:11所示的hcdr2、seqid?no:12所示的hcdr3和seq?id?no:25所示的lcdr1、seq?id?no:26所示的lcdr2、seq?idno:27所示的lcdr3；
    8、(a5)所述抗體含有：seq?id?no:13所示的hcdr1、seq?id?no:14所示的hcdr2、seqid?no:15所示的hcdr3和seq?id?no:28所示的lcdr1、seq?id?no:29所示的lcdr2、seq?idno:30所示的lcdr3。
    9、在一個或多個實施方案中，所述抗體的輕鏈可變區包含鼠源或人源輕鏈fr區。在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈可變區包含鼠源或人源重鏈fr區。
    10、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈可變區的fr1、fr2、fr3和fr4各自分別獨立選自seq?id?no:33、35、37、39、41中任一序列所示的重鏈可變區的fr1、fr2、fr3和fr4，和/或，所述抗體的輕鏈可變區的fr1、fr2、fr3和fr4各自分別獨立選自seq?id?no:34、36、38、40、42中任一序列所示的輕鏈可變區的fr1、fr2、fr3和fr4。
    11、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈可變區具有seq?id?no:33所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列，和/或，所述抗體的輕鏈可變區具有seq?id?no:34所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列。
    12、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈可變區具有seq?id?no:35所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列，和/或，所述抗體的輕鏈可變區具有seq?id?no:36所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列。
    13、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈可變區具有seq?id?no:37所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列，和/或，所述抗體的輕鏈可變區具有seq?id?no:38所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列。
    14、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈可變區具有seq?id?no:39所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列，和/或，所述抗體的輕鏈可變區具有seq?id?no:40所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列。
    15、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈可變區具有seq?id?no:41所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列，和/或，所述抗體的輕鏈可變區具有seq?id?no:42所示的序列或與其具有至少85％序列相同性的序列。
    16、在一個或多個實施方案中，所述抗體還包含重鏈恒定區和/或輕鏈恒定區。
    17、在一個或多個實施方案中，所述抗體還包括鼠igg?fc段、兔igg?fc段或人igg?fc段。
    18、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈包含人源igg1、igg2、igg3或igg4的重鏈恒定區或與其具有至少85％序列相同性的序列。或者或此外，所述抗體的輕鏈包含人源κ鏈、λ鏈的輕鏈恒定區或與其具有至少85％序列相同性的序列。
    19、在一個或多個實施方案中，所述抗體的重鏈包含人源igg1的重鏈恒定區或與其具有至少85％序列相同性的序列，輕鏈包含人源κ鏈的輕鏈恒定區或與其具有至少85％序列相同性的序列。
    20、在一個或多個實施方案中，所述抗體是多特異性抗體，優選雙特異性抗體。
    21、在一個或多個實施方案中，所述抗體是單克隆抗體。
    22、在一本文檔來自技高網...
                            
    
                            
    【技術保護點】
    
                                
    1.一種JL轉座酶結合分子，包含靶向JL轉座酶的抗體或其抗原結合片段，所述抗體含有選自以下的任一組CDR：
    2.如權利要求1所述的JL轉座酶結合分子，其特征在于，
    3.如權利要求1所述的JL轉座酶結合分子，其特征在于，所述JL轉座酶結合分子還包括鼠IgG?Fc段、兔IgG?Fc段或人IgG?Fc段。
    4.一種JL轉座酶結合分子對，其中第一JL轉座酶結合分子如權利要求1-3中任一所述，第二JL轉座酶結合分子如權利要求1-3中任一所述，且第一JL轉座酶結合分子與第二JL轉座酶結合分子的CDR組不同，
    5.如權利要求4所述的JL轉座酶結合分子對，其特征在于，第一JL轉座酶結合分子包含：SEQ?ID?NO:33所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:34所示的輕鏈可變區，SEQ?ID?NO:35所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:36所示的輕鏈可變區，SEQ?ID?NO:37所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:38所示的輕鏈可變區，SEQ?ID?NO:39所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:40所示的輕鏈可變區，或SEQ?ID?NO:41所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:42所示的輕鏈可變區；第二JL轉座酶結合分子包含：SEQ?ID?NO:33所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:34所示的輕鏈可變區，SEQ?ID?NO:37所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:38所示的輕鏈可變區，或SEQ?ID?NO:39所示的重鏈可變區和SEQ?ID?NO:40所示的輕鏈可變區，且第一JL轉座酶結合分子與第二JL轉座酶結合分子具有不同的重鏈可變區和輕鏈可變區，
    6.如權利要求4所述的JL轉座酶結合分子對，其特征在于，所述第二JL轉座酶結合分子還包含標記物，
    7.一種檢測JL轉座酶的試劑盒，包含權利要求1-3任一項所述的JL轉座酶結合分子或權利要求4-6中任一項所述的JL轉座酶結合分子對，
    8.如權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述JL轉座酶結合分子用于夾心法檢測，所述試劑盒包含所述JL轉座酶結合分子對，
    9.如權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括包被有第一JL轉座酶結合分子的反應板、生物素標記的第二JL轉座酶結合分子、親和素標記的催化酶以及底物，
    10.一種檢測樣品中JL轉座酶存在情況的非診斷性方法，所述方法包括：以權利要求1-3中任一項所述JL轉座酶結合分子或權利要求4-6中任一項所述JL轉座酶結合分子對與樣品孵育，和檢測JL轉座酶與JL轉座酶結合分子或JL轉座酶結合分子對的結合，從而確定樣品中JL轉座酶存在情況。
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    【技術特征摘要】
    
                                
    1.一種jl轉座酶結合分子，包含靶向jl轉座酶的抗體或其抗原結合片段，所述抗體含有選自以下的任一組cdr：
    2.如權利要求1所述的jl轉座酶結合分子，其特征在于，
    3.如權利要求1所述的jl轉座酶結合分子，其特征在于，所述jl轉座酶結合分子還包括鼠igg?fc段、兔igg?fc段或人igg?fc段。
    4.一種jl轉座酶結合分子對，其中第一jl轉座酶結合分子如權利要求1-3中任一所述，第二jl轉座酶結合分子如權利要求1-3中任一所述，且第一jl轉座酶結合分子與第二jl轉座酶結合分子的cdr組不同，
    5.如權利要求4所述的jl轉座酶結合分子對，其特征在于，第一jl轉座酶結合分子包含：seq?id?no:33所示的重鏈可變區和seq?id?no:34所示的輕鏈可變區，seq?id?no:35所示的重鏈可變區和seq?id?no:36所示的輕鏈可變區，seq?id?no:37所示的重鏈可變區和seq?id?no:38所示的輕鏈可變區，seq?id?no:39所示的重鏈可變區和seq?id?no:40所示的輕鏈可變區，或seq?id?no:41所示的重鏈可變區和seq?id?no:42所示的輕鏈可變區；第二jl轉座酶結合分子包含：seq?id?no:33所示的重鏈可變區和seq?i...
                            
    
                            
    【專利技術屬性】
    
                                技術研發人員：張平靜，王聰聰，高海霞，劉韜，孫艷，錢其軍，
    
        申請(專利權)人：上海吉量醫藥工程有限公司，
    
        類型：發明
    
        國別省市：
    
                            
    
                            
                        
    
                    
    
                    
                    
                     
                
    
                
                
    
                    
    
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