【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于微生物煙用香料，具體涉及一種生物紅棗香料的菌種、制備方法及其應用。
技術介紹
1、當前，全球香精與香料的生產主要依賴于兩大來源：人工合成與天然動植物提取。然而，這兩種方式均存在各自的局限性。一方面，人工合成香料通過化學方法制造出來的，方法高效但產物的安全性常受公眾質疑，化學合成過程中可能使用的有害原料和副產物，以及長期接觸或攝入這些化學香料可能對人體健康產生的潛在風險，都是導致公眾對其安全性擔憂的原因。另一方面，天然香料來源于動植物，提取過程相對復雜且效率較低，由于提取工藝局限，獲得香料往往難以達到應用標準，這不僅限制了天然香料的使用范圍，還可能導致對環境資源的浪費。
2、利用微生物發酵技術制備香精香料，一方面利用微生物的代謝作用，過程相對綠色環保，能有效降低對人體健康的潛在風險，另一方面生物發酵可以通過優化菌種和發酵條件，實現高效生產，提高香料的產量，生產出具有特定香氣和特性的香料，滿足不同市場需求。現有技術中，還沒有枯草芽孢桿菌發酵紅棗煙用香料出現，更沒有將其添加到卷煙中應用的報道。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種生物紅棗香料的菌種、制備方法及其應用，以滿足當下對紅棗香料的高品質需求。
2、為實現上述目的，本申請是通過以下技術方案實現的：
3、一種生物紅棗香料的菌種，為一種枯草芽孢桿菌，所述枯草芽孢桿菌的分類命名為bacillus?subtilis，菌株名為hs-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心
4、進一步的，所述枯草芽孢桿菌hs-1在lb固體培養基平板上表現為菌落呈不透明污白色，表面粗糙有褶皺，邊緣擴張，菌落形狀為不規則圓形。
5、進一步的，所述枯草芽孢桿菌的培養方法為：將枯草芽孢桿菌液按1%的接種量，接種至lb液體培養基中，培養條件：溫度30℃，轉速150?rpm，培養時間12?h。
6、進一步的，所述lb液體培養基配方為：蛋白胨10?g/l，氯化鈉10?g/l，酵母粉5?g/l，lb固體培養基配方為：蛋白胨10?g/l，氯化鈉10?g/l，酵母粉5?g/l，瓊脂20?g/l。
7、進一步的，利用上述任一項的菌種制備微生物菌劑的方法，包括以下步驟：
8、（1）枯草芽孢桿菌活化液制備：
9、在30℃、150?r/min的條件下對枯草芽孢桿菌進行活化培養，震蕩培養12?h后獲得枯草芽孢桿菌活化液；
10、（2）單菌落培養：
11、將步驟（1）中所得枯草芽孢桿菌活化液十倍稀釋后，涂布至lb固體培養基，于30℃恒溫培養箱中培養48-72?h，直至觀察到清晰的枯草芽孢桿菌單菌落；
12、（3）種子液制備：
13、挑取步驟（2）所得枯草芽孢桿菌單菌落，接種至lb液體培養基，在30℃、150?r/min的條件下震蕩培養，至培養液od?600nm值達到0.8-1.0，得到種子液；
14、（4）微生物菌制劑制備：
15、將步驟（3）中所得的種子液高速離心，離心條件：4℃，10000?rpm/min，8?min，棄去上清液，等量無菌水復溶，重復上述離心操作后再次用等量無菌水復溶，最終得到微生物菌制劑。
16、一種生物紅棗香料的制備方法，利用上述的微生物菌劑，包括以下步驟：
17、s1、取微生物菌制劑，按處理菌量為1.85×108?-?2.83×108cfu/g?標準，將懸浮液接種至滅菌干紅棗汁中，隨后置于溫度30℃、轉速150?rpm?的搖床中發酵36?小時；
18、s2、將s1步驟中發酵完成的紅棗汁加入75%乙醇，加熱回流提取2h，之后真空抽濾分離出濾液和濾渣，濾渣中繼續加入75%乙醇，重復上述操作兩次，將三次所得濾液合并，靜置24?h后，取上層清液進行減壓濃縮，以獲得生物紅棗香料浸膏。
19、一種應用，上述制備的生物棗香料在卷煙中的應用。
20、進一步的，生物棗香料以卷煙煙絲質量百分比的0.05-0.1%添加到煙絲上。
21、本專利技術的有益效果是：
22、本申請利用枯草芽孢桿菌發酵制備生物紅棗香料，通過微生物發酵作用，提高紅棗香料的香氣，感官評價及gc-ms分析結果都顯示較好，通過卷煙加香感官評價后發現，烤甜香、果香、甜香增加，煙氣更加柔和細膩；gc-ms分析香味成分后發現異戊醇、乙酸十八酯等香味物質含量提高，并生成了苯乙醇、乙酸異戊酯、3-羥基-2-丁酮、乙酸苯乙酯等新的香味物質。
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1.一種生物紅棗香料的菌種，其特征在于，為一種枯草芽孢桿菌，所述枯草芽孢桿菌的分類命名為Bacillus?subtilis，菌株名為hs-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為CGMCC?No.30676。
2.根據權利要求1所述的生物紅棗香料的菌種，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌在LB固體培養基平板上表現為菌落呈不透明污白色，表面粗糙有褶皺，邊緣擴張，菌落形狀為不規則圓形。
3.根據權利要求1所述的生物紅棗香料的菌種，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌的培養方法為：將枯草芽孢桿菌液按1%的接種量，接種至LB液體培養基中，培養條件：溫度30℃，轉速150?rpm，培養時間12?h。
4.根據權利要求3所述的生物紅棗香料的菌種，其特征在于，所述LB液體培養基配方為：蛋白胨10?g/L，氯化鈉10?g/L，酵母粉5?g/L，LB固體培養基配方為：蛋白胨10?g/L，氯化鈉10?g/L，酵母粉5?g/L，瓊脂20?g/L。
5.根據權利要求1所述的生物紅棗香料的菌種，其特征在于，利用上述權利要求1至4中任一項的菌種制備微生物
6.一種生物紅棗香料的制備方法，利用權利要求5所述的微生物菌劑，其特征在于，包括以下步驟：
7.一種應用，其特征在于，上述權利要求6制備的生物棗香料在卷煙中的應用。
8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，生物棗香料以卷煙煙絲質量百分比的0.05-0.1%添加到煙絲上。
...【技術特征摘要】
1.一種生物紅棗香料的菌種，其特征在于，為一種枯草芽孢桿菌，所述枯草芽孢桿菌的分類命名為bacillus?subtilis，菌株名為hs-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為cgmcc?no.30676。
2.根據權利要求1所述的生物紅棗香料的菌種，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌在lb固體培養基平板上表現為菌落呈不透明污白色，表面粗糙有褶皺，邊緣擴張，菌落形狀為不規則圓形。
3.根據權利要求1所述的生物紅棗香料的菌種，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌的培養方法為：將枯草芽孢桿菌液按1%的接種量，接種至lb液體培養基中，培養條件：溫度30℃，轉速150?rpm，培養時間12?h。
4.根據權利要求3所述的生...
【專利技術屬性】
技術研發人員：陳芝飛，李蕾，寧一博，王清福，席高磊，趙嘉鳴，臧翔宇，蘆昶彤，趙永振，王澤寧，楊柳依，陳浩洋，
申請(專利權)人：河南中煙工業有限責任公司，
類型：發明
國別省市：
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