【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及β-葡聚糖誘導巨噬細胞分泌的非炎性微囊泡在治療炎癥中的應用，涉及生物醫藥。
技術介紹
1、細胞外囊泡（extracelluar?vesicles，evs）是脂質包裹的生物納米顆粒，幾乎所有細胞都會分泌這種顆粒。ev有脂質雙層包圍的膜狀囊泡，ev可以根據其細胞蛋白標志物、大小和衍生物分為外泌體、微囊泡和凋亡體。微囊泡是活細胞分泌的直徑約100~1000?nm的ev，其內包含豐富的蛋白、脂質和核酸。近年來發現，微囊泡作為天然穩定的納米級囊泡，能夠穿透生物屏障，保護其內容物不被降解，并被受體細胞高效攝取，可以作為基因、藥物的載體，參與疾病治療。
2、巨噬細胞是是先天性免疫細胞，是機體免疫系統中的重要組成部分，在維持腹腔內環境穩態和抵御病原體入侵發揮重要的作用。在正常生理狀態下，腹腔巨噬細胞處于靜息狀態，它們具有強大的吞噬功能，可以清除腹腔內的凋亡細胞，細菌，真菌等其它異物。隨著研究的深入，人們發現腹腔巨噬細胞具有高度的異質性和可塑性。在不同的刺激條件下，它們可以極化為不同的表型，如經典激活的m1型和替代激活的m2型，發揮不同的功能。
3、glucan又稱β-葡聚糖，它是由葡萄糖分子通過糖苷鍵連接而成的多糖。它廣泛存在它們廣泛存在于自然界中，在微生物、植物和動物體內都有發現。在微生物領域，某些細菌和真菌能夠合成葡聚糖作為其細胞壁的重要組成部分，為細胞提供結構支持和保護。例如，酵母細胞壁中的b-葡聚糖具有獨特的結構和生物學活性。在植物中，葡聚糖也是常見的成分，如在谷物的細胞壁中，有助于維持植物細胞的形
技術實現思路
1、為了彌補現有技術的不足，本專利技術的目的在于提供一種β-葡聚糖誘導巨噬細胞分泌的非炎性微囊泡，及其在治療炎癥中的應用。
2、為了實現上述目的，本專利技術采用如下技術方案：
3、本專利技術第一方面提供了一種微囊泡，所述微囊泡是β-葡聚糖刺激巨噬細胞產生的。
4、進一步，所述微囊泡的尺寸范圍為50~400?nm。
5、進一步，所述微囊泡的表面標志物hsp70，tsg101，cd63，cd9，cd81為陽性。
6、進一步，所述巨噬細胞包括鼠源巨噬細胞、人源巨噬細胞。
7、進一步，所述人源巨噬細胞為原代巨噬細胞。
8、進一步，所述人源原代巨噬細胞包括外周血來源的巨噬細胞。
9、進一步，所述鼠源巨噬細胞包括永生化巨噬細胞、原代巨噬細胞。
10、進一步，所述鼠源永生化巨噬細胞包括thp-1細胞系、raw264.7細胞系、u937細胞系、j774a.1細胞系。
11、進一步，所述鼠源原代巨噬細胞包括多能干細胞來源的巨噬細胞、外周血來源的巨噬細胞、骨髓來源的巨噬細胞、腹腔來源的巨噬細胞、腫瘤來源的巨噬細胞。
12、進一步，所述巨噬細胞為j774a.1細胞系。
13、本專利技術第二方面提供了本專利技術第一方面所述的微囊泡制備的產品，所述產品包括：1）抑制巨噬細胞極化的產品；2）抑制細胞炎癥因子分泌的產品；3）減輕炎癥的產品。
14、進一步，所述產品包括藥物組合物、試劑盒。
15、進一步，所述抑制巨噬細胞極化包括抑制巨噬細胞m1極化。
16、進一步，所述抑制巨噬細胞極化為抑制巨噬細胞m1極化。
17、進一步，所述抑制巨噬細胞m1極化的表現包括：1）減少m1型巨噬細胞相關基因的轉錄；和/或2）減少細胞炎癥因子的分泌。
18、進一步，所述細胞炎癥因子包括tnf-α、il-6、inos、arg-1、cd206。
19、進一步，所述巨噬細胞包括鼠源巨噬細胞、人源巨噬細胞。
20、進一步，所述人源巨噬細胞為原代巨噬細胞。
21、進一步，所述人源原代巨噬細胞包括外周血來源的巨噬細胞。
22、進一步，所述鼠源巨噬細胞包括永生化巨噬細胞、原代巨噬細胞。
23、進一步，所述鼠源永生化巨噬細胞包括thp-1細胞系、raw264.7細胞系、u937細胞系、j774a.1細胞系。
24、進一步，所述鼠源原代巨噬細胞包括多能干細胞來源的巨噬細胞、外周血來源的巨噬細胞、骨髓來源的巨噬細胞、腹腔來源的巨噬細胞、腫瘤來源的巨噬細胞。
25、進一步，所述巨噬細胞為鼠源原代巨噬細胞。
26、進一步，所述巨噬細胞為腹腔來源的巨噬細胞。
27、進一步，所述藥物組合物還包括藥學上可接受的載體。
28、進一步，所述減輕炎癥的表現包括：1）減少巨噬細胞極化；和/或2）減少細胞炎癥因子的分泌。
29、進一步，所述細胞炎癥因子包括tnf-α、il-6、inos、arg-1、cd206。
30、本專利技術第三方面提供了本專利技術第一方面所述的微囊泡在制備本專利技術第二方面所述的產品，和/或在抑制巨噬細胞極化、抑制細胞炎癥因子分泌、減輕炎癥中的應用。
31、本專利技術第四方面提供了一種培養本專利技術第一方面所述的微囊泡的方法，所述方法包括將β-葡聚糖加入巨噬細胞的培養體系中。
32、進一步，所述巨噬細胞的培養體系包含10%胎牛血清、100u/ml青霉素、0.1mg/ml鏈霉素液體的dmem完全培養基。
33、進一步，所述β-葡聚糖或其可藥用鹽的作用時間為24小時。
34、本專利技術第五方面提供了一種抑制巨噬細胞極化、抑制細胞炎癥因子分泌或減輕炎癥的方法，所述方法包括將本專利技術第一方面所述的微囊泡加入巨噬細胞的培養體系中。
35、進一步，所述巨噬細胞包括鼠源巨噬細胞、人源巨噬細胞。
36、進一步，所述人源巨噬細胞為原代巨噬細胞。
37、進一步，所述人源原代巨噬細胞包括外周血來源的巨噬細胞。
38、進一步，所述鼠源巨噬細胞包括永生化巨噬細胞、原代巨噬細胞。
39、進一步，所述鼠源永生化巨噬細胞包括thp-1細胞系、raw264.7細胞系、u937細胞系、j774a.1細胞系。
40、進一步，所述鼠源原代巨噬細胞包括多能干細胞來源的巨噬細胞、外周血來源的巨噬細胞、骨髓來源的巨噬細胞、腹腔來源的巨噬細胞、腫瘤來源的巨噬細胞。
41、進一步，所述巨噬細胞為鼠源原代巨噬細胞。
42、進一步，所述巨噬細胞為腹腔來源的巨噬細胞。
43、進一步，所述巨噬細胞的培養體系包含rpmi1640完全培養基。
44、本專利技術的優點和有益效果：本專利技術提供的微囊泡能夠抑制巨噬細胞的m1極化、抑制細胞炎癥因子的分泌，具有減輕炎癥的作用。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.一種微囊泡，其特征在于，所述微囊泡是β-葡聚糖刺激巨噬細胞產生的；
2.根據權利要求1所述的微囊泡，其特征在于，所述巨噬細胞包括鼠源巨噬細胞、人源巨噬細胞；
3.權利要求1或2所述的微囊泡制備的產品，其特征在于，所述產品包括：
4.根據權利要求3所述的產品，其特征在于，所述抑制巨噬細胞極化為抑制巨噬細胞M1極化；
5.根據權利要求3所述的產品，其特征在于，所述減輕炎癥的表現包括：1）減少巨噬細胞極化；和/或2）減少細胞炎癥因子的分泌；
6.權利要求1或2所述的微囊泡在制備權利要求3-5任一項所述的產品，和/或在抑制巨噬細胞極化、抑制細胞炎癥因子分泌、減輕炎癥中的應用。
7.一種培養權利要求1或2所述的微囊泡的方法，其特征在于，所述方法包括將β-葡聚糖加入巨噬細胞的培養體系中。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述巨噬細胞的培養體系包含10%胎牛血清和、100U/ml青霉素、0.1mg/ml鏈霉素的DMEM完全培養基；
9.一種抑制巨噬細胞極化、抑制細胞炎癥因子分泌或減輕炎
10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述巨噬細胞包括鼠源巨噬細胞、人源巨噬細胞；
...【技術特征摘要】
1.一種微囊泡，其特征在于，所述微囊泡是β-葡聚糖刺激巨噬細胞產生的；
2.根據權利要求1所述的微囊泡，其特征在于，所述巨噬細胞包括鼠源巨噬細胞、人源巨噬細胞；
3.權利要求1或2所述的微囊泡制備的產品，其特征在于，所述產品包括：
4.根據權利要求3所述的產品，其特征在于，所述抑制巨噬細胞極化為抑制巨噬細胞m1極化；
5.根據權利要求3所述的產品，其特征在于，所述減輕炎癥的表現包括：1）減少巨噬細胞極化；和/或2）減少細胞炎癥因子的分泌；
6.權利要求1或2所述的微囊泡在制備權利要求3-5任一項所述的產品，和/或在抑制巨噬細胞...
【專利技術屬性】
技術研發人員：高波，董潔，張紀巖，邵攀，曹俊霞，楊錫琴，牛春曉，汪曉寒，
申請(專利權)人：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，
類型：發明
國別省市：
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