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    一種靈芝類型鑒別標(biāo)記物及其應(yīng)用制造技術(shù)

    技術(shù)編號(hào):44504233 閱讀:3 留言:0更新日期:2025-03-07 13:03
    本發(fā)明專利技術(shù)涉及中藥領(lǐng)域,公開了一種靈芝類型鑒別標(biāo)記物及其應(yīng)用。本發(fā)明專利技術(shù)的目的是解決目前無野生與非野生靈芝的甄別系統(tǒng)的問題,具有提供一種野生與非野生靈芝的鑒別標(biāo)記物及其應(yīng)用。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)涉及中藥領(lǐng)域,具體涉及了中藥鑒別及品質(zhì)評(píng)價(jià)領(lǐng)域。


    技術(shù)介紹

    1、中藥材是中醫(yī)藥防病治病的物質(zhì)基礎(chǔ),是中成藥、中藥飲片等的重要原料。中藥材的品質(zhì)直接關(guān)系著廣大人民群眾的身體健康和生命安危。根據(jù)中藥材生長模式的不同,可將其分為野生品與栽培品。野生中藥材是我國歷代醫(yī)家臨床用藥的主體,通常受到干旱/洪澇、高溫/嚴(yán)寒、鹽堿、重金屬等多種逆境脅迫的影響,存在生長年限長、次生代謝產(chǎn)物積累豐富、療效較強(qiáng)等特點(diǎn)。歷代本草所載優(yōu)質(zhì)中藥材的產(chǎn)地、性狀、品質(zhì)優(yōu)劣、療效、用法用量等均是以野生中藥材為基準(zhǔn)。我國中醫(yī)藥學(xué)理論正是在數(shù)千年的野生中藥材人用歷史經(jīng)驗(yàn)及其量效關(guān)系探索的基礎(chǔ)上發(fā)展而來。

    2、靈芝(ganoderma?lingzhi?sheng?h.?wu,?y.?cao&y.?c.?dai)隸屬于真菌界、擔(dān)子菌門、傘菌綱、多孔菌目、靈芝科,是我國著名的中藥材,其應(yīng)用歷史可追溯至距今6800年前的河姆渡文化時(shí)期,具有補(bǔ)氣安神,止咳平喘之功效,常用于心神不寧,失眠心悸,肺虛咳喘,虛勞短氣,不思飲食。現(xiàn)代藥理學(xué)與臨床實(shí)踐進(jìn)一步證實(shí)了靈芝具有防治心血管疾病、保肝護(hù)肝、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、抗菌等諸多藥理作用。

    3、20世紀(jì)80年代以來,隨著靈芝需求量不斷增加,野生靈芝資源儲(chǔ)量不斷下降,靈芝藥材開始了廣泛的引種馴化與人工栽培。靈芝栽培規(guī)模不斷壯大,截止2023年,靈芝種植面積已超20萬畝,臨床用藥與市場(chǎng)流通均以栽培品為主。栽培品靈芝為滿足臨床用藥所需做出了巨大貢獻(xiàn)。但由于我國靈芝栽培主要借鑒農(nóng)作物的栽培管理模式,存在高密度種植、大水大肥、使用農(nóng)藥甚至植物生長調(diào)節(jié)劑等行為,使得栽培品靈芝發(fā)生了顯著的外觀性狀與氣味變異,如皮殼顏色變淡、菌蓋表面輻射狀皺紋顯著減少、藥材質(zhì)地變軟等變化。表型性狀的變化提示藥材內(nèi)在質(zhì)量的變化,引發(fā)了業(yè)界對(duì)于栽培靈芝品質(zhì)的擔(dān)憂。因性狀變異,從2000年版《中國藥典》起,在靈芝品種項(xiàng)下分列出野生品與栽培品。可見靈芝的人工栽培應(yīng)探索其自身規(guī)律,不可盲目照搬傳統(tǒng)農(nóng)作物的栽培方法,一味追求產(chǎn)量極有可能導(dǎo)致藥效降低,品質(zhì)下降。目前,針對(duì)野生與非野生靈芝的鑒別體系尚無。因此,系統(tǒng)地開展野生與非野生靈芝的鑒別工作,解析其品質(zhì)差異并對(duì)于探索中藥材野生品與栽培品替代使用具有重要意義,亦是引導(dǎo)栽培中藥材高質(zhì)量發(fā)展,保證廣大人民群眾用藥安全的重要科學(xué)探索。


    技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

    1、本專利技術(shù)的目的是解決目前無靈芝的類型鑒別系統(tǒng)的問題,具有提供一種靈芝類型的鑒別標(biāo)記物及其應(yīng)用。

    2、本專利技術(shù)的基礎(chǔ)技術(shù)方案為:靈芝類型鑒別標(biāo)記物,包括ganoderic?acid?delta、ganoderic?acidh的任意一種化合物或兩種化合物的組合。

    3、本專利技術(shù)人將預(yù)先收集到的林下擬境栽培靈芝(lx)、室內(nèi)工廠化栽培靈芝(sn)、大棚設(shè)施化栽培靈芝(dp)和野生靈芝(ys)四種類型的靈芝采用質(zhì)譜分析測(cè)定、分析其各種物質(zhì)的相對(duì)含量,從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見,ganoderic?acid?delta表現(xiàn)為:野生靈芝的相對(duì)含量明顯高于林下擬境栽培靈芝、室內(nèi)工廠化栽培靈芝、大棚設(shè)施化栽培靈芝,室內(nèi)工廠化栽培靈芝的相對(duì)含量不聚集、較分散,大棚設(shè)施化栽培靈芝和林下擬境栽培靈芝的相對(duì)含量比較聚集,但都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于野生靈芝;ganoderic?acid?h的相對(duì)含量比較結(jié)果表現(xiàn)為:野生靈芝的相對(duì)含量明顯低于林下擬境栽培靈芝、室內(nèi)工廠化栽培靈芝、大棚設(shè)施化栽培靈芝,且大棚設(shè)施化栽培靈芝和室內(nèi)工廠化栽培靈芝不聚集,較分散,林下擬境栽培靈芝較聚集;且本方案的標(biāo)記物未有報(bào)道可作為靈芝類型鑒別的標(biāo)記物。

    4、在實(shí)際的應(yīng)用中,當(dāng)靈芝類型無法確定時(shí),可采用本方案的標(biāo)記物中的任意一種標(biāo)記或者兩種組合標(biāo)記對(duì)各類型靈芝的相對(duì)含量進(jìn)行比較,即可將野生靈芝與其他類型靈芝區(qū)分開來,從而為現(xiàn)在無法鑒別野生靈芝類型提供了有力依據(jù),形成靈芝的鑒別體系,也可引導(dǎo)栽培中藥材的高質(zhì)量發(fā)展。

    5、進(jìn)一步,靈芝類型鑒別標(biāo)記物,還包括lucidone?b、ganoderic?acid?j、ganodericacid?g、靈芝酸c2、靈芝酸a、靈芝酸b、浸出物中的任意一種物質(zhì)或任意幾種物質(zhì)的組合。本專利技術(shù)還測(cè)定了其他幾種物質(zhì)的相對(duì)含量比較,其結(jié)果顯示:lucidone?b的相對(duì)含量比較結(jié)果表現(xiàn)為:野生靈芝的相對(duì)含量低于林下擬境栽培靈芝、室內(nèi)工廠化栽培靈芝、大棚設(shè)施化栽培靈芝,且大棚設(shè)施化栽培靈芝不聚集,較分散,林下擬境栽培靈芝和室內(nèi)工廠化栽培靈芝較聚集;ganoderic?acid?j表現(xiàn)為:野生靈芝的相對(duì)含量明顯高于林下擬境栽培靈芝、室內(nèi)工廠化栽培靈芝、大棚設(shè)施化栽培,室內(nèi)工廠化栽培靈芝的相對(duì)含量不聚集、較分散,大棚設(shè)施化栽培靈芝和林下擬境栽培靈芝的相對(duì)含量比較聚集,但都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于野生靈芝;ganoderic?acidg的相對(duì)含量結(jié)果中,大棚設(shè)施化栽培靈芝、林下擬境栽培靈芝、室內(nèi)工廠化栽培靈芝、野生靈芝均表現(xiàn)出了一定的分散性,但是野生靈芝的相對(duì)含量也略高于其他類型;浸出物的檢測(cè)結(jié)果中,野生靈芝的浸出物含量明顯高于其他靈芝類型,大棚設(shè)施化栽培靈芝次之,林下擬境栽培靈芝與室內(nèi)工廠化栽培靈芝相差不大;靈芝酸c2、靈芝酸a、靈芝酸b均表現(xiàn)為:野生靈芝的相對(duì)含量明顯高于林下擬境栽培靈芝、室內(nèi)工廠化栽培靈芝、大棚設(shè)施化栽培靈芝,室內(nèi)工廠化栽培靈芝的相對(duì)含量不聚集、較分散,大棚設(shè)施化栽培靈芝和林下擬境栽培靈芝的相對(duì)含量比較聚集,但都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于野生靈芝。

    6、在基礎(chǔ)方案的基礎(chǔ)之上,可結(jié)合本方案的標(biāo)記物中的任意一種、任意兩種、三種、四種或任意幾種組合對(duì)各靈芝類型的相對(duì)含量進(jìn)行比較,其鑒別的準(zhǔn)確度更高。

    7、本專利技術(shù)的另一個(gè)基礎(chǔ)技術(shù)方案,利用上述方案靈芝類型鑒別標(biāo)記物的靈芝類型鑒別方法。

    8、進(jìn)一步,靈芝類型鑒別方法,ganoderic?acid?delta、ganoderic?acidh、lucidoneb、ganoderic?acid?j、ganoderic?acid?g、靈芝酸c2、靈芝酸a、靈芝酸b的含量采用uhplc-q/tof-ms質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)。本專利技術(shù)的相對(duì)含量檢測(cè)是采用uhplc-q/tof-ms質(zhì)譜技術(shù)。uhplc-q/tof-ms是超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),這種技術(shù)結(jié)合了質(zhì)譜的強(qiáng)鑒定能力和超高效液相色譜的高分離效能,具有靈敏度高、選擇性好、分析速度快等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于中藥成分分析鑒定、體內(nèi)藥物成分分析鑒定、非靶向代謝組學(xué)、分子生物學(xué)、法醫(yī)檢測(cè)等多個(gè)研究領(lǐng)域。

    9、進(jìn)一步,靈芝類型鑒別方法,還經(jīng)過總離子電流(tic)歸一化處理獲得相對(duì)含量分析圖。經(jīng)過總離子電流(tic)歸一化處理后的相對(duì)含量分析比較圖,比較圖通常采用箱式圖,能直觀的反映出各樣品靈芝的相對(duì)含量位置,從而能夠非常直觀的得到每種樣品的靈芝類型。總離子電流(tic)是質(zhì)譜分析中的一個(gè)重要概念,指的是在選定的質(zhì)量范圍內(nèi),所有離子強(qiáng)度的總和隨時(shí)間或掃描次數(shù)變化的圖譜。tic圖反映了在質(zhì)譜分析過程中,所有離子信號(hào)的強(qiáng)度隨時(shí)間的變化情況。tic的本文檔來自技高網(wǎng)...

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

    1.靈芝類型鑒別標(biāo)記物,其特征在于:包括Ganoderic?acid?delta、Ganoderic?acid?H的任意一種化合物或兩種化合物的組合。

    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靈芝類型鑒別標(biāo)記物,其特征在于:還包括Lucidone?B、Ganoderic?acid?J、Ganoderic?acid?G、靈芝酸C2、靈芝酸A、靈芝酸B、浸出物中的任意一種物質(zhì)或任意幾種物質(zhì)的組合。

    3.利用權(quán)利要求1或2任意一種所述靈芝類型鑒別標(biāo)記物的靈芝類型鑒別方法。

    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的靈芝類型鑒別方法,其特征在于:所述的Ganoderic?aciddelta、Ganoderic?acid?H、Lucidone?B、Ganoderic?acid?J、Ganoderic?acid?G、靈芝酸C2、靈芝酸A、靈芝酸B的含量均采用UHPLC-Q/TOF-MS質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)。

    5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的靈芝類型鑒別方法,其特征在于:還經(jīng)過總離子電流歸一化處理分析獲得相對(duì)含量分析圖。

    6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的靈芝類型鑒別方法,其特征在于:還包括有主成分分析步驟。

    7.根據(jù)權(quán)利要求1或2任意一種所述靈芝類型鑒別標(biāo)記物所構(gòu)建的靈芝鑒別數(shù)據(jù)庫。

    8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的靈芝鑒別數(shù)據(jù)庫,其特征在于:還包括權(quán)利要求4或5或6的靈芝類型鑒別方法。

    9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的靈芝鑒別數(shù)據(jù)庫,其特征在于:還包括有各類型靈芝的Ganoderic?acid?delta、Ganoderic?acid?H、Lucidone?B、Ganoderic?acid?J、Ganodericacid?G、靈芝酸C2、靈芝酸A、靈芝酸B、浸出物的任意一種物質(zhì)或幾種物質(zhì)的含量值。

    10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靈芝類型鑒別標(biāo)記物,其特征在于:所述Ganoderic?aciddelta的化合物結(jié)構(gòu)式為?,所述Ganoderic?acid?H的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為,所述Lucidone?B的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為,所述Ganoderic?acid?J的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為,所述Ganoderic?acid?G的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為。

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    【技術(shù)特征摘要】

    1.靈芝類型鑒別標(biāo)記物,其特征在于:包括ganoderic?acid?delta、ganoderic?acid?h的任意一種化合物或兩種化合物的組合。

    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靈芝類型鑒別標(biāo)記物,其特征在于:還包括lucidone?b、ganoderic?acid?j、ganoderic?acid?g、靈芝酸c2、靈芝酸a、靈芝酸b、浸出物中的任意一種物質(zhì)或任意幾種物質(zhì)的組合。

    3.利用權(quán)利要求1或2任意一種所述靈芝類型鑒別標(biāo)記物的靈芝類型鑒別方法。

    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的靈芝類型鑒別方法,其特征在于:所述的ganoderic?aciddelta、ganoderic?acid?h、lucidone?b、ganoderic?acid?j、ganoderic?acid?g、靈芝酸c2、靈芝酸a、靈芝酸b的含量均采用uhplc-q/tof-ms質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)。

    5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的靈芝類型鑒別方法,其特征在于:還經(jīng)過總離子電流歸一化處理分析獲得相對(duì)含量分析圖。

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    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:賀宗毅陳一龍王伯初譚春斌陳崗祝連彩郝石磊
    申請(qǐng)(專利權(quán))人:重慶市中藥研究院
    類型:發(fā)明
    國別省市:

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