【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于農業生物基因，具體涉及一種提高柑橘潰瘍病抗性的方法。
技術介紹
1、柑橘是重要的經濟作物之一，在全球范圍內都有廣泛種植，然而，柑橘潰瘍病嚴重阻礙了柑橘產業的健康發展。柑橘潰瘍病由黃單胞桿菌柑橘致病變種(xanthomonas?citrisubsp.citri，xcc)引起，病菌主要侵染柑橘葉片、枝梢、果實等，其中苗木、幼樹受害較為嚴重，病樹會出現落葉、枯梢、樹勢衰弱以及落果等現象，嚴重的影響了柑橘產量和品質。柑橘產區備受柑橘潰瘍病的困擾，并且在柑橘類作物中，甜橙最易感病，其次是酸橙和柚類。
2、目前，控制柑橘潰瘍病危害通常采取綜合防治策略，以化學防治為主，生物防治為輔。然而，化學防治極易對環境造成污染，具有環境不友好、且需要投入大量的人力、物力的缺點；生物防治效果差，成本高，所以本領域仍需一種防治效果好、節省人力物力、減少農藥施用等降低長期投入的柑橘潰瘍病的防治方法。
3、因此，如何提供一種對柑橘潰瘍病的不同病原菌具有廣譜抗性，能夠降低柑橘種植過程中農藥使用量的提高柑橘潰瘍病抗性的方法成為了本領域亟待解決的問題。
技術實現思路
1、為了解決現有技術中柑橘潰瘍病防治方法存在的易造成環境污染、防效低等問題，本專利技術提供了一種提高柑橘潰瘍病抗性的防治方法，具體包括如下技術方案：
2、一種pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因在提高柑橘抗病性中的應用，所述pcchensinin-1b-lp4-cala
3、所述pcchensinin-1b基因的序列如seq?id?no.1所示；所述calaslys2基因的核苷酸序列如seq?id?no.2所示；所述lp4的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。
4、本專利技術還提供了一種生物材料，含有如上所述的pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因。
5、優選地，所述生物材料包括含有如權利要求1所述的pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因的重組載體和/或重組微生物。
6、優選地，所述重組載體包括初始載體和插入所述初始載體中的pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因，所述基礎載體為質粒載體；
7、所述重組微生物的初始菌株為根癌農桿菌。
8、本專利技術還提供了如上所述的生物材料在提高柑橘抗病性中的應用。
9、本專利技術還提供了一種提高柑橘潰瘍病抗性的方法，包括如下步驟：
10、將如上所述的pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因轉化至柑橘中，得到高柑橘潰瘍病抗性的轉基因柑橘植株。
11、優選地，所述將pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因轉化至柑橘外植體中的操作包括如下步驟：
12、將含有所述pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因重組表達載體轉化至柑橘中，得到轉基因柑橘植株。
13、優選地，所述將所述pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因重組表達載體轉化至柑橘外植體中包括如下步驟：
14、通過電擊法將所述pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因重組表達載體轉化至根癌農桿菌中，再用根癌農桿菌介導轉化柑橘外植體。
15、優選地，所述柑橘外植體包括上胚軸。
16、優選地，所述pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因重組表達載體中的基礎載體包括plgn載體，所述根癌農桿菌包括根癌農桿菌eha105。
17、本專利技術的有益效果在于：
18、本專利技術提供了一種pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因在提高柑橘抗病性中的應用，包括如下步驟：合成pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因，并將融合雙價抗病蛋白基因轉化至柑橘中，得到對柑橘潰瘍病抗性高的轉基因柑橘植株。利用本專利技術的方法轉化易感柑橘潰瘍病的柑橘品種，得到的轉基因植株潰瘍病抗性程度可與高抗潰瘍病的金柑相當。綜上所述，本專利技術提供的提高柑橘潰瘍病的方法有望從根本上解決柑橘生產中潰瘍病難防治的問題。
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1.一種pcchensinin-1b-LP4-CaLasLYS2融合雙價抗病蛋白基因在提高柑橘抗病性中的應用，其特征在于，所述pcchensinin-1b-LP4-CaLasLYS2融合雙價抗病蛋白基因包括pcchensinin-1b基因、CaLasLYS2基因和連接所述pcchensinin-1b基因和CaLasLYS2基因的LP4基因；
2.一種生物材料，其特征在于，含有如權利要求1所述的pcchensinin-1b-LP?4-CaLasLYS2融合雙價抗病蛋白基因。
3.如權利要求2所述的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括含有如權利要求1所述的pcchensinin-1b-LP4-CaLasLYS2融合雙價抗病蛋白基因的重組載體和/或重組微生物。
4.如權利要求3所述的生物材料，其特征在于，所述重組載體包括初始載體和插入所述初始載體中的pcchensinin-1b-LP4-CaLasLYS2融合雙價抗病蛋白基因，所述基礎載體為質粒載體；
5.權利要求3或4所述的生物材料在提高柑橘抗病性中的應用。
6.一種提高柑
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述將pcchensinin-1b-LP4-CaLa?sLYS2融合雙價抗病蛋白基因轉化至柑橘外植體中的操作包括如下步驟：
8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述將所述pcchensinin-1b-LP4-CaLasLYS2融合雙價抗病蛋白基因重組表達載體轉化至柑橘外植體中包括如下步驟：
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述柑橘外植體包括上胚軸。
10.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述pcchensinin-1b-LP4-CaLas?LYS2融合雙價抗病蛋白基因重組表達載體中的基礎載體包括pLGN載體，所述根癌農桿菌包括根癌農桿菌EHA105。
...【技術特征摘要】
1.一種pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因在提高柑橘抗病性中的應用，其特征在于，所述pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因包括pcchensinin-1b基因、calaslys2基因和連接所述pcchensinin-1b基因和calaslys2基因的lp4基因；
2.一種生物材料，其特征在于，含有如權利要求1所述的pcchensinin-1b-lp?4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因。
3.如權利要求2所述的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括含有如權利要求1所述的pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合雙價抗病蛋白基因的重組載體和/或重組微生物。
4.如權利要求3所述的生物材料，其特征在于，所述重組載體包括初始載體和插入所述初始載體中的pcchensinin-1b-lp4-calaslys2融合...
【專利技術屬性】
技術研發人員：許蘭珍，孫乙嘉，鄒修平，趙曉春，陳善春，何永睿，雷天剛，姜國金，李強，龍琴，姚利曉，彭愛紅，
申請(專利權)人：西部重慶科學城種質創制大科學中心，
類型：發明
國別省市：
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