【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及分析化學(xué)，尤其是涉及一種檢測afb1和zen的電致化學(xué)發(fā)光傳感器和制備方法及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、隨著人口老齡化、亞健康及慢性病發(fā)展趨勢的加快，“養(yǎng)”和“防”已成為人們?nèi)粘１＝〉闹匦摹Ｆ渲?，“藥食同源養(yǎng)生觀”備受關(guān)注和認(rèn)可，這也導(dǎo)致“藥食兩用”中藥材的需求量逐漸增加。尤其對于具有重要的食用價值和利水滲濕、健脾止瀉等藥用功能的薏苡仁，作為一味大宗常用的“藥食兩用”中藥材，受各種內(nèi)在因素(高淀粉含量)及外界環(huán)境條件(高溫高濕)的影響，薏苡仁在其生長、采收、加工和儲藏過程中極易污染真菌毒素，其中，黃曲霉毒素b1(afb1)和玉米赤霉烯酮(zen)的污染率和檢出率最高。afb1和zen是食品、中藥材及“藥食兩用”中藥材中常見的真菌毒素，雖含量低卻毒性很大，可能會對人體產(chǎn)生不可逆轉(zhuǎn)的急、慢性毒性。因此，開發(fā)靈敏準(zhǔn)確的方法快速檢測大批量薏苡仁中afb1和zen的污染水平，對保障其質(zhì)量和安全及消費(fèi)者的身心健康具有重要意義。
2、中藥材中真菌毒素的現(xiàn)行檢測方法(如高效液相色譜法及液質(zhì)聯(lián)用技術(shù))通常依賴于大型、昂貴的儀器和專業(yè)的操作人員，多局限于實(shí)驗(yàn)室使用，較難實(shí)現(xiàn)中藥材集散地的大批量薏苡仁樣品中afb1和zen的低成本快速檢測。因此，迫切需要開發(fā)實(shí)用性強(qiáng)且靈敏準(zhǔn)確的現(xiàn)場快速檢測方法。
3、有鑒于此，特提出本專利技術(shù)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的之一在于提供一種檢測afb1和zen的電致化學(xué)發(fā)光傳感器，以解決現(xiàn)有技術(shù)中缺少能夠快速同時檢測afb1和ze
2、本專利技術(shù)的目的之二在于提供上述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器的制備方法。
3、本專利技術(shù)的目的之三在于提供一種檢測afb1和zen的方法。
4、為了實(shí)現(xiàn)本專利技術(shù)的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：
5、第一方面，本專利技術(shù)提供了一種檢測afb1和zen的電致化學(xué)發(fā)光傳感器，所述電致化學(xué)發(fā)光傳感器包括自組裝在金電極上的dna四面體和afb1信號探針和zen信號探針；
6、所述afb1信號探針包括afb1適配體和n-cds1/zif-8復(fù)合材料；
7、所述zen信號探針包括zen適配體和n-cds2/zif-8復(fù)合材料；
8、所述dna四面體由四條單鏈dna結(jié)合而成。
9、進(jìn)一步的，所述afb1適配體的核苷酸序列如seq?id?no:1所示，所述zen適配體的核苷酸序列如seq?id?no:2所示。
10、優(yōu)選地，所述四條單鏈dna包括a鏈、b鏈、c鏈及d鏈，所述a鏈的核苷酸序列分別如seq?id?no:3所示，所述b鏈的核苷酸序列分別如seq?id?no:4所示，所述c鏈的核苷酸序列分別如seq?id?no:5所示，所述d鏈的核苷酸序列分別如seq?id?no:6所示。
11、第二方面，本專利技術(shù)提供了上述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器的制備方法，包括在固定有dna四面體的金電極上修飾afb1信號探針和zen信號探針，得到電致化學(xué)發(fā)光傳感器。
12、進(jìn)一步的，包括向經(jīng)氧化鋁漿液處理后的金電極上添加dna四面體溶液孵育，孵育完成后添加6-巰基-1-己醇溶液，再添加afb1信號探針溶液和zen信號探針溶液孵育，得到電致化學(xué)發(fā)光傳感器；
13、優(yōu)選地，所述氧化鋁漿液的制備方法包括分別取粒徑為0.3μm和0.05μm的氧化鋁粉末，放置于拋光布表面，加入少許超純水，使成為漿液狀態(tài)，得氧化鋁漿液；
14、優(yōu)選地，所述dna四面體溶液的濃度為0.5～1.5μm，優(yōu)選為1.0μm；
15、優(yōu)選地，所述6-巰基-1-己醇溶液的濃度為8～12mm，優(yōu)選為10mm；
16、優(yōu)選地，所述afb1信號探針溶液的濃度為2.0～3.0mg/ml，優(yōu)選為2.5mg/ml；
17、優(yōu)選地，所述zen信號探針溶液的濃度為2.0～3.0mg/ml，優(yōu)選為2.5mg/ml；
18、優(yōu)選地，所述dna四面體溶液、6-巰基-1-己醇溶液、afb1信號探針溶液和zen信號探針溶液的添加量的體積比為7～12:7～12:7～12:7～12，優(yōu)選為10:10:10:10；
19、優(yōu)選地，所述添加dna四面體溶液和添加afb1信號探針溶液和zen信號探針溶液的孵育溫度分別獨(dú)立為35℃～40℃，優(yōu)選為37℃；
20、優(yōu)選地，所述添加dna四面體溶液和添加afb1信號探針溶液和zen信號探針溶液的孵育時間分別獨(dú)立為至少1h；
21、優(yōu)選地，所述孵育后還包括用緩沖液沖洗電極并干燥；
22、優(yōu)選地，所述dna四面體的制備方法包括混合四條單鏈dna自組裝為dna四面體；
23、優(yōu)選地，所述自組裝的體系中四條單鏈dna的濃度分別獨(dú)立為3～8μμm，優(yōu)選為5μm。
24、進(jìn)一步的，所述afb1信號探針的制備方法包括在制備的n-cds1/zif-8復(fù)合材料中添加afb1適配體，孵育得到afb1信號探針；
25、所述zen信號探針的制備方法包括在制備的n-cds2/zif-8復(fù)合材料中添加zen適配體，孵育得到afb1信號探針；
26、優(yōu)選地，所述n-cds1/zif-8復(fù)合材料與afb1適配體孵育時，n-cds1/zif-8復(fù)合材料的濃度為2～3mg/ml，優(yōu)選為2.5mg/ml；afb1適配體的濃度為3～8μm，優(yōu)選為5μm；n-cds1/zif-8復(fù)合材料與afb1適配體的體積比為1:1；
27、優(yōu)選地，所述n-cds2/zif-8復(fù)合材料與zen適配體孵育時，n-cds2/zif-8復(fù)合材料的濃度為2～3mg/ml，優(yōu)選為2.5mg/ml；zen適配體的濃度為3～8μm，優(yōu)選為5μm；n-cds1/zif-8復(fù)合材料與zen適配體的體積比為1:1。
28、進(jìn)一步的，所述n-cds1/zif-8復(fù)合材料的制備方法包括將zif-8溶于水中，加入n-cds1避光孵育，孵育完成后靜置、離心棄上清、干燥得到n-cds1/zif-8復(fù)合材料；
29、所述n-cds2/zif-8復(fù)合材料的制備方法包括將zif-8溶于水中，加入n-cds2避光孵育，孵育完成后靜置、離心棄上清、干燥得到n-cds2/zif-8復(fù)合材料；
30、優(yōu)選地，所述zif-8與n-cds1的質(zhì)量濃度比為1:1.5～2.5，優(yōu)選為1:2；
31、優(yōu)選地，所述zif-8與n-cds2的質(zhì)量濃度比為1:1.5～2.5，優(yōu)選為1:2；
32、優(yōu)選地，所述n-cds1/zif-8復(fù)合材料和n-cds2/zif-8復(fù)合材料的制備方法中的孵育溫度分別獨(dú)立為23℃～30℃，優(yōu)選為25℃；
33、優(yōu)選地，所述n-cds1/zif-8復(fù)合材料和n-cds2/zif-8復(fù)合材料的制備方法中的孵育時間分別獨(dú)立為10～14h，優(yōu)選為12h；
34、優(yōu)選地，所述靜置的時間為8～12min，優(yōu)選為10min本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種檢測AFB1和ZEN的電致化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述電致化學(xué)發(fā)光傳感器包括自組裝在金電極上的DNA四面體和AFB1信號探針和ZEN信號探針；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述AFB1適配體的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，所述ZEN適配體的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
3.權(quán)利要求1或2所述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器的制備方法，其特征在于，包括在固定有DNA四面體的金電極上修飾AFB1信號探針和ZEN信號探針，得到電致化學(xué)發(fā)光傳感器。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，包括向經(jīng)氧化鋁漿液處理后的金電極上添加DNA四面體溶液孵育，孵育完成后添加6-巰基-1-己醇溶液，再添加AFB1信號探針溶液和ZEN信號探針溶液孵育，得到電致化學(xué)發(fā)光傳感器；
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述AFB1信號探針的制備方法包括在制備的N-CDs1/ZIF-8復(fù)合材料中添加AFB1適配體，孵育得到AFB1信號探針；
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述N-CDs1的制備方法包括將檸檬酸和尿素溶于水中，將混合溶液置于反應(yīng)釜中，160℃反應(yīng)，反應(yīng)完成后冷卻至室溫，透析、干燥得到N-CDs1；
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述ZIF-8的制備方法包括將甲基咪唑水溶液和二水合乙酸鋅水溶液混合，室溫反應(yīng)，反應(yīng)完成后離心、干燥得到ZIF-8；
9.一種檢測AFB1和ZEN的方法，其特征在于，將待測樣品溶液添加在權(quán)利要求1或2所述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器或權(quán)利要求3～8任一項所述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器上孵育，孵育后以金電極為工作電極檢測電致化學(xué)發(fā)光信號。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述待測樣品溶液的孵育時間為15～25min，優(yōu)選為20min；
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種檢測afb1和zen的電致化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述電致化學(xué)發(fā)光傳感器包括自組裝在金電極上的dna四面體和afb1信號探針和zen信號探針；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述afb1適配體的核苷酸序列如seq?id?no:1所示，所述zen適配體的核苷酸序列如seq?id?no:2所示。
3.權(quán)利要求1或2所述的電致化學(xué)發(fā)光傳感器的制備方法，其特征在于，包括在固定有dna四面體的金電極上修飾afb1信號探針和zen信號探針，得到電致化學(xué)發(fā)光傳感器。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，包括向經(jīng)氧化鋁漿液處理后的金電極上添加dna四面體溶液孵育，孵育完成后添加6-巰基-1-己醇溶液，再添加afb1信號探針溶液和zen信號探針溶液孵育，得到電致化學(xué)發(fā)光傳感器；
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述afb1信號探針的制備方法包括在制備的n-cds1/zif-8復(fù)合材料中添加afb1適配體，孵育得到afb1信號探針；
...【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：孔維軍，李瑩，侯玉姣，周立東，
申請(專利權(quán))人：首都醫(yī)科大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。