【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物醫藥，具體涉及lect2作為肝臟缺血再灌注損傷的診斷、治療靶點的應用。
技術介紹
1、肝臟缺血再灌注損傷(iri)是一個復雜的級聯事件，由缺血發作引發，在缺血期間，活性氧(ros)過度產生，發生氧化應激，導致細胞器受損和細胞死亡。當血流恢復時，細胞損傷和細胞死亡在氧傳遞和剪切應力恢復后加重，形成壓倒性的炎癥反應，顯著破壞內皮和上皮屏障，導致iri，嚴重的iri和炎癥反應進一步導致急性呼吸窘迫綜合征(ards)或全身炎癥反應綜合征(sirs)，這是多器官衰竭(mof)發病機制的核心。迄今為止，缺血再灌注治療方案僅為姑息性治療，可以緩解患者的不適，但無法改善潛在的病情。
2、肝臟缺血再灌注損傷(iri)是肝移植、創傷、低血容量休克和肝切除術中的一個主要問題，過去幾十年中一直是研究的熱點。在肝臟手術期間引入血管控制技術后，使用間歇性完全血管阻斷(pringle法)，以減少術中失血，肝臟缺血再灌注被認為是影響術后發病率和死亡率的關鍵因素之一，導致肝臟功能障礙和衰竭，并影響遠端器官如腎臟、腸道、肺臟等。肝臟缺血再灌注損傷的機制十分復雜，目前仍不完全清楚，臨床缺少有效干預手段。
3、leukocyte?cell-derived?chemotaxin?2(lect2)是一個分子量約16kd分泌蛋白，最初作為中性粒細胞趨化因子被報道。lect2在多種生理活動和疾病中發揮作用，如敗血癥、糖尿病、肝癌、非酒精性脂肪肝、造血干細胞穩態維持等。然而其對血管內皮細胞功能的功能調控及是否在iri中發揮重要作用尚不清
技術實現思路
1、本專利技術第一方面的目的，在于提供lect2作為靶點在制備缺血再灌注損傷的診斷和/或治療產品中的應用。
2、本專利技術第二方面的目的，在于提供檢測lect2的試劑在準備缺血再灌注損傷的診斷產品中的應用。
3、本專利技術第二方面的目的，在于提供lect2抑制劑在制備預防和/或治療缺血再灌注損傷的藥物中的應用。
4、本專利技術所采取的技術方案是：
5、本專利技術的第一方面，提供lect2作為靶點在制備缺血再灌注損傷的診斷和/或治療產品中的應用。
6、在本專利技術的一些實施方式中，所述診斷為早期診斷；優選為在再灌注損傷后的0～48h內；更優選為0～24h內。
7、在本專利技術的一些實施方式中，所述缺血再灌注損傷包括：腎臟缺血損傷和/或缺血再灌注損傷、心肌缺血損傷和/或缺血后再灌注損傷、肝臟缺血損傷和/或缺血再灌注損傷。
8、本專利技術的第二方面，檢測lect2的試劑在制備缺血再灌注損傷的診斷產品中的應用。
9、在本專利技術的一些實施方式中，所述缺血再灌注損傷包括：腎臟缺血損傷和/或缺血再灌注損傷、心肌缺血損傷和/或缺血后再灌注損傷、肝臟缺血損傷和/或缺血再灌注損傷。
10、在本專利技術的一些實施方式中，所述檢測lect2的試劑包括檢測lect2表達水平的試劑。
11、在本專利技術的一些實施方式中，所述檢測lect2表達水平的試劑包括檢測lect2基因和/或蛋白表達水平的試劑。
12、在本專利技術的一些實施方式中，所述檢測lect2基因表達水平的試劑為通過測序技術、核酸雜交技術、核酸擴增技術和免疫測定中的至少一種方法檢測lect2基因表達水平的試劑。
13、在本專利技術的一些實施方式中，所述檢測lect2蛋白表達水平的試劑為通過western-blot、酶聯免疫吸附測定、免疫組織化學、免疫細胞化學、流式細胞術、紫外分光光度法、高效液相色譜法、比色法、質譜鑒定、蛋白芯片、免疫共沉淀和免疫印跡中的至少一種方法檢測標lect2蛋白表達水平的試劑。
14、在本專利技術的一些實施方式中，所述試劑包括引物、探針或抗體。
15、在本專利技術的一些實施方式中，所述引物的序列為：
16、正向：gctggtctgatttctaccgca；
17、反向：ccagagagagacaagatc。
18、在本專利技術的一些實施方式中，所述產品為試劑盒、芯片、試紙或試劑。
19、本專利技術的第三方面，提供lect2/tie1信號通路抑制劑或其藥學上可接受的鹽在制備預防和/或治療缺血再灌注損傷的藥物中的應用。
20、在本專利技術的一些實施方式中，所述缺血再灌注損傷包括缺血損傷和/或缺血再灌注損傷。
21、優選地，所述缺血損傷和/或缺血再灌注損傷包括腎臟缺血損傷和/或缺血再灌注損傷、心肌缺血損傷和/或缺血后再灌注損傷、肝臟缺血損傷和/或缺血再灌注損傷。
22、所述lect2/tie1信號通路抑制劑包括抑制lect2和/或tie1基因表達、沉默或敲除lect2和/或tie1基因的物質，和/或，抑制lect2和/或tie1蛋白含量和/或活性的物質；和/或，抑制lect2和tiel結合的物質。
23、在本專利技術的一些實施方式中，所述lect2/tie1信號通路抑制劑包括shrna、sirna、dsrna、sgrna、mirna、cdna、反義rna/dna、小分子化合物、肽、抗體中的至少一種。
24、在本專利技術的一些實施方式中，所述抗體包括靶向lect2和/或tie1的抗體、抗體融合體或抗體片段。
25、在本專利技術的一些實施方式中，所述shrna的靶向序列為：
26、gctaacatatgtgccagcaaatctt。
27、在本專利技術的一些實施方式中，所述shrna序列包括正義鏈和反義鏈，所述正義鏈和反義鏈分別為：
28、正義鏈：gctaacatatgtgccagcaaatctt；
29、反義鏈：aagatttgctggcacatatgttagc。
30、在本專利技術的一些實施方式中，所述抑制lect2和tiel結合的試劑包括tie1胞外區片段重組蛋白、tie?ig3區段重組蛋白、lect2片段或全長重組蛋白、lect2阻斷抗體中的至少一種
31、在本專利技術的一些實施方式中，所述藥學上可接受的鹽包括但不限于：可藥用的酸加成鹽，如：無機酸例如鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸和硫酸的鹽，以及有機酸例如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、萄糖酸、羥乙酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、馬來酸、蘋果酸、甲磺酸、琥珀酸、對甲苯磺酸和酒石酸的鹽；可藥用堿的鹽是銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)和堿土金屬鹽(例如鎂鹽和鈣鹽)以及氨基丁三醇(2-氨基-2-羥基甲基-1，3-丙二醇)、二乙醇胺、賴氨酸或乙二胺的鹽。
32、在本專利技術的一些實施方式中，所述藥物含有有效劑量的lect2抑制劑或其藥學上可接受的鹽。
33、在本專利技術的一些實施方式中，所述抑制劑還包括shrna、sirna、dsrna、sgrna、mirna、cdna、反義rna/dna與轉染試劑的混合物或包含shrna、sirna、dsrna、sgrna、mirna、cdna、反本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.LECT2作為靶點在制備缺血再灌注損傷的診斷和/或治療產品中的應用。
2.檢測LECT2的試劑在制備缺血再灌注損傷的診斷產品中的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述檢測LECT2的試劑包括檢測LECT2表達水平的試劑；
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述試劑包括引物、探針或抗體；
5.LECT2/Tie1信號通路抑制劑或其藥學上可接受的鹽在制備預防和/或治療缺血再灌注損傷的藥物中的應用。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述LECT2/Tie1信號通路抑制劑包括抑制LECT2和/或Tie1基因表達、沉默或敲除LECT2和/或Tie1基因的物質，和/或，抑制LECT2和/或Tie1蛋白含量和/或活性的物質；和/或，抑制LECT2和Tiel結合的物質；
7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述shRNA序列如下：
8.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述抑制LECT2和Tiel結合的試劑包括Tie1胞外區片段重組蛋白、Tie?Ig3區段重組蛋白、
9.根據權利要求5～8任一項所述的應用，其特征在于，所述藥物還包括藥學上可接受的輔料；
10.根據權利要求1～8任一項所述的應用，其特征在于，所述缺血再灌注損傷包括缺血損傷和/或再灌注損傷；
...【技術特征摘要】
1.lect2作為靶點在制備缺血再灌注損傷的診斷和/或治療產品中的應用。
2.檢測lect2的試劑在制備缺血再灌注損傷的診斷產品中的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述檢測lect2的試劑包括檢測lect2表達水平的試劑；
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述試劑包括引物、探針或抗體；
5.lect2/tie1信號通路抑制劑或其藥學上可接受的鹽在制備預防和/或治療缺血再灌注損傷的藥物中的應用。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述lect2/tie1信號通路抑制劑包括抑制lect2和/或tie1基因表達、沉默或敲除lect2和/或t...
【專利技術屬性】
技術研發人員：周偉杰，林媛，董夢琦，劉鳳永，
申請(專利權)人：南方醫科大學，
類型：發明
國別省市：
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