本發明專利技術涉及一種評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，屬于霉菌致霉能力評價技術領域。本發明專利技術通過對雪茄煙葉中的多種霉菌進行分離、回接侵染，構建包含視覺評價、嗅覺評價、菌落計數評價、霉變煙葉中揮發性成分分析評價的4個指標的系統評價體系，建立了一種雪茄煙葉中霉菌致霉能力的科學、系統的評價方法。本發明專利技術的方法中，對霉菌的致霉能力既有客觀精確的評價指標，即菌落計數結果和霉變煙葉中揮發性成分分析評價指標；又有主觀感官評價指標相輔助，即視覺和嗅覺評價，評價指標設定客觀合理。而且本發明專利技術的方法將定性描述的評價結果轉化為定量評價，使得感官評價結果更具清晰性和客觀性。
1、煙葉原料及煙草制品由于在生長、倉儲、醇化過程中極易受環境因素的影響，容易發生霉變現象。一旦發生霉變，煙葉原料及煙草制品將直接失去價值，這也使霉變逐漸成為困擾全球煙草行業的棘手問題之一。
2、相比于傳統的卷煙，雪茄煙葉中霉菌具有種類多、分布廣、繁殖力和潛伏性強等特點，因而導致雪茄煙葉在生產和加工的各個環節中均存在霉變風險。而且雪茄煙葉獨特的加工工藝，如雪茄煙草制品水分含量高、高濕工藝條件多、轉序待用的雪茄煙葉駐停時間長、工器具和環境衛生條件差以及產品處于非密封體系等，使其生產在理論上面臨更大的霉變風險。特別是在雪茄煙葉發酵過程中，由于酶和微生物作用需要較高的溫濕度環境，且雪茄煙葉內含物質豐富，霉菌極易滋生。而雪茄煙葉霉變除引起煙葉品質降低、造成優質煙葉資源浪費、產生巨大的經濟損失外，還有可能產生霉菌毒素而直接影響雪茄煙葉的質量安全性(對消費者的健康造成潛在威脅)。因此，對雪茄煙葉及制品的霉變防控至關重要。
3、然而，目前對于雪茄煙葉及制品的防控時，僅僅是通過微生物分離培養，就將分離得到的霉菌定義為主要霉菌，但是雪茄煙葉中霉菌(絲狀真菌)種類較多，有些在雪茄煙葉中對感官質量風格特征甚至起正向作用，而有些才對感官質量風格特征起負向作用，因此該方法是極其不科學的。因此，建立一種能科學、系統的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，對于雪茄煙葉及制品的霉變防控有重要意義。
>1、本專利技術的目的在于提供一種評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，為現有技術提供一種科學、系統的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法。2、為了實現上述目的，本專利技術中一種評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法的技術方案是：
3、一種評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，雪茄煙葉中霉菌分離后回接侵染，然后進行包括如下步驟的霉菌致霉能力的評價：
4、(1)確定霉菌在雪茄煙葉上致霉能力關鍵評價指標的限制范圍及單項評分；所述關鍵評價指標包括視覺評價、嗅覺評價、菌落計數評價、霉變煙葉中揮發性成分分析評價；
5、(2)確定霉菌在雪茄煙葉上致霉能力的關鍵評價指標的權重，并獲得霉菌致霉能力的綜合得分計算公式；
6、(3)確定霉菌在雪茄煙葉上致霉能力強弱的等級及賦值范圍；
7、(4)對待測樣品進行評價，獲得關鍵評價指標的限制范圍及單項評分，并根據步驟(2)的計算公式獲得霉菌致霉能力的綜合得分，根據綜合得分所在的霉菌致霉能力強弱賦值范圍，判定霉菌致霉能力強弱的等級。
8、上述技術方案的有益效果在于：本專利技術一種評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法為開拓型專利技術。本專利技術通過對雪茄煙葉中的多種霉菌進行分離，然后進行回接侵染，構建包含視覺評價、嗅覺評價、菌落計數評價、霉變煙葉中揮發性成分分析評價的4個指標的系統評價體系，建立了一種雪茄煙葉中霉菌致霉能力的科學、系統的評價方法。本專利技術的方法中，對霉菌的致霉能力既有客觀精確評價指標，即菌落計數結果和霉變煙葉中揮發性成分分析評價指標，又有主觀感官評價指標相輔助，即視覺和嗅覺評價，評價指標設定客觀合理。而且本專利技術的方法將定性描述的評價結果轉化為定量評價，使得感官評價結果更具清晰性和客觀性。
9、具體地，當前業內判斷雪茄煙葉霉變程度最直觀快速的方法通常是眼睛看，鼻子聞。眼睛看霉變煙葉有多少，對應視覺評價里的霉變面積；鼻子聞霉變氣味大小，對應嗅覺評價里的霉變味道及程度，且這兩個指標具有簡便、快速判斷的優點，因此選取這兩者作為關鍵評價指標。另外，菌落計數評價是當前業內判斷雪茄煙葉霉變程度最常用的方法，往往是根據gb?4789.15-2016操作后，統計平板菌落數量來大致判斷煙葉的霉變程度，但是沒有一種通過菌落數量定性判斷霉變程度的標準。而本專利技術根據前期研究的大量實驗數據，可以得出一個用菌落數量定性判斷霉變程度的標準。且本指標依據gb?4789.15-2016進行操作，具有較強的可操作性和科學性，也彌補了視覺評價這一指標的主觀性，因此選取本指標作為關鍵評價指標。在前三者關鍵評價指標的基礎上，霉味物質分析利用gc-ims進行檢測，具有操作簡便，耗時短，靈敏度高的優勢，增加了本專利技術評價方法的嚴謹性，也彌補了嗅覺評價這一指標的主觀性，因此選取本指標作為關鍵評價指標。
10、作為進一步地改進，所述視覺評價的限制范圍及單項評分如下：霉變面積在0％-20％，評分為1；霉變面積在20％-40％，評分為2；霉變面積在40％-60％，評分為3；霉變面積在60％-80％，評分為4；霉變面積在80％-100％，評分為5。
11、作為進一步地改進，根據霉變后發霉的氣味大小進行所述嗅覺評價。
12、作為進一步地改進，所述嗅覺評價的限制范圍及單項評分如下：霉味程度打分為0-20％，評分為1；霉味程度打分為20-40％，評分為2；霉味程度打分為40-60％，評分為3；霉味程度打分為60-80％，評分為4；霉味程度打分為80-100％，評分為5。
13、作為進一步地改進，根據gb?4789.15-2016進行菌落計數評價。
14、作為進一步地改進，所述菌落計數評價的限制范圍及單項評分如下：霉菌含量為0-1×102cfu/g，評分為1；霉菌含量為1×102-1×103cfu/g，評分為2；霉菌含量為1×103-1×104cfu/g，評分為3；霉菌含量為1×104-1×106cfu/g，評分為4；霉菌含量為1×106cfu/g以上，評分為5。
15、作為進一步地改進，利用氣相離子遷移譜儀測定進行霉變煙葉中揮發性成分分析評價。
16、作為進一步地改進，所述霉變煙葉中揮發性成分分析評價的限制范圍及單項評分如下：利用歸一化法對霉變標記性成分進行分析，霉變的標記性成分相對含量為0-12％，評分為1；霉變的標記性成分相對含量為12％-16％，評分為2；霉變的標記性成分相對含量為16％-17.5％，評分為3；霉變的標記性成分相對含量為17.5％-19％，評分為4；霉變的標記性成分相對含量為19％-20％，評分為5。
17、作為進一步地改進，所述霉變的標記性成分為2-乙基己醇、2-甲基丙醇、糠醛、e-2-戊烯醛、3-甲基-2-丁烯醛-d、3-戊酮、2-丁酮、2,5-二甲基噻吩。
18、作為進一步地改進，步驟(2)中所述計算公式為各關鍵評價指標的單項評分與其對應權重乘積之和的4倍；所述計算公式如下：a＝(0.2×視覺評價指標得分+0.25×嗅評價指標得分+0.25×菌落評價指標得分+0.3×霉變煙葉中揮發性成分分析評價指標得分)×4，其中a為霉菌致霉能力的綜合得分。
19、具體地，在平均分配權重的基礎上有側重的調整。首先視覺和嗅覺評價具有主觀性，而視覺評價的客觀反映對應是菌落計數評價，嗅覺評價的客觀反映對應是霉變煙葉中揮發性成分分析評價，因此整體遵從主觀權重低于客觀權重的原則。另外，在雪茄煙本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：雪茄煙葉中霉菌分離后回接侵染，然后進行包括如下步驟的霉菌致霉能力的評價：
2.根據權利要求1所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述視覺評價的限制范圍及單項評分如下：霉變面積在0%-20%，評分為1；霉變面積在20%-40%，評分為2；霉變面積在40%-60%，評分為3；霉變面積在60%-80%，評分為4；霉變面積在80%-100%，評分為5。
3.根據權利要求1所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：根據霉變后發霉的氣味大小進行所述嗅覺評價。
4.根據權利要求3所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述嗅覺評價的限制范圍及單項評分如下：霉味程度打分為0-20%，評分為1；霉味程度打分為20-40%，評分為2；霉味程度打分為40-60%，評分為3；霉味程度打分為60-80%，評分為4；霉味程度打分為80-100%，評分為5。
5.根據權利要求1所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：根據GB4789.15-2016進行菌落計數評價。
6.根據權利要求5所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述菌落計數評價的限制范圍及單項評分如下：霉菌含量為0-1×102?CFU/g，評分為1；霉菌含量為1×102-1×103?CFU/g，評分為2；霉菌含量為1×103-1×104?CFU/g，評分為3；霉菌含量為1×104-1×106?CFU/g，評分為4；霉菌含量為1×106?CFU/g以上，評分為5。
7.根據權利要求1所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：利用氣相離子遷移譜儀測定進行霉變煙葉中揮發性成分分析評價。
8.根據權利要求7所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述霉變煙葉中揮發性成分分析評價的限制范圍及單項評分如下：利用歸一化法對霉變標記性成分進行分析，霉變的標記性成分相對含量為0-12%，評分為1；霉變的標記性成分相對含量為12%-16%，評分為2；霉變的標記性成分相對含量為16%-17.5%，評分為3；霉變的標記性成分相對含量為17.5%-19%，評分為4；霉變的標記性成分相對含量為19%-20%，評分為5。
9.根據權利要求8所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述霉變的標記性成分為2-乙基己醇、2-甲基丙醇、糠醛、E-2-戊烯醛、3-甲基-2-丁烯醛-D、3-戊酮、2-丁酮、2,5-二甲基噻吩。
10.根據權利要求1~9任一項所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：步驟（2）中所述計算公式為各關鍵評價指標的單項評分與其對應權重乘積之和的4倍；所述計算公式如下：A=（0.2×視覺評價指標得分+0.25×嗅評價指標得分+0.25×菌落評價指標得分+0.3×霉變煙葉中揮發性成分分析評價指標得分）×4，其中A為霉菌致霉能力的綜合得分。
11.根據權利要求10所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：步驟（3）中霉菌在雪茄煙葉上致霉能力強弱的等級及賦值范圍如下：17≤A≤20，致霉能力極強；12≤A＜17，致霉能力較強；8≤A＜12，致霉能力中等；6≤A＜8，致霉能力較弱；4≤A＜6，致霉能力極弱。
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【技術特征摘要】
1.一種評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：雪茄煙葉中霉菌分離后回接侵染，然后進行包括如下步驟的霉菌致霉能力的評價：
2.根據權利要求1所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述視覺評價的限制范圍及單項評分如下：霉變面積在0%-20%，評分為1；霉變面積在20%-40%，評分為2；霉變面積在40%-60%，評分為3；霉變面積在60%-80%，評分為4；霉變面積在80%-100%，評分為5。
3.根據權利要求1所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：根據霉變后發霉的氣味大小進行所述嗅覺評價。
4.根據權利要求3所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述嗅覺評價的限制范圍及單項評分如下：霉味程度打分為0-20%，評分為1；霉味程度打分為20-40%，評分為2；霉味程度打分為40-60%，評分為3；霉味程度打分為60-80%，評分為4；霉味程度打分為80-100%，評分為5。
5.根據權利要求1所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：根據gb4789.15-2016進行菌落計數評價。
6.根據權利要求5所述的評價雪茄煙葉中霉菌致霉能力的方法，其特征在于：所述菌落計數評價的限制范圍及單項評分如下：霉菌含量為0-1×102?cfu/g，評分為1；霉菌含量為1×102-1×103?cfu/g，評分為2；霉菌含量為1×103-1×104?cfu/g，評分為3；霉菌含量為1×104-1×106?cfu/g，評分為4；霉菌含量為1×106?cfu/g以上，評分為5。
7.根據權利要求1所述...
【專利技術屬性】
技術研發人員：黃闊，張鴿，郜曉妍，葉長文，劉丹丹，牛晨啟，李棟，李青常，劉萌萌，陳志浩，陳宸，牛佳佳，
申請(專利權)人：中國煙草總公司鄭州煙草研究院，
類型：發明
國別省市：
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