【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
技術(shù)介紹
1、新血管形成(nv)和血管滲漏是多種視網(wǎng)膜新生血管疾病的標(biāo)志，例如糖尿病性黃斑水腫(dme)、濕性年齡相關(guān)性黃斑變性(amd)和糖尿病性視網(wǎng)膜病變(dr)。
2、vegf在調(diào)節(jié)血管生成和血管通透性中起著關(guān)鍵的作用，血管生成是眼睛nv的主要機制，血管通透性決定了滲漏的程度，因此vegf是多種疾病的有效靶標(biāo)。
3、廣泛的研究證明了ang2/tie2通路是補充vegf的重要的參與者，有著巨大的潛力作為治療多種疾病如視網(wǎng)膜疾病的新靶標(biāo)。據(jù)報道，tie2是血管生成素-1(ang1)和血管生成素-2(ang2)兩者的酪氨酸激酶受體，位于血管內(nèi)皮細胞的表面上。ang2只在病理條件下才表達。它通過促進血管通透性和刺激促血管生成細胞因子的分泌來補充vegf的功能，這些促血管生成細胞因子是vegf誘發(fā)的眼睛nv和血管滲漏所需的。
4、當(dāng)前的抗vegf藥物盡管獲得了成功，但功效和持續(xù)時間仍然有限。增加抗vegf劑的劑量可改良藥物的效力和持續(xù)時間。核酸適體的溶解度高，分子量小(15kda)，因此可實現(xiàn)高得多的摩爾劑量。
5、然而，先前的抗vegf適體，例如無法實現(xiàn)這一潛能。無法識別所有的vegfa同種型，因此效力較低。所以，急需開發(fā)比本領(lǐng)域中的適體更有效的適體。
6、正需要開發(fā)靶向vegf和/或ang2的適體，它們更具特異性、親和力更高和/或更有效。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本公開提供了抗vegf適體、抗ang2適體、包含所述抗vegf適
2、本公開中提供的抗vegf適體能夠進行以下中的至少一個：1)以約20納摩爾(nm)或更小的kd值結(jié)合于所有的vegfa同種型(例如vegf-121、vegf-165和vegf?189)；2)形成特定的二級結(jié)構(gòu)，所述二級結(jié)構(gòu)從5'到3'方向包含第一莖、第一環(huán)、第二莖和第二環(huán)；3)被配制成高達200mg/ml或更高的濃度；4)對核酸酶具有抗性；5)結(jié)合于來自多種物種的vegfa同種型，例如人vegf、小鼠vegf、大鼠vegf、兔vegf和猴子vegf；6)抑制vegf與vegf受體之間的相互作用；以及7)預(yù)防、治療和/或改善新生血管性疾病、病癥或病狀。
3、本公開中提供的抗ang2適體能夠進行以下中的至少一個：1)以約500皮摩爾(pm)或更小的kd值結(jié)合于ang2；2)基本上不結(jié)合于人ang1；3)形成特定的二級結(jié)構(gòu)，所述二級結(jié)構(gòu)從5'到3'方向包含第一莖、第一隆突、第二莖、第二隆突、第三莖、第三隆突、第四莖和第一環(huán)；4)結(jié)合于人ang2與小鼠ang2兩者；5)對核酸酶具有抗性；6)抑制ang2與tie2之間的相互作用；以及7)預(yù)防、治療和/或改善新生血管性疾病、病癥或病狀。
4、本公開中提供的雙特異性適體和/或組合物能夠進行以下中的至少一個：1)以約20納摩爾(nm)或更小的kd值結(jié)合于所有的vegfa同種型(例如vegf-121、vegf-165和vegf189)；2)以約500皮摩爾(pm)或更小的kd值結(jié)合于ang2；3)對核酸酶具有抗性；4)抑制ang2與tie2之間的相互作用；5)抑制vegf與vegf受體之間的相互作用；以及6)預(yù)防、治療和/或改善新生血管性疾病、病癥或病狀。
5、抗vegf適體
6、在一方面，本公開提供了一種抗vegf適體，其以約20納摩爾(nm)或更小的kd值結(jié)合于vegf-121，并以約20納摩爾(nm)或更小的kd值結(jié)合于vegf-165。
7、在一些實施方案中，抗vegf適體以約2納摩爾(nm)或更小的kd值結(jié)合于vegf-121。在一些實施方案中，抗vegf適體以約2納摩爾(nm)或更小的kd值結(jié)合于vegf-165。
8、在一些實施方案中，vegf-121是人vegf-121、小鼠vegf-120、猴vegf-121、兔vegf-121和/或大鼠vegf-120。在一些實施方案中，vegf-165是人vegf-165、小鼠vegf-164、猴vegf-165、兔vegf-165和/或大鼠vegf-164。在一些實施方案中，抗vegf適體結(jié)合于vegf-189，例如兔vegf-189。
9、在一些實施方案中，抗vegf適體特異性結(jié)合于vegf-121的vegf受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域或其片段和vegf-165的vegf受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域或其片段兩者。
10、在一些實施方案中，vegf-121的vegf受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如seq?id?no:30-34、40、41和45中的任一者中所示的氨基酸序列。在一些實施方案中，vegf-165的vegf受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如seq?id?no:30-34、40和41中的任一者中所示的氨基酸序列。
11、在一些實施方案中，抗vegf適體抑制所述vegf-121與vegf-r1之間的相互作用。在一些實施方案中，抗vegf適體抑制所述vegf-121與vegf-r2之間的相互作用。
12、在一些實施方案中，抗vegf適體抑制所述vegf-165與vegf-r1之間的相互作用。在一些實施方案中，抗vegf適體抑制所述vegf-165與vegf-r2之間的相互作用。
13、在一些實施方案中，抗vegf適體在激光誘導(dǎo)的脈絡(luò)膜新血管形成(cnv)大鼠模型中能夠減少和/或改善損傷和/或滲漏。
14、在一些實施方案中，抗vegf適體在非人靈長類動物(nhp)激光誘導(dǎo)的cnv模型中能夠減少和/或改善損傷和/或滲漏。
15、在一些實施方案中，抗vegf適體高度可溶。
16、在一些實施方案中，抗vegf適體是rna適體、dna適體或它們的組合。在一些實施方案中，抗vegf適體包含一個或多個修飾核苷酸。在一些實施方案中，抗vegf適體對核酸酶具有抗性。在一些實施方案中，抗vegf適體的所有核苷酸均是修飾核苷酸。在一些實施方案中，這類修飾核苷酸在獨立地選自核糖位置、脫氧核糖位置、磷酸位置和堿基位置的一個或多個位置處包含化學(xué)取代或修飾。在一些實施方案中，修飾核苷酸包含一個或多個獨立地選自以下的修飾：2′-位置糖修飾、2′-氨基(2'-nh2)修飾、2′-氟(2'-f)修飾、2′-o-甲基(2′-ome)修飾、2′-o-(2-甲氧基乙基)(2'-o-moe)修飾、5-位置修飾嘧啶、胞嘧啶環(huán)外胺處的修飾、經(jīng)5'-溴尿嘧啶取代、經(jīng)5'-溴脫氧尿苷取代、經(jīng)5'-溴脫氧胞苷取代、骨架修飾、鎖核酸(lna)、甲基化、3′帽和5'帽。在一些實施方案中，5-位置修飾嘧啶選自5-羧基-2'-脫氧尿苷、5-氨基烯丙基-2'-脫氧尿苷、5-[(3-吲哚基)丙酰胺-n-烯丙基]-2'-脫氧尿苷、5-羧基-2'-脫氧胞苷、5-氨基烯丙基-2'-脫氧胞苷、生物素-16-氨基烯丙基-2'-脫氧胞苷、5-(n-苯甲基羧酰胺)-2'-脫氧尿苷、5-(n-異丁基羧酰胺)-2′-脫氧尿苷、5-本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
1.一種抗VEGF適體，其為如SEQ?ID?NO:128、SEQ?ID?NO:200-201中的任一者中所示的核苷酸序列。
2.一種藥劑，其包含如權(quán)利要求1所述的抗VEGF適體，其中所述抗VEGF適體綴合于聚乙二醇(PEG)部分。
3.如權(quán)利要求2所述的藥劑，其中至少一個PEG部分綴合于所述抗VEGF適體的5'端。
4.如權(quán)利要求3中所述的藥劑，其中至少一個PEG部分綴合于所述抗VEGF適體的3'端。
5.一種雙特異性適體，其為如SEQ?ID?NO:171、202-204中的任一者中所示的核苷酸序列。
6.一種組合物，其包含如權(quán)利要求1所述的抗VEGF適體和/或如權(quán)利要求5所述的雙特異性適體。
7.如權(quán)利要求6所述的組合物，其是藥物組合物。
8.如權(quán)利要求7所述的組合物，其包含藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體。
9.如權(quán)利要求5所述的雙特異性適體和/或如權(quán)利要求6-8中任一項所述的組合物的用途，用于制造供治療年齡相關(guān)性黃斑變性、脈絡(luò)膜新血管形成、糖尿病性黃斑水腫、視網(wǎng)膜靜脈阻塞和糖尿病性視網(wǎng)
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種抗vegf適體，其為如seq?id?no:128、seq?id?no:200-201中的任一者中所示的核苷酸序列。
2.一種藥劑，其包含如權(quán)利要求1所述的抗vegf適體，其中所述抗vegf適體綴合于聚乙二醇(peg)部分。
3.如權(quán)利要求2所述的藥劑，其中至少一個peg部分綴合于所述抗vegf適體的5'端。
4.如權(quán)利要求3中所述的藥劑，其中至少一個peg部分綴合于所述抗vegf適體的3'端。
5.一種雙特異性適體，其為如seq?id?no:1...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王金鵬，宮強，康惠，楊琴，布瑞恩·S·弗格森，
申請(專利權(quán))人：愛普濟德生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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