【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及食品安全檢測，具體的說，是通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法。
技術(shù)介紹
1、獸藥通常用于治療和控制疾病，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中用作生長促進劑和飼料增效劑(adou?et?al.2001,bacanli?et?al.2019)。近來，有獸藥使用不當和過度使用的情況記錄在案。據(jù)估計，約有80％的食用動物在一生中的部分或大部分時間都在接受獸藥治療(leeet?al.2001)。長期食用這些產(chǎn)品可能會對人類健康產(chǎn)生一系列不利影響，包括過敏反應、致癌、器官功能障礙、抗菌藥耐藥性和其他有害結(jié)果(hosain?et?al.2021,ferdous?etal.2019)。動物源性食品中獸藥種類繁多，相關標準和限量要求更新迅速。育亨賓是一種α2-腎上腺素能受體拮抗劑，用于獸醫(yī)領域，以逆轉(zhuǎn)α2-受體激動劑、甲苯噻嗪和地托咪定的作用。(dimaio?knych?et?al.2011)。然而，目前的檢測方法主要針對植物藥、樹皮和膳食補充劑(sun?et?al.2012,lucas?et?al.2015,quiroz-delfi?et?al.2024)，對動物源性食品基質(zhì)中這種物質(zhì)的檢測研究較少。而韓國政府規(guī)定的鹿肉中育亨賓的最大殘留限量為0.01mg/kg。此外，目前還沒有足夠的公開報道涉及使用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(hplc-ms/ms)方法檢測動物源食品中的美托咪酯殘留量。不過，韓國政府已將豬肉中的最高殘留量(mrl)設定為0.01mg/kg(korean?ministry?offood
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的在于提供通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，為一種測定雞肉、牛肉、魚和蝦中育亨賓、美托咪酯、曲吡那敏等17種新獸藥殘留的hplc-ms/ms方法，能夠規(guī)避因藥物殘留問題造成的貿(mào)易壁壘和經(jīng)濟損失。該方法符合韓國、加拿大和美國最新的食品安全法規(guī)和限量要求。
2、本專利技術(shù)通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)：通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，包括下述步驟：
3、1)利用17種新型獸藥化合物的標準品配置不同濃度的標準儲備溶液、混合標準工作儲備液；并利用標準儲備溶液配制系列工作標準溶液，用于hplc-ms/ms檢測；
4、2)將混合標準工作儲備液加入提取凈化后的空白樣品殘留物中，配置出不同濃度的基質(zhì)匹配系列混合標準溶液，過濾后上機待測；
5、3)將所取牛(肌肉)、雞(肌肉)、魚(魚皮和肌肉)、對蝦(肌肉)的樣品均質(zhì)，并進行后續(xù)處理，將所得進行hplc-ms/ms在線分析。
6、進一步為更好地實現(xiàn)本專利技術(shù)所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，特別采用下述設置方式：所述步驟1)包括下述具體步驟：
7、1.1)在10ml容量瓶中準確稱取0.01g丁喹酯標準品，加入甲醇溶解并稀釋至刻度；配制質(zhì)量濃度為1000μg/ml的標準儲備溶液，避光保存在-20℃下；
8、1.2)用移液槍準確移取剩余16種標準品，各1ml，加入甲醇或乙腈，使單個最終體積達到10ml；配制質(zhì)量濃度為10μg/ml或100μg/ml的剩余標準品的標準儲備溶液，儲存在-20℃黑暗環(huán)境中，備用；
9、1.3)精確測量適量的標準儲備溶液，用甲醇稀釋，配制成質(zhì)量濃度為1μg/ml的混合標準工作儲備液；隨后，配制出一系列濃度分別為2、4、10、20、50、200和400ng/ml的工作標準溶液，用于hplc-ms/ms檢測。
10、進一步為更好地實現(xiàn)本專利技術(shù)所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，特別采用下述設置方式：所述步驟2)具體為：
11、將混合標準工作儲備液定量加入7份提取純化的空白樣品殘留物中，45℃氮氣環(huán)境下吹干；1ml甲醇，渦旋溶解，配制成基質(zhì)匹配系列混合標準溶液，過0.22μm濾膜上機待測；以測得的特征離子峰面積為縱坐標，相應的標準溶液濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
12、進一步為更好地實現(xiàn)本專利技術(shù)所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，特別采用下述設置方式：所述基質(zhì)匹配系列混合標準溶液的濃度分別為2、4、10、20、50、200和400ng/ml。
13、進一步為更好地實現(xiàn)本專利技術(shù)所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，特別采用下述設置方式：所述步驟3)具體包括下述步驟：
14、3.1)將所取牛(肌肉)、雞(肌肉)、魚(魚皮和肌肉)、對蝦(肌肉)的樣品在均質(zhì)器中均質(zhì)，并保存在-20℃下；
15、3.2)在50ml塑料離心管中準確稱取2g均質(zhì)后樣品，加入8ml乙腈：水(85:15)和1gma2so4；樣品振蕩提取5min，充分混合，然后用超聲波水浴提取15min；然后將其冷凍，在10,000rpm和4℃下離心5min；
16、3.3)經(jīng)步驟3.2)后，上清液裝入hlb小柱，然后收集所有洗脫液；隨后，加入2ml乙腈沖洗；合并兩份洗脫液，45℃氮氣環(huán)境下蒸發(fā)至干；準確加入1ml甲醇，渦旋溶解殘留物，過0.22μm微孔膜過濾，進行hplc-ms/ms在線分析。
17、進一步為更好地實現(xiàn)本專利技術(shù)所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，特別采用下述設置方式：所述步驟3.2)中，乙腈：水為85：15。
18、進一步為更好地實現(xiàn)本專利技術(shù)所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，特別采用下述設置方式：在進行hplc-ms/ms在線分析本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
1.通過式固相萃取結(jié)合HPLC-MS/MS法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：包括下述步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過式固相萃取結(jié)合HPLC-MS/MS法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所述步驟1)包括下述具體步驟：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過式固相萃取結(jié)合HPLC-MS/MS法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所述步驟2)具體為：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的通過式固相萃取結(jié)合HPLC-MS/MS法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所述基質(zhì)匹配系列混合標準溶液的濃度分別為2、4、10、20、50、200和400ng/mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的通過式固相萃取結(jié)合HPLC-MS/MS法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所述步驟3)具體包括下述步驟：
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過式固相萃取結(jié)合HPLC-MS/MS法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過式固相萃取結(jié)合HPLC-MS/MS法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：在進行HPLC-MS/MS在線分析時，
...【技術(shù)特征摘要】
1.通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：包括下述步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所述步驟1)包括下述具體步驟：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所述步驟2)具體為：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的通過式固相萃取結(jié)合hplc-ms/ms法快速測定動物源食品中的17種新型獸藥化合物的方法，其特征在于：所述基質(zhì)匹配系列...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：茍圓，董偉，劉俊，孫千然，
申請(專利權(quán))人：成都海關技術(shù)中心，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。