【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及醫(yī)學領(lǐng)域，尤其涉及一種缺血性腦卒中新發(fā)房顫小鼠模型的建立方法。
技術(shù)介紹
1、心房顫動(房顫)是最常見的心律失常之一。若不及時治療，房顫可引發(fā)一系列嚴重的并發(fā)癥，如心衰、心肌梗塞等，極大增加了患者的致死率和致殘率。當前，關(guān)于房顫的發(fā)病機制尚未完全明確，研究表明缺血性腦卒中與房顫的發(fā)生密切相關(guān)。然而，現(xiàn)有的動物模型存在諸多局限性：大型動物模型(如羊、犬)操作復雜、造模時間長且成本高昂；藥物誘導方法雖較為常用，但無法準確模擬臨床房顫的病理過程。
2、因此，開發(fā)一種操作簡便、成本低且能準確模擬腦卒中后房顫的小鼠模型具有重要的科研價值。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、為解決上述技術(shù)問題，本專利技術(shù)提供以下技術(shù)方案。
2、第一方面，本專利技術(shù)提供一種缺血性腦卒中新發(fā)房顫小鼠模型的建立方法。
3、一種缺血性腦卒中新發(fā)房顫小鼠模型的建立方法，其包括對小鼠采取以下處理步驟：
4、(1)腦缺血處理；
5、(2)行為學測評；
6、(3)將行為學測評顯示造模成功的小鼠正常飼養(yǎng)3天；
7、(4)測量步驟(3)后的小鼠閾刺激：用脈沖電流刺激所述步驟(3)正常飼養(yǎng)3天后的小鼠，所述脈沖電流的電流頻率為小鼠的基礎(chǔ)心率的1.1倍，每次刺激5秒，脈沖電流刺激強度從0.3ma開始逐漸增加，每次增加0.1ma，直至每個p波都被刺激波(刺激波：由脈沖電流導致的小鼠心電圖上出現(xiàn)的波動)所替代，得到閾刺激電流強度；
8、(5)程
9、在一些實施例中，所述步驟(1)的腦缺血處理包括對小鼠采用頸動脈線栓45分鐘至1小時。在一些實施例中，所述步驟(1)的腦缺血處理包括對小鼠采用頸動脈線栓45分鐘、50分鐘、55分鐘或1小時。
10、在一些實施例中，所述步驟(1)的腦缺血處理包括：麻醉，頸部脫毛，頸部切開切口，鈍性分離使頸總動脈及迷走神經(jīng)顯露，用頸動脈線栓處理小鼠頸內(nèi)動脈45分鐘至1小時，退出頸動脈線栓，恢復血液流通，縫合。
11、在一些實施例中，所述行為學測評包括：在步驟(1)處理后3h，對小鼠進行行為學測評，所述行為學測評采用zea?longa?5分制評分標準，
12、其中，
13、活動正常為0分，表示無神經(jīng)損傷體征；
14、提尾實驗時不能完全伸展對側(cè)前肢為1分，表示輕度局灶性損傷；
15、行走時向?qū)?cè)旋轉(zhuǎn)為2分，表示中度局灶性損傷；
16、休息時向?qū)?cè)傾倒為3分，表示重度局灶性損傷；
17、無自主活動，伴意識障礙為4分，表示極重度局灶性損傷；
18、死亡為5分；
19、分數(shù)為1分-4分為造模成功。
20、在一些實施例中，所述步驟(4)和步驟(5)采用食道電極導管進行刺激。
21、在一些實施例中，所述步驟(4)和步驟(5)的刺激的電流采用波寬為1ms的方波。
22、在一些實施例中，所述步驟(4)和步驟(5)的刺激采用s1s1刺激模式。
23、在一些實施例中，所述步驟(5)包括：采用2倍閾刺激強度，以40hz的頻率進行5次刺激，每次持續(xù)15秒，刺激間隔為3分鐘，保持每次間隔一致。
24、在一些實施例中，所述小鼠為c57小鼠。
25、第二方面，本專利技術(shù)提供一種前述建立方法的應(yīng)用。
26、一種第一方面所述建立方法構(gòu)建所得缺血性腦卒中新發(fā)房顫小鼠模型在腦血管病與心臟疾病的機制研究和/或在制備用于預防或治療與缺血性腦卒中新發(fā)房顫相關(guān)的疾病的藥物中的應(yīng)用。
27、有益效果
28、相比現(xiàn)有技術(shù)，本專利技術(shù)某一實施例至少具有以下一種有益效果：
29、(1)本專利技術(shù)所提供的建立方法建立所得缺血性腦卒中新發(fā)房顫小鼠模型穩(wěn)定、可靠、成功率高、成本低、造模時間短。
30、(2)本專利技術(shù)所提供的模型相比于其他模型，更還原人類的病理模型(腦缺血)誘發(fā)的房顫，且不需要穿戴式設(shè)備，普通的心電圖檢測即可。
31、(3)本專利技術(shù)的創(chuàng)新點在于將腦缺血這種病理模型于相結(jié)合，通過還原人類的疾病，從而以此引發(fā)出房顫的病理模型，這種模型相比于其他的迷走神經(jīng)刺激，脂多糖注射等更貼近人類會面臨的疾病狀態(tài)。
32、(4)程序性電刺激以誘發(fā)房顫時，相比其他電流頻率(如10hz、20hz、30hz、50hz)，采用40hz的脈沖電流更有利于提高房顫成功率、房顫次數(shù)和房顫總持續(xù)時間，具有預料不到的技術(shù)效果。
33、(5)對于行為學測評顯示造模成功的小鼠正常飼養(yǎng)時間，相比其他正常飼養(yǎng)時間，采用正常飼養(yǎng)3天更有利于提高房顫成功率、房顫次數(shù)和房顫總持續(xù)時間，具有預料不到的技術(shù)效果。
34、(6)相比采用其他頸動脈線栓處理時間，本專利技術(shù)采用45分鐘至1小時的頸動脈線栓處理時間更有利于提高房顫成功率、房顫次數(shù)和房顫總持續(xù)時間，具有預料不到的技術(shù)效果。
35、術(shù)語說明
36、在本專利技術(shù)的描述中，術(shù)語“室溫”表示環(huán)境溫度，指溫度在大約10℃至大約30℃，或大約20℃至30℃，或大約25℃。
37、術(shù)語“wt％”表示質(zhì)量百分比。
38、術(shù)語“w/w”表示質(zhì)量比。
39、術(shù)語“s1s1刺激模式”是一種周期性刺激方式，即用頻率固定、間隔一致的刺激脈沖連續(xù)作用于心臟。通常這個頻率接近或略高于自然心率，用來模仿正常的心臟節(jié)律。其中，“s1刺激”表示正常的刺激脈沖，在一組脈沖中，每個脈沖之間的間隔(s1-s1)是恒定的。通過控制s1-s1的間隔時間，可以探查心臟在不同速率下的反應(yīng)。
40、術(shù)語“p波”表示心房除極波。
41、在本說明書的描述中，參考術(shù)語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點包含于本專利技術(shù)的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進行結(jié)合和組合。
42、在下面的內(nèi)容中，無論是否使用“大約”或“約”等字眼，所有在此公開了的數(shù)字均為近似值。每一個數(shù)字的數(shù)值有可能會出現(xiàn)1％、2％、5％、7％、8％、10％、15％或20％等差異。每當公開一個具有n值的數(shù)字時，任何具有n+/-1％,n+/-2％,n+/-3％,n+/-5％,n+/-7％,n+/-8％,n+/-10％,n+/-15％or?n+/-20％值的數(shù)字會被明確地公開,其中“+/-”是指加或減。
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1.一種缺血性腦卒中新發(fā)房顫小鼠模型的建立方法，其特征在于，包括對小鼠采取以下處理步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，所述步驟(1)的腦缺血處理包括對小鼠采用頸動脈線栓45分鐘至1小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項所述的建立方法，所述行為學測評包括：在步驟(1)處理后3h，對小鼠進行行為學測評，所述行為學測評采用Zea?Longa?5分制評分標準，
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的建立方法，所述步驟(4)和步驟(5)采用食道電極導管進行刺激。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的建立方法，所述步驟(4)和步驟(5)的刺激的電流采用波寬為1ms的方波。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的建立方法，所述步驟(4)和步驟(5)的刺激采用S1S1刺激模式。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的建立方法，所述步驟(5)包括：采用2倍閾刺激強度，以40Hz的頻率進行5次刺激，每次持續(xù)15秒，刺激間隔為3分鐘，保持每次間隔一致。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的建立方法，所述小鼠為C57小鼠。
<...【技術(shù)特征摘要】
1.一種缺血性腦卒中新發(fā)房顫小鼠模型的建立方法，其特征在于，包括對小鼠采取以下處理步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，所述步驟(1)的腦缺血處理包括對小鼠采用頸動脈線栓45分鐘至1小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項所述的建立方法，所述行為學測評包括：在步驟(1)處理后3h，對小鼠進行行為學測評，所述行為學測評采用zea?longa?5分制評分標準，
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的建立方法，所述步驟(4)和步驟(5)采用食道電極導管進行刺激。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的建立方法，所述步驟(4)和步驟(5)的刺激的電流...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：史東宇，
申請(專利權(quán))人：海南大學，
類型：發(fā)明
國別省市：
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