【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及化學分析，具體為一種黃體酮注射液含量檢測方法。
技術介紹
1、黃體酮為類固醇激素合成的中間代謝物，是最重要的天然孕激素。而在醫療領域中，黃體酮注射液用于治療月經失調，如閉經和功能性子宮出血、黃體功能不足、先兆流產和習慣性流產、經前期緊張性綜合癥的治療。黃體酮注射液，適應癥為用于月經失調，如閉經和功能性子宮出血、黃體功能不足、先兆流產和習慣性流產、經前期緊張綜合癥的治療。黃體酮注射液為黃體酮的滅菌油溶液，主要成分為黃體酮，輔料為注射用油，以及抑菌劑苯甲醇。隨著藥品研發水平的提升以及相關制劑的不良反應日益被關注，藥物從業人員對制劑產品中的有關物質的關注度也在日漸提高。
2、黃體酮注射液注射含量高會導致頭暈頭痛、尋麻疹、乳房腫脹、長期連續應用可月經減少或閉經、肝功能異常、浮腫、體重增加等，所以人們需要對注射液中黃體酮含量有必要的認知。對于最大日劑量為100mg的黃體酮注射液，在藥品中因注射劑型是直接入血或肌肉，安全風險等級較高，更需要對其中主要成分的黃體酮進行含量檢測，方便注射者和被注射者對黃體酮含量了解，進而便于對注射液進行控量。
3、經查詢現有技術，未查到專利網對黃體酮的測定方法進行撰寫，我們需要一種新分析方法，方便相關實驗操作者用于檢測黃體酮的含量測定，尤其適合用于黃體酮注射液的黃體酮的含量的檢測。
4、針對上述問題，為此，提出一種黃體酮注射液含量檢測方法。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種黃體酮注射液含量檢測方法，采
2、為實現上述目的，本專利技術提供如下技術方案：一種黃體酮注射液含量檢測方法，包括如下主要步驟；
3、步驟一：將供試品和內標物制備成甲醇溶液，通過高效液相色譜儀進行色譜分離，利用紫外吸收檢測器在254nm波長處，檢測黃體酮和內標己烯雌酚的吸收值，通過計算吸收值，得出黃體酮的含量；所需試劑包括甲醇和乙醚；
4、步驟二：試樣制備步驟包括精密量取供試品，精確稱取對照品制備溶液，以及內標溶液的制備，將供試品用乙醚清洗并稀釋，再用甲醇提取并添加內標溶液，得到供試品溶液；
5、步驟三：操作步驟是精密吸取供試品和對照品溶液5μl，注入高效液相色譜儀，測量254nm波長下的吸收值，根據內標法計算黃體酮含量；
6、采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數按黃體酮峰計算應不低于1000，黃體酮峰與內標物質峰的分離度應符合要求；
7、所述步驟二中試樣制備：取供試品溶液，用內容量移液管精密量取本品適量，相當于黃體酮50mg，置50ml量瓶中；對照品溶液的制備：精密稱取黃體酮對照品適量，加甲醇溶解并稀釋成溶液。
8、儀器設備包括高效液相色譜儀，配備十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，要求黃體酮峰的理論板數至少為1000，峰間分離度符合標準，另外還需要紫外吸收檢測器。
9、色譜條件，需要流動相為甲醇和水的65:35比例，檢測波長為254nm，柱溫保持室溫。
10、所述內標溶液的制備：取己烯雌酚25mg，置25ml量瓶中，加稀甲醇溶解并稀釋至刻度，即得。
11、所述供試品溶液的制備：供試品用乙醚分數次洗滌移液管內壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀釋至刻度；
12、搖勻；精密量取5ml置具塞離心管中，在溫水浴內使乙醚揮散；
13、用甲醇振搖提取4次，每次振搖10分鐘后，離心15分鐘，并用滴管將甲醇移置25ml量瓶中，合并提取液，精密加內標溶液5ml，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。
14、所述黃體酮的高效液相分析方法在黃體酮注射液中的應用，本方法適用黃體酮注射液，本方法采用高效液相色譜法測定黃體酮注射液中黃體酮的含量。
15、與現有技術相比，本專利技術的有益效果如下：
16、1、本申請中根據黃體酮的理化性質，開發了一套高效液相色譜體系對其進行測定，用于測定黃體酮注射液中的黃體酮含量，這種方法專門適用于黃體酮注射液的分析，原理將供試品和內標物制備成甲醇溶液，通過高效液相色譜儀進行色譜分離，利用紫外吸收檢測器在254nm波長處檢測黃體酮和內標己烯雌酚的吸收值，通過計算吸收值得出黃體酮的含量，所需試劑包括甲醇和乙醚，儀器設備主要包括高效液相色譜儀，配備十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，要求黃體酮峰的理論板數至少為1000，峰間分離度符合標準，另外，還需要紫外吸收檢測器；檢測波長的篩選，經紫外全掃，黃體酮的紫外吸收基本接近末端吸收，根據流動相比例的篩選，最終確定選擇保留時間適中且各種物質對黃體酮的檢測。本方法填補了用液相色譜方法檢測黃體酮的空白，該檢測方法可用于黃體酮含量和有關物質的檢測，并可用于指導穩定性樣品的考察，在后期注射，在黃體酮注射液因注射劑型是直接入血或肌肉，方便注射者和被注射者對黃體酮含量了解，進而便于對注射液進行控量，提升黃體酮注射液使用的安全性。
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1.一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于，包括如下主要步驟，
2.根據權利要求1所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數按黃體酮峰計算應不低于1000，黃體酮峰與內標物質峰的分離度應符合要求；
3.根據權利要求2所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：儀器設備包括高效液相色譜儀，配備十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，要求黃體酮峰的理論板數至少為1000，峰間分離度符合標準，另外還需要紫外吸收檢測器。
4.根據權利要求3所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：色譜條件，需要流動相為甲醇和水的65:35比例，檢測波長為254nm，環境保持室溫。
5.根據權利要求4所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：所述內標溶液的制備：取己烯雌酚25mg，置25mL量瓶中，加稀甲醇溶解并稀釋至刻度，即得。
6.根據權利要求5所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：所述供試品溶液的制備：供試品用乙醚分數次洗滌移液管內壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀釋至刻度；
...【技術特征摘要】
1.一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于，包括如下主要步驟，
2.根據權利要求1所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數按黃體酮峰計算應不低于1000，黃體酮峰與內標物質峰的分離度應符合要求；
3.根據權利要求2所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：儀器設備包括高效液相色譜儀，配備十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，要求黃體酮峰的理論板數至少為1000，峰間分離度符合標準，另外還需要紫外吸收檢測器。
4.根據權利要求3所述的一種黃體酮注射液含量檢測方法，其特征在于：色譜條件，需要流動相為甲醇和水的65:...
【專利技術屬性】
技術研發人員：田玉林，王夢涵，黃艷玲，胡惠珊，
申請(專利權)人：華中藥業股份有限公司，
類型：發明
國別省市：
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