【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及動物飼料，具體為一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料及其制備方法。
技術介紹
1、地衣芽孢桿菌是一種常見的益生菌，具有多種生理活性和營養功能。其發酵產物可用作飼料添加劑，用于改善動物的消化吸收能力、增強免疫力和促進生長發育。地衣芽孢桿菌發酵混合飼料是將地衣芽孢桿菌與其他飼料成分混合發酵得到的一種營養豐富的飼料。
2、隨著畜牧業的發展和人們對動物營養需求的不斷增加，地衣芽孢桿菌發酵混合飼料成為一種具有廣闊市場前景的新型飼料。它能夠提高動物的生產性能、減少飼料的浪費、改善肉質品質等方面具有重要作用。然而，部分地衣芽孢桿菌發酵混合飼料存在著其他成分配比不合理的問題，導致營養成分不均衡，從而影響動物的飲食攝入和生長發育。此外，飼料中添加的酶容易受到溫度、ph值和抗生素等因素的影響，導致其活性和穩定性降低，從而影響發酵效率。
3、因此，我們提出一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料及其制備方法。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料及其制備方法，以解決上述
技術介紹
中提出的問題。
2、為了解決上述技術問題，本專利技術提供如下技術方案：
3、一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，包括如下步驟：
4、步驟s1：將枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌活化后分別接種至種子培養基中進行種子培養，得到枯草芽孢桿菌種子液、地衣芽孢桿菌種子液、乳酸菌種子液、酵母菌種子液；將枯草芽孢桿菌種子液、地衣芽孢桿菌種子液、
5、步驟s2：將發酵混合種子液和發酵基料混合均勻，得到混合發酵基料；再加入固定化復合酶混合均勻，調節混合發酵基料的含水量為40-50％，于20-30℃條件下發酵5-7d，得到發酵混合飼料。
6、進一步的，所述步驟s1中活化的具體步驟為：將枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌分別接種劃線至牛肉膏蛋白胨培養基，于30-37℃培養1-2d；將乳酸菌接種劃線至mrs培養基，于30-35℃厭氧培養3-5d；將酵母菌接種劃線至pda培養基，于28-30℃培養1-2d。
7、進一步的，所述牛肉膏蛋白胨培養基為：牛肉膏3-5g/l、蛋白胨10-15g/l、氯化鈉3-5g/l、瓊脂15-20g/l，ph＝7.2-7.4，于121℃滅菌15-20min。
8、進一步的，所述mrs培養基為：蛋白胨5-10g/l、牛肉膏10-12g/l、酵母膏2.5-5.0g/l、檸檬酸氫二銨2-4g/l、葡萄糖20-22g/l、吐溫80?1-2g/l、三水合乙酸鈉4-6g/l、三水合磷酸氫二鉀2-4g/l、七水合硫酸鎂0.55-0.58g/l、一水合硫酸錳0.25-0.28g/l、瓊脂15-20g/l，ph＝6.2-6.5，于121℃滅菌15-20min。
9、進一步的，所述pda培養基為：去皮馬鈴薯200-202g/l、葡萄糖18-20g/l、瓊脂15-20g/l，于121℃滅菌15-20min。
10、進一步的，所述步驟s1中種子培養的具體步驟為：將活化后的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌分別接種劃線至種子培養基，在30-37℃、160-180r/min下振蕩培養1-2d，得到枯草芽孢桿菌種子液、地衣芽孢桿菌種子液；將活化后的乳酸菌接種劃線至種子培養基，在30-37℃、160-180r/min下振蕩培養2-3d，形成乳酸菌種子液；將活化后的酵母菌接種劃線至種子培養基，在28-30℃、160-180r/min下振蕩培養2-3d，形成酵母菌種子液。
11、進一步的，所述枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌的種子培養基為：牛肉膏3-5g/l、蛋白胨10-15g/l、氯化鈉3-5g/l，ph＝7.2-7.4；乳酸菌的種子培養基為：蛋白胨5-10g/l、牛肉膏10-12g/l、酵母膏2.5-5.0g/l、檸檬酸氫二銨2-4g/l、葡萄糖20-22g/l、吐溫80?1-2g/l、三水合乙酸鈉4-6g/l、三水合磷酸氫二鉀2-4g/l、七水合硫酸鎂0.55-0.58g/l、一水合硫酸錳0.25-0.28g/l，ph＝6.2-6.5；酵母菌的種子培養基為：去皮馬鈴薯200-202g/l、葡萄糖18-20g/l。
12、進一步的，所述步驟s1中發酵混合種子液中各菌種的質量比為：枯草芽孢桿菌：地衣芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌＝1：(1-2)：(1.0-1.5)：(0.5-0.8)。
13、進一步的，所述步驟s1中發酵混合種子液中菌落總數為1×106-1×108cfu/g。
14、進一步的，所述步驟s2中固定化復合酶的制備方法如下：
15、步驟(1)：將殼聚糖和鹽酸溶液混合均勻，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽、n-羥基丁二酰亞胺，再加入l-半胱氨酸，調節ph值至5-6，反應3-5h，經透析、冷凍干燥后，得到改性殼聚糖；
16、步驟(2)：將改性殼聚糖和去離子水混合均勻，調節體系ph值至4.0-4.4，在3000-4000r/min高速剪切條件下，加入復合酶溶液、玉米醇溶蛋白和乙醇的混合溶液，攪拌3-5h，經旋轉蒸發、離心、干燥后，得到固定化復合酶。
17、在上述技術方案中，通過l-半胱氨酸對殼聚糖進行巰基化改性，得到改性殼聚糖，具有更好的生物相容性、穩定性和可控性；再以改性殼聚糖和玉米醇溶蛋白為壁材，以復合酶為芯材，通過反溶劑法制得負載復合酶的納米顆粒，即固定化復合酶，實現了復合酶的高效固定和保護，有利于提高酶的載荷量和穩定性。
18、進一步的，所述步驟(1)中殼聚糖和鹽酸溶液的質量比為1：(8-10)，鹽酸溶液的濃度為0.09-0.10mol/l。
19、進一步的，所述步驟(1)中1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽的質量為殼聚糖質量的2.0-2.5倍。
20、進一步的，所述步驟(1)中n-羥基丁二酰亞胺的質量為殼聚糖質量的0.8-1.0倍。
21、進一步的，所述步驟(1)中l-半胱氨酸的質量為殼聚糖質量的1.0-1.2倍。
22、進一步的，所述步驟(2)中改性殼聚糖和去離子水的質量比為1：(250-300)。
23、進一步的，所述步驟(2)中復合酶由淀粉酶、纖維素酶、β-甘露聚糖酶、酸性蛋白酶、果膠酶、木聚糖酶按酶活力比值為1：(1-2)：1：1：(0.5-0.6)：(8-10)復配而成。
24、進一步的，所述步驟(2)中復合酶溶液的濃度為1.0-1.2mg/ml，其用量為改性殼聚糖質量的1-2％。
25、進一步的，所述步驟(2)中玉米醇溶蛋白的質量為改性殼聚糖質量的1.0-1.2倍，乙醇的質量為玉米醇溶蛋白質量的100-150倍。
26、進一步的，所述發酵混合種子液和發酵基料的質量比為1：(15-25)。
27、進一步的，所述發酵基料包括以下重量組分：玉米40-5本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟S1中種子培養的具體步驟為：將活化后的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌分別接種劃線至種子培養基，在30-37℃、160-180r/min下振蕩培養1-2d，得到枯草芽孢桿菌種子液、地衣芽孢桿菌種子液；將活化后的乳酸菌接種劃線至種子培養基，在30-37℃、160-180r/min下振蕩培養2-3d，形成乳酸菌種子液；將活化后的酵母菌接種劃線至種子培養基，在28-30℃、160-180r/min下振蕩培養2-3d，形成酵母菌種子液。
3.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟S1中發酵混合種子液中各菌種的質量比為：枯草芽孢桿菌：地衣芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌＝1：(1-2)：(1.0-1.5)：(0.5-0.8)。
4.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟S1中發酵混合種子液中菌落總數為1×106-1×108CFU/g
5.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟S2中固定化復合酶的制備方法如下：
6.根據權利要求5所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中復合酶由淀粉酶、纖維素酶、β-甘露聚糖酶、酸性蛋白酶、果膠酶、木聚糖酶按酶活力比值為1：(1-2)：1：1：(0.5-0.6)：(8-10)復配而成。
7.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟S2中發酵混合種子液和發酵基料的質量比為1：(15-25)。
8.根據權利要求8所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述發酵基料包括以下重量組分：玉米40-50份、豆粕20-30份、發酵紅薯渣10-20份、磷酸氫鈣1.0-1.5份、沸石粉0.8-1.0份、食鹽0.3-0.5份。
9.根據權利要求2所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述發酵紅薯渣由紅薯渣、發酵混合種子液按質量比1：(0.04-0.05)混合，加入500-1000U/g固定化復合酶，發酵60-65h制得。
10.根據權利要求1-9任一項所述制備方法制得的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料。
...【技術特征摘要】
1.一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟s1中種子培養的具體步驟為：將活化后的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌分別接種劃線至種子培養基，在30-37℃、160-180r/min下振蕩培養1-2d，得到枯草芽孢桿菌種子液、地衣芽孢桿菌種子液；將活化后的乳酸菌接種劃線至種子培養基，在30-37℃、160-180r/min下振蕩培養2-3d，形成乳酸菌種子液；將活化后的酵母菌接種劃線至種子培養基，在28-30℃、160-180r/min下振蕩培養2-3d，形成酵母菌種子液。
3.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟s1中發酵混合種子液中各菌種的質量比為：枯草芽孢桿菌：地衣芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌＝1：(1-2)：(1.0-1.5)：(0.5-0.8)。
4.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合飼料的制備方法，其特征在于：所述步驟s1中發酵混合種子液中菌落總數為1×106-1×108cfu/g。
5.根據權利要求1所述的一種地衣芽孢桿菌發酵混合...
【專利技術屬性】
技術研發人員：宋慶義，劉天龍，孫亞莉，申艷麗，
申請(專利權)人：安陽中農大生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：
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