【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物醫藥，尤其涉及一種靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽及合成方法和應用。
技術介紹
1、肝缺血再灌注損傷(hepatic?ischemia?reperfusion?injury，hiri)通常發生在肝移植、肝臟切除手術期間，或在肝外傷、休克或缺血性肝炎的時候。hiri是患者肝臟術后肝臟功能衰竭和預后不良的主要原因之一，其病理主要表現為肝細胞死亡和級聯炎癥反應，包括細胞三磷酸腺苷(atp)耗竭，細胞內鈣過載,氧自由基增多，炎癥反應增強，線粒體功能障礙、氧化應激損傷等。盡管目前已有多種策略旨在預防或減輕hiri，但尋找更為精準且有效的干預靶點仍是研究熱點。
2、pannexin-1(panx1)通道蛋白是一種參與三磷酸腺苷(atp)向細胞外釋放的跨膜蛋白，其在介導細胞外atp釋放、調控炎癥反應及參與iri過程中的關鍵作用而備受關注。研究表明，panx1的激活不僅促進了atp的釋放，還加劇了細胞內鈣水平的升高，進而加劇了組織損傷，而panx1抑制劑生胃酮對小鼠腎臟缺血再灌注損傷有保護作用，還可以顯著減輕小鼠肺缺血再灌注導致的肺功能障礙、水腫、細胞因子產生和中性粒細胞浸潤。這些數據為通過干預panx1預防或減輕缺血再灌注損傷提供了強有力的證據。
3、現有技術中，盡管生胃酮等小分子化合物可以抑制panx1，但大多數panx1拮抗劑還會與不相關的通道蛋白、轉運蛋白和非膜蛋白結合。因此，現有技術參照panx1蛋白結構設計了針對panx1的一種新型模擬多肽qe20(參考中國專利申請號2022114
4、因此，現有技術中關于靶向pannexin-1通道蛋白的多肽拮抗劑的相關技術，仍有待于進一步完善。
技術實現思路
1、有鑒于此，本專利技術提出了一種靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽及合成方法和應用，解決了現有技術中小分子多肽在體內易降解不穩定、不具備肝臟靶向性與ros響應功能的技術問題。
2、本專利技術的技術方案是這樣實現的：
3、一方面，本專利技術提供了一種靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽，所述靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽由多肽qe20經4-硝基苯基4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)芐基碳酸酯(nbc)和姜黃素修飾而成，所述多肽qe20的氨基酸序列如seqid?no：1所示。
4、fkhlwlplngsesqlsnkqe(seq?id?no:1)
5、第二方面，本專利技術還提供第一方面所述靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽的合成方法，包括以下步驟：
6、通過固相法合成多肽qe20，利用硬脂酸綴合到所述多肽qe20的n-端，同時合成nbc；
7、將所述nbc與所述多肽qe20反應，得到nbc修飾的多肽qe20；
8、將姜黃素與所述nbc修飾的多肽qe20反應，得到靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽。
9、在此技術方案的基礎上，進一步優選地，所述nbc由4-(羥甲基)苯硼酸二氫戊二烯酯、4-硝基苯基氯甲酸酯和堿反應而成，具體包括以下步驟：
10、4-(羥甲基)苯硼酸二氫戊二烯酯與4-硝基苯基氯甲酸酯分別溶于溶劑，混勻后，于0-4℃加入堿，攪拌混勻，于20-25℃反應3-5h，除去溶劑，稀釋，洗滌，收集有機層，濃縮，純化，得到nbc。
11、在此技術方案的基礎上，進一步優選地，將所述nbc與所述多肽qe20反應，包括以下步驟：
12、將所述nbc與所述多肽qe20分別溶解，混勻攪拌，于20-25℃反應過夜，得混合液，將所述混合液進行透析，得到所述nbc修飾的多肽qe20。
13、在此技術方案的基礎上，進一步優選地，所述nbc與所述多肽qe20分別溶解后的摩爾比為1.2-1.5:1。
14、在此技術方案的基礎上，進一步優選地，所述透析的截留分子量為1000da。
15、在此技術方案的基礎上，進一步優選地，所述將姜黃素與所述nbc修飾的多肽qe20反應，包括以下步驟：
16、將所述姜黃素與所述nbc修飾的多肽qe20于20-25℃混勻，反應20-30min，加入pbs溶液攪拌，反應3-4h，進行透析，得到所述的靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽。
17、在此技術方案的基礎上，進一步優選地，所述姜黃素與所述nbc修飾的多肽的體積比為1:3-4。
18、在此技術方案的基礎上，進一步優選地，所述透析的截留分子量為3000-3500da。
19、第三方面，本專利技術還提供第一方面所述的靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽在肝臟缺血再灌注的應用。
20、本專利技術所提供的一種靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽及合成方法和應用，相比現有技術，具有以下有益效果：
21、所述靶向pannexin-1通道蛋白的納米多肽由多肽qe20經nbc和姜黃素修飾后自組裝而成。納米結構的存在顯著提高了多肽qe20在循環系統中的穩定性，有效防止其被酶降解。同時，納米結構使得該藥物能夠特異性富集于肝臟組織，從而具備肝臟靶向性。nbc作為ros響應性連接子(linker)，賦予納米藥物炎癥響應功能，并能在不影響多肽生物學活性的情況下實現精準的無痕qe20釋放。此外，釋放的姜黃素小分子還能夠協同發揮抗炎作用。
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1.一種靶向Pannexin-1通道蛋白的納米多肽，其特征在于，所述靶向Pannexin-1通道蛋白的納米多肽由多肽QE20經NBC和姜黃素修飾而成，所述多肽QE20的氨基酸序列如SEQID?NO：1所示。
2.如權利要求1所述的靶向Pannexin-1通道蛋白的納米多肽的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：
3.如權利要求2所述的靶向Pannexin-1通道蛋白的納米多肽的合成方法，其特征在于，所述NBC由4-(羥甲基)苯硼酸二氫戊二烯酯、4-硝基苯基氯甲酸酯和堿反應而成，具體包括以下步驟：
4.如權利要求2所述的靶向Pannexin-1通道蛋白的納米多肽的合成方法，其特征在于，將所述NBC與所述多肽QE20反應，包括以下步驟：
5.如權利要求4所述的靶向Pannexin-1通道蛋白的納米多肽的合成方法，其特征在于，所述NBC與所述多肽QE20分別溶解后的摩爾比為1.2-1.5:1。
6.如權利要求5所述的靶向Pannexin-1通道蛋白的納米多肽的合成方法，其特征在于，所述透析的截留分子量為1000Da。
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