離子復合體形式的水溶性藥物組合物及其應用制造技術

一種水溶性組合物，它含有一種選自刺猬蛋白質，骨形態發生蛋白質，生長因子，紅細胞生成素，血小板生成素，粒細胞集落刺激因子，白細胞介素和干擾素的離子藥學效應多肽的復合體，其特征在于，所說的組合物還含有一種親水親油性化合物，所說的多肽和所說的親水親油性化合物形成一種離子復合體，其中該復合體的形成不提高所說的多肽的溶解性。（*該技術在2019年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】本專利技術涉及一種多肽的組合物，它通過與細胞膜上的胞外受體相互作用而具有生物學效應，所說的多肽是與一種親水親油化合物形成的離子復合體的形式存在于所說的組合物中。本專利技術還涉及所說的組合物的應用。親水親油性化合物作為藥物傳送系統的應用是現有技術中已知的(美國專利US-P5650393，US-P5688761，US-P5665328，US-P5124081，US-P5109038)。在表面活性物質和藥物制劑之間的膠粒形式的復合物的形成也是已知的，例如用于改善活性制劑跨皮膚和跨膜的滲透(Tomlinson和Davis，J.Colloid.Interf.，Sci.74(1980)349)。藥物制劑的非離子化的形式與其離子化的形式相比通常具有較好的通過生物膜的傳送也是已知的(Cools和Jansen，J.Pharm.Pharmacol.35(1983)689-691)。也已知在生理pH值時以多重離子化的形式存在的肽對傳送到作用位點(藥物傳送)不是最適的，這是因為帶電分子，特別是多肽類，在脂肪中具有較低的溶解性(Hirai等，Int.J.Pharm.7(1991)317-325)。從Okada等，J.Pharm.Sci.72(1993)75-78可知，將親脂性反粒子結合在藥物制劑的離子部分可該善與生物膜的相互作用，從而便于蛋白質穿過小腸膜的傳送。例如，Hazzenga和Berner在J.Controlled Release 16(1991)77-88中描述了一種用于兩性離子活性制劑跨皮膚運輸的改良的方法。其它的用于改善藥物制劑與生物膜相互作用的方法描述于例如，Lee等，Critical Rev.Therp.Drug Carrier Systems 8(1991)91-192，Morimoto等，Arch.Int.Pharmacodyn.302(1989)18-26和Aungst，Int.J.Pharm.33(1986)225-234。但在所有的這些方法中，其目的是提高活性制劑的疏水性，從而促進其通過生物膜例如皮膚，以及將所說制劑向細胞中的傳送。為此使用了表面活性物質，其濃度高于臨界膠粒濃度(CMC，Womack等，Biochim.Biophys.Acta 733(1983)210)。這些方法的一個缺點是所使用的高濃度的表面活性物質對細胞膜具有很大的影響，可能將其破壞。從WO94/08599可知，通過加入適量的陰離子去垢劑形成沉淀，分離出沉淀并將其再溶解于有機溶劑中，可制備出活性制劑的均一溶液用于生產載體結合的活性制劑。然后就可以用這一含有陰離子去垢劑和活性制劑之間形成的復合體的均一溶液在一種固體基質中包埋或分散該活性制劑。此外，WO94/08599提到可形成蛋白質和陰離子去垢劑的復合體，可從中釋放出活性制劑以控制蛋白質的釋放。已知蛋白質的活性可通過將其與疏水性化合物例如脂肪酸或膽固醇共價結合而得到改善。但是，這一方法非常復雜，并且由于偶聯的化學反應而產生不均一的產物(例如，Ekrami，H.M.等，FEBS Letters371(1995)283-286，Peinski，R.B.等，J.Biol.Chem.273(1998)14037-14045)。本專利技術的目的是提供具有藥學效果的多肽的組合物，它可改善其中含有的多肽的活性。本專利技術的目的由一種組合物達到，該組合物最好為一種藥物組合物，它含有一種選自下組的具有藥學效果的多肽刺猬蛋白質(hedgehogprotein)，骨形態發生蛋白質，生長因子，紅細胞生成素，血小板生成素，粒細胞集落刺激因子(G-CSF)，白細胞介素，干擾素，其特征在于，所說的組合物還含有親水親油性化合物，所說的多肽和所說的親水親油性化合物形成一種離子復合體，其中該復合體的形成不提高所說的多肽的溶解性。該組合物不含有任何一種有機溶劑。為了便于貯存，該組合物可被冷凍干燥。在本專利技術中，該多肽和該親水親油性化合物可分別以所使用的濃度溶解于水中，最好為緩沖液中，并且僅是這兩種物質的組合通過離子的相互作用導致復合體的形成，使該多肽疏水化，從而降低或者至少不改善其水溶性。令人驚奇地發現，這種多肽的活性可通過這種方式得到顯著地改善。根據本專利技術，該親水親油性化合物和該多肽的用量和比率的選擇最好使該含有離子復合體的水性組合物為透明溶液。如果多肽和親水親油性化合物之間復合體的形成導致混濁，并且該組合物被直接用作給患者施用的溶液時，則將該溶液進行過濾，得到沒有混濁的溶液。如果該組合物在給患者使用前被固定在一種載體上，則不需要避免其混濁性。該具有藥學活性的多肽是一種可以離子的形式存在的多肽，并且它是通過細胞表面受體(胞外受體)的識別和結合來呈現其生物活性的。這些多肽為生長因子(例如，NGF，TGF-β，FGF，GDF，胰島素類生長因子)，紅細胞生成素，血小板生成素，G-CSF，諸如干擾素-α2b的干擾素，諸如白細胞介素-2和白細胞介素-12的白細胞介素，諸如BMP-2的骨形態發生蛋白質，或刺猬蛋白質，例如，sonic，印度(indian)，或沙漠(desert)刺猬蛋白質。特別優選的是刺猬蛋白質。最好使用在按照本專利技術的復合體中所具有的活性(治療效果和/或體外蛋白質活性)與非復合體的形式相比最好被提高10倍或者以上的多肽。該多肽的離子形式可通過將其存在于一種與其pK值相比至少相差0.5pH單位的環境中來得到。本專利技術的親水親油性化合物應被理解為一種陰離子，兩性離子或陽離子型疏水表面活性劑，脂肪酸，烷基磺酸鹽或脂類。優選的陰離子表面活性劑為陰離子型去垢劑，例如，類固醇表面活性劑如脫氧膽酸鹽，膽酸鹽，牛磺膽酸鹽，牛磺脫氧膽酸鹽，脫氫膽酸鹽(可用于陽離子型多肽)；優選的兩離子型表面活性劑為CHAPS(3[(3-膽酸酰胺丙基)二甲基氨]-1-丙烷磺酸鹽)和Zwittergent(R)(N-十二烷基-N，N-二甲基-3-氨-1-丙烷磺酸鹽)；優選的陽離子型去垢劑為十六烷基三甲基銨溴化物或者十二烷基銨氯化物(可用于陰離子型多肽)；優選的脂肪酸為諸如棕櫚酸的脂肪酸(可用于陽離子型多肽)。優選的烷基硫酸鹽為烷基磺酸鹽，例如癸基烷基磺酸鹽(可用于陽離子型多肽)；優選的脂類為諸如磷脂酰基絲氨酸(可用于陰離子型多肽)和磷脂酸(可用于陽離子型多肽)的脂類。該兩性化合物是在使多肽疏水化的條件下加入該組合物中的，從而降低，至少不改善該多肽的水溶性。根據本專利技術，在這一過程中多肽和兩性化合物之間形成水溶性的離子復合體是很重要的。該復合體中多肽與兩性化合物的比率依賴于所使用的pH值，兩種物質的pK值，并且依賴于濃度比率。優選使用一種與多肽和附屬物質的pK值相差至少半個pH單位的pH值。加入的親水親油性化合物越多，結合在多肽上的親水親油性化合物越多，該復合體就變得更為疏水。這可導致復合體的沉淀，從而產生一種可溶性和不容性復合體的混合物，而不再是完全水溶性的。但是，非離子型去垢劑，例如，polyoxamer類Tween(R)的加入可至少部分恢復該復合體的水溶性，或者如果需要可將組合物過濾。在這種情況下，非離子型去垢劑也可以以導致膠粒形成的濃度存在。必須說明的是，親水親油性化合物的類型和濃度的選用應使多肽的分子結構保持在其天然的活性形式，特別是在蛋白質作為本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種水溶性組合物，它含有一種選自下組的藥學效應多肽：刺猬蛋白質，骨形態發生蛋白質，生長因子，紅細胞生成素，血小板生成素，粒細胞集落刺激因子，白細胞介素和干擾素，其特征在于，所說的組合物還含有一種親水親油性化合物，所說的多肽和所說的親水親油性化合物形成一種離子復合體，其中該復合體的形成不提高所說的多肽的溶解性。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】EP 1998-9-1 98116494.01.一種水溶性組合物，它含有一種選自下組的藥學效應多肽刺猬蛋白質，骨形態發生蛋白質，生長因子，紅細胞生成素，血小板生成素，粒細胞集落刺激因子，白細胞介素和干擾素，其特征在于，所說的組合物還含有一種親水親油性化合物，所說的多肽和所說的親水親油性化合物形成一種離子復合體，其中該復合體的形成不提高所說的多肽的溶解性。2.按照權利要求1所述的組合物，其特征在于它是冷凍干燥形式的。3.按照權利要求2所述的組合物，其特征在于該復合體被固定在一個生物相容性載體上。4.按照權利要求3所述的組合物，其特征在于該復合體是以溶解的和沉淀的形式的混合物存在的。5.按照權利要求1至4中任意一項所述的組合物，其特征在于，所說的組合物在水溶液中的pH值與所說的多肽和所說的表面活性劑的pK值相差至少半個p...

【專利技術屬性】
技術研發人員：阿波隆帕帕季米特里烏，
申請(專利權)人：霍夫曼拉羅奇有限公司，
類型：發明
國別省市：CH[瑞士]