從鹵蝦粉提取、制備、純化二十二碳六烯酸乙酯的方法技術

一種從鹵蝦粉提取、制備、純化二十二碳六烯酸乙酯的方法，它是將鹵蝦粉與石油醚混合，在６０～９０℃下，回流萃取，回收石油醚，經干燥，得總脂。將所得的總脂與５％乙醇鈉－乙醇溶液混合，在５０～７０℃于黑暗中反應２～５小時，過濾除去沉淀蒸去乙醇，用水洗滌，靜置分層后棄去下層水層，反復用水洗滌，直至ｐＨ達到７，用無水硫酸鈉干燥后，即得不飽和脂肪酸乙酯。將所得的不飽和脂肪酸乙酯上涂銀硅膠柱進行層析，用丙酮－正己烷溶液梯度洗脫，分部收集洗脫液，減壓蒸去溶劑，得高純度的二十二碳六烯酸乙酯。（*該技術在2023年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及二十二碳六烯酸乙酯和鹵蝦粉。據近年來一系列研究表明，DHA具有降血脂、降血壓、促進大腦發育，調節體內抗氧化能力等重要生理功能，在維護生物膜的結構和功能、治療心血管疾病以及抗炎、抗癌等方面起重要作用，是人及動物生長發育所必需的生物活性物質。目前已廣泛應用于醫藥、保健食品和化妝品等領域。由于不飽和脂肪酸容易氧化，一般應用其乙酯，即二十二碳六烯酸乙酯(DHA-E)，DHA-E進入人體后，水解成活性成分DHA。“鹵蝦蛋白粉加工工藝”(專利號CN01107982.7)介紹了一種制備鹵蝦蛋白粉的方法。本專利技術在此基礎上進行了改進。本專利技術的技術方案如下一種，它由下列步驟組成步驟一、將鹵蝦粉與石油醚按1公斤比9～12升的比例混合，在60～90℃下，回流萃取，減壓蒸餾，回收石油醚，經真空干燥，得棕紅色油狀物，即為總脂，步驟二、將步驟一所得的總脂與5％乙醇鈉-乙醇溶液按重量比1比3～5的比例混合，在50～70℃的水浴中加熱，于黑暗中反應2～5小時，過濾除去沉淀蒸去濾液中的乙醇，用蒸餾水洗滌油狀物，靜置分層后棄去下層水層，上層液體反復用水洗滌，直至pH達到7，用無水硫酸鈉干燥后，得到紅棕色液體，即為不飽和脂肪酸乙酯， 步驟三、將步驟二所得的不飽和脂肪酸乙酯上涂銀硅膠柱進行層析，用丙酮-正己烷溶液梯度洗脫，分部收集洗脫液，減壓蒸去溶劑，得高純度的二十二碳六烯酸乙酯。在上述方法的步驟二中上層液體用水洗滌，pH值不易達到7時，可以加入稀鹽酸中和，使其pH達到7，并用飽和NaCl溶液洗滌，再用去離子水洗至無氯離子。本專利技術的方法經濟實用，能得到高純度的二十二碳六烯酸乙酯，適用于工業化生產。具體實施例方式實施例1.鹵蝦的預處理(1)把鹵蝦用清水洗凈，用漂浮法除去雜草，鹵蠅、鹵蛆等雜質，然后用濃度為15Be～18Be的純凈鹵水采取懸浮法除去鹵蝦體外泥沙等物質，清洗過濾后得凈鹵蝦；(2)將凈鹵蝦用50～60℃的溫度干燥，制成干蝦片或干蝦粉。因為鹵蝦富含不飽和脂肪酸、蛋白質等多種活性物質，物料干燥溫度的高低以及干燥時間的長短對鹵蝦熱敏性營養物質的影響很大，溫度越高，時間越長，熱敏性營養物質損失越多，對DHA含量較高的鹵蝦加工十分不利。所以本項專利技術采用60℃以下，真空、振動、充氮、干燥粉碎一體化工業性生產，既滿足了產品加工需要，又大大減低了加工工序和生產成本；(3)將干燥后的鹵蝦進行粉碎成180～250目的干粉；(4)將干燥的鹵蝦粉用吹風機分離雜質，該過程可以一次完成，也可以反復風吹分離。采取上述工藝流程制得的鹵蝦粉通過國家農業部的鑒定，具有很高的技術指標蛋白質60％；脂肪15％；水分不大于5％；灰分(含甲殼素不容性)不大于12％，無機砷不大于1毫克/千克。其中DHA占總脂的9.79％。實施例2.DHA提取、制備和純化(1)首先，從鹵蝦粉中提取總脂鹵蝦中總脂肪的提取稱取300克鹵蝦粉，與2700毫升石油醚混合，在60～90℃下，回流萃取，減壓回收溶劑，經真空干燥，得棕紅色油狀物110克，即為總脂。(2)其次，將不飽和脂肪酸乙酯化。將5％乙醇鈉-乙醇溶液330克與油狀物混合。置于三頸燒瓶中，接冷凝回流裝置，在50～70℃水浴中加熱，于黑暗中反應2小時。反應完畢后，過濾除去沉淀，蒸去濾液中的乙醇，并用蒸餾水反復洗滌，靜置分層后棄去下層水層。上層液體要反復洗滌，必要時加入稀鹽酸中和，直至pH值達到7為止，并用飽和NaCl溶液洗滌，再用去離子水洗至無氯離子后，最后用無水硫酸鈉干燥后，得到紅棕色液體，即得不飽和脂肪酸乙酯。在步驟(1)中用3600毫升石油醚萃取；在步驟(2)中用550克5％乙醇鈉-乙醇溶液，其結果基本不變。(3)然后，采用涂銀硅膠柱層析一梯度濃度洗脫法純化DHAa.涂銀硅膠柱的制備將100g層析用硅膠加至200ml無水乙醇中，攪拌混合成懸浮液，加入硝酸銀溶液(10g AgNO3加至35ml 70％的乙醇中)，再攪拌10min，蒸去乙醇。將所得的涂銀硅膠置于烘箱中，于120℃高溫活化(12h以上)，冷卻后，于避光處保存。取直徑為2.5cm，高10cm以上的層析柱.取活化的涂銀硅膠20g加入約40ml正己烷制成懸浮液，裝柱，使涂銀硅膠柱柱高9cm左右。b.加樣，洗脫滴加1.0g多不飽和脂肪酸乙酯于柱面上，配制丙酮濃度為0.5％、1％、5％、10％、15％、20％(v/v)的丙酮-正己烷溶液各25毫升作為洗脫液。按濃度由低到高依次洗脫，流速控制在2.0-1.3ml/min，分別收集各個不同濃度梯度的流出液做氣相色譜分析。在洗脫液丙酮濃度達到20％是，分5步收集，得到的二十二碳六烯酸乙酯純度依次為91.29％、97.26％、97.6％、97.89％、100％的高純度的二十二碳六烯酸乙酯，其中100％純度的得率在20％左右。UV檢測顯示，其在正己烷中于200nm處有一吸收峰，其EI-MS檢測，其M/Z值為357，均與標樣(購于sigma公司)一致。以上實驗經放大，可得到近似結果，表明該制備、純化方法適用于工業化生產。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種從鹵蝦粉提取、制備、純化二十二磷六烯酸乙酯的方法，其特征是它由下列步驟組成：步驟一、將鹵蝦粉與石油醚按１公斤比９～１２升的比例混合，在６０～９０℃下，回流萃取，減壓蒸餾，回收石油醚，經真空干燥，得棕紅色油狀物，即為總脂，步驟二、 將步驟一所得的總脂與５％乙醇鈉－乙醇溶液按重量比１比３～５的比例混合，在５０～７０℃的水浴中加熱，于黑暗中反應２～５小時，過濾除去沉淀蒸去濾液中的乙醇，用蒸餾水洗滌油狀物，靜置分層后棄去下層水層，上層液體反復用水洗滌，直至ｐＨ達到７，用無水硫酸鈉干燥后，得到紅棕色液體，即為不飽和脂肪酸乙酯，步驟三、將步驟二所得的不飽和脂肪酸乙酯上涂銀硅膠柱進行層析，用丙酮－正己烷溶液梯度洗脫，分部收集洗脫液，減壓蒸去溶劑，得高純度的二十二碳六烯酸乙酯。

【技術特征摘要】
1.一種從鹵蝦粉提取、制備、純化二十二碳六烯酸乙酯的方法，其特征是它由下列步驟組成步驟一、將鹵蝦粉與石油醚按1公斤比9～12升的比例混合，在60～90℃下，回流萃取，減壓蒸餾，回收石油醚，經真空干燥，得棕紅色油狀物，即為總脂，步驟二、將步驟一所得的總脂與5％乙醇鈉-乙醇溶液按重量比1比3～5的比例混合，在50～70℃的水浴中加熱，于黑暗中反應2～5小時，過濾除去沉淀蒸去濾液中的乙醇，用蒸餾水洗滌油狀物，靜置分...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉志禮，曹德華，王新，薛仁皓，
申請(專利權)人：南京大學，
類型：發明
國別省市：84[中國|南京]