一種用外源質粒消除革蘭氏陰性菌代謝質粒的方法技術

本發明專利技術公開了一種用外源質粒消除革蘭氏陰性菌代謝質粒的方法，步驟是：Ａ、制備電轉法感受態細胞：（１）挑取單菌落，接種到ＬＢ中振蕩培養；（２）接種量轉接到ＬＢ中培養；（３）在無菌條件下，將細菌轉移到無菌、放置；（４）離心，回收細胞；（５）用預冷的水重懸細胞沉淀，冰浴；（６）離心，回收細胞；（７）用甘油重懸細胞沉淀，放置冰浴上；（８）離心，回收細胞；（９）將細胞凍存于甘油中備用；Ｂ、轉化：（ａ），將外源質粒加入感受態細胞，轉移到電轉杯中；（ｂ）將管轉移到搖床上，溫育；（ｃ）將感受態細胞轉移含抗生素的ＬＢ瓊脂培養基上；（ｄ）將平板置于室溫；（ｅ）倒置平板，提取質粒，凝膠電泳檢測質粒。方法簡單，快速，效率高，準確性高。

【技術實現步驟摘要】

【技術保護點】

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉虹，孟芳會，周寧一，王淑君，
申請(專利權)人：中國科學院武漢病毒研究所，
類型：發明
國別省市：83