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    一種用于多種腎臟組織來源細胞生長的無血清培養基制造技術

    技術編號:5185928 閱讀:241 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
    本發明專利技術涉及一種用于多種腎臟組織來源細胞生長的無血清培養基,以DMEM/F12(1∶1)為基礎培養基,含有酵母自水解物、大豆蛋白水解物、多種氨基酸、脂肪酸復合劑、抗氧化試劑、還原型谷胱甘肽、多胺混合物、乙醇胺、β-巰基乙醇、甘油、多種礦物質和Pluronic?F-68等組分,pH值為7.2。本發明專利技術培養基可用于多種腎臟組織來源的細胞系,如HEK293細胞、Marc145細胞、Vero細胞以及BHK21細胞的培養及病毒增殖。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及一種用于多種腎臟組織來源細胞生長的無血清培養基,特別能用于支 持HEK293細胞、Vero細胞、Marcl45細胞或BHK21細胞的培養,屬于細胞工程領域。
    技術介紹
    目前應用于重組病毒載體擴增、重組蛋白表達或是疫苗規?;苽渌玫乃拗?細胞基本是哺乳動物的腎臟組織來源細胞,如人胚胎腎細胞(HEK293)、非洲綠猿腎細胞 (Vero)、恒河猴腎細胞(Marcl45)以及幼小倉鼠腎細胞(BHK21)等。這些細胞在傳統培養 過程中通常需要添加一定量(5 10% )的牛血清,血清中含有細胞生長所需的生長因子、 激素、載體蛋白、貼壁因子、微量元素以及其他營養物質,可以促進細胞生長。但是,在規模 化生產和實際應用中,血清的添加存在如下缺點1)血清易受病毒、支原體或其他病原體的污染;2)不同批次的血清之間的質量差異造成最終產品批次間的質量差異;3)大量血清的存在增加生產后期純化的難度,增加工藝流程、提高生產成本,回收 率降低;4)部分血清成分難以徹底去除,嚴重影響最終產品質量,具有安全隱患。為了克服血清添加帶來的上述缺陷,自上世紀八十年代起許多科研單位或生物醫 藥公司就相繼開發出了若干無血清培養基,如Sigma公司旗下JRH公司生產的Excell系列 無血清培養基,Invitrogen公司旗下Gibco公司生產的VP-AGT系列無血清培養基等等。上述無血清培養基都有各自特點,大都可以支持細胞生長,但同時也存在不足之 處1)無血清培養基中依然含有動物蛋白來源成分,如牛血清白蛋白(BSA)、胰島素、 轉鐵蛋白等,仍然遺留著應用血清可能出現的問題,此外其價格昂貴,一般只適合實驗室小 規模培養使用;2)目前開發的無血清培養基對細胞具有較高的特異性,通常一種培養基只能適合 一種細胞株的生長,而不適合其他細胞株;所以目前急需開發出適用于同為動物腎臟組織來源細胞的普適型無血清培養基, 同時要求該培養基的添加組分中無動物來源成分,滿足細胞生長所需的營養成分。
    技術實現思路
    本專利技術的目的在于提供一種用于多種腎臟組織來源細胞生長的無血清培養基,該 培養基不含動物來源成分,以提高生物安全性,并能適用于多種腎臟組織來源細胞的培養, 細胞存活率高。本專利技術提供一種用于多種腎臟組織來源細胞生長的無動物成分來源、無血清培養 基,包含如下組分本文檔來自技高網
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    【技術保護點】

    【技術特征摘要】
    一種用于多種腎臟組織來源細胞生長的無血清培養基,包含如下組分組分 含量DMEM/F12(1∶1) 14.8g/L酵母自水解物 1~3g/L大豆蛋白水解物 1~3g/L氨基酸類L 丙氨酸 10~30mg/LL 纈氨酸 50~150mg/LL 亮氨酸 30~80mg/LL 異亮氨酸 50~180mg/LL 甲硫氨酸 150~300mg/LL 脯氨酸 100~250mg/LL 苯丙氨酸 100~250mg/LL 色氨酸 50~300mg/LL 甘氨酸 0~50mg/LL 絲氨酸 50~150mg/LL 蘇氨酸 50~250mg/LL 半胱氨酸 50~250mg/LL 天冬酰胺 50~200mg/LL 谷氨酰胺 250~400mg/LL 酪氨酸 50~250mg/LL 天冬氨酸 20~80mg/LL 谷氨酸 50~200mg/LL 賴氨酸 60~100mg/LL 精氨酸 50~300mg/LL 組氨酸 50~300mg/L羥脯氨酸 0~40mg/L脂肪酸復合劑 0.1~0.3ml/L抗氧化試劑 0.1~0.3ml/L多胺混合物 0.1~0.3ml/L還原型谷胱甘肽 1~3mg/L乙醇胺 1.5~3ml/Lβ 巰基乙醇0.5~2ml/L甘油 5~20g/L礦物質類CaCl2 50~154mg/LMgCl2 20~60mg/LMgSO4 20~50mg/LNaHCO31~1.5g/LFeSO4·7H2O 5~20mg/LFe(NO3)3·9H2O...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:馮磊侯繼波,
    申請(專利權)人:國家獸用生物制品工程技術研究中心,
    類型:發明
    國別省市:84

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