ＰＥＧ－干擾素－β制劑制造技術

本發(fā)明專利技術涉及一種液體藥物組合物，該組合物包含ＰＥＧ化干擾素－β（ＰＥＧ－ＩＦＮ－β）、賦形劑、表面活性劑和緩沖液，其中所述賦形劑是多元醇，所述表面活性劑是非離子表面活性劑，所述緩沖液是乙酸鈉緩沖液。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及PEG化干擾素-3制劑(PEG-IFN- 3 )。
技術介紹
干擾素是一種蛋白質，業(yè)經鑒定可作為有用的藥物，目前已用于例如治療多 發(fā)性硬化癥(MS)。蛋白質可在序列上加以修飾或作其它修飾，以改變或改善例如它們的活性或穩(wěn)定 性。一種這樣的修飾是引入與聚合物如聚乙二醇(PEG)的連接鍵。例如在W099/55377和EP 0 593 868 A1中已描述了連接于聚乙二醇 (PEG-IFN-^)的干擾素。在醫(yī)藥領域，已采取各種方法如冷凍干燥來穩(wěn)定蛋白質，或制成液體藥物組合物 形式。凍干材料必需在使用前重建為溶液。較容易和特別令人感興趣的是濃縮的或即用型 液體藥物組合物，因為它們應用于患者時不需要作任何進一步的制備。W095/31213和W02004/096263描述了干擾素的液體藥物制劑。W02005/084303描述了干擾素lb-的偶聯聚合組合物。US 6，531，122是關于含賦形劑、穩(wěn)定劑和緩沖劑的PEG化干擾素變體制劑。W02004/060299提供了包含干擾素與其受體結合拮抗劑的細胞因子偶聯聚合 物的合成方法。US20060051320 A1涉及用海藻糖作為冷凍保護劑制備的PEG化干擾素凍干制劑。W099/48535提供了能防止凍干過程中和凍干后PEG化干擾素-a偶聯物丟失和損 害的制劑。W003002152具體涉及包含干擾素多肽和磺烷基醚環(huán)糊精衍生物的穩(wěn)定組合物。以上參考文獻無一公開過或提議過本專利技術的液體制劑。專利技術概述本專利技術一方面提供一種包含PEG化干擾素(PEG-IFN-^)、賦形劑、表面活性劑 和緩沖液的液體藥物組合物，其中所述賦形劑是多元醇，所述表面活性劑是非離子表面活 性劑，所述緩沖液是乙酸鈉緩沖液。本專利技術另一方面提供制備液體藥物組合物的方法，所述方法包括在緩沖液中加入 計算量的賦形劑和表面活性劑，然后加入PEG-IFN-3。本專利技術另一方面提供在滅菌條件下密封、適合貯存待用的容器，該容器包含本發(fā) 明的液體藥物組合物。本專利技術另一方面提供藥物組合物的藥盒，該藥盒包含裝有本專利技術藥物組合物的容 器。表格和附圖的簡要說明L含0.044mg/ml PEG-干擾素-g的本專利技術制劑表1描述含0. 044mg/ml PEG-干擾素-0的各種本專利技術制劑。表2描述本專利技術制劑分別在40°C、25°C和2_8°C下的穩(wěn)定性試驗(SE-HPLC)，整個試驗期間pH為4. 2。表3描述本專利技術制劑分別在40°C、25°C和2_8°C下的穩(wěn)定性試驗(RP-HPLC)，整個 試驗期間pH為4. 2。表4描述用SE-HPLC測定本專利技術制劑的滴度(mcg/mL)。表5描述用SE-HPLC測定本專利技術制劑的滴度(mcg/mL)；過濾前后的回收百分 率％，并以圖表示(附圖說明圖1 %回收率表示為AF和TO回收百分率％ )。表6顯示分別在25°C和2_8°C貯存4_26周后本專利技術制劑的pH值。表7描述本專利技術制劑隨時間推移生物試驗的結果。II.分別含0. 055和0. 110mg/ml PEG-干擾素-|3的本專利技術制劑這些制劑的PEG-干擾素-0含量已分別增加至0. 055and 0. llOmg/mlPEG-干擾 素。表8描述檢測本專利技術制劑分別在40°C、25°C和2-8°C貯存下純度的SE-HPLC試驗， 整個期間pH為4. 2。表9描述檢測本專利技術制劑分別在40°C、25°C和2_8°C貯存下蛋白含量的SE-HPLC 試驗，整個期間pH為4. 2。表10描述檢測本專利技術制劑分別在40°C、25°C和2_8°C貯存下純度的RP-HPLC試 驗，整個期間pH為4. 2。表11顯示分別在25°C和2_8°C貯存4_13周后本專利技術制劑的pH值。表12顯示分別在25°C和2_8°C貯存后隨時間推移本專利技術制劑的生物試驗數據。表13描述關于本專利技術PEG-干擾素制劑氧化形式肽圖的數據。專利技術詳述本專利技術涉及一種包含PEG化干擾素-0 (PEG-IFN- ^ )、賦形劑、表面活性劑和緩沖 液的液體藥物組合物，其中所述賦形劑是多元醇，所述表面活性劑是非離子表面活性劑，所 述緩沖液是乙酸鈉緩沖液。本專利技術一方面涉及一種包含PEG化干擾素(PEG-IFN-^)或其變體或其活性片 段、賦形劑、表面活性劑和緩沖液的液體藥物組合物，其中所述賦形劑是多元醇，所述表面 活性劑是非離子表面活性劑，所述緩沖液是乙酸鈉緩沖液。以下章節(jié)提供了組成本專利技術制劑的各種化合物的定義，在整個說明書和權利要求 書中其應用含義均相同，除非另有明確闡述的定義提供更廣泛的定義。 制劑中的PEG化干擾素_ 0是任何經過聚乙二醇共價修飾或與其相當的修飾的干 擾素-0。PEG化干擾素的一個例子是PEG-干擾素，其PEG化可采用已知方法進 行，如W099/55377所述方法。具體地說，本專利技術的IFN-0共價結合于親水性聚乙二醇(PEG)，也稱為聚氧乙烯 (PEO)。PEG可以是兩個末端都含有羥基的線性聚合物H0CH2CH20 (CH2CH20) nCH2CH20H也可采用甲氧基-PEG-OH(m-PEG)，其一個末端為相對惰性的甲氧基，而另一末端 為易受化學修飾的羥基CH30 (CH2CH20) nCH2CH20H上式中的n可以是1到幾百。在另一優(yōu)選實施方式中，PEG也可以是R(PEG-0H)m表示的分枝PEG，其中R代表中 央的核心，如季戊四醇或甘油，m代表分枝臂數。分枝臂數(m)的范圍為3-100個或幾百個。 所述羥基易受化學修飾。本專利技術的另一種分枝形式見例如W096/21469中所述，其中PEG有一個易受化學修 飾的末端。此種類型的PEG可表示為(CH30PEG)pRX，其中的p等于2或3，R代表中央的核 心，如賴氨酸或甘油，X代表功能基團，如易受化學激活的羧基。本專利技術的另一種分枝形式稱為“懸垂體PEG”，其沿PEG骨架而非在PEG鏈末端含有反應活性基團，例如羧基。也可以制備在主鏈中帶有弱的或可降解連接鍵的本專利技術的PEG-干擾素-0，如美 國專利申請06/026，716中所述。因此，可制備聚合物主鏈中含有易受水解的酯鍵的PEG。 根據下面的反應方程式，水解可導致該聚合物切斷形成低分子量的片段-peg-co2-peg+h2o — -peg-co2h+ho-peg-環(huán)氧乙烷與環(huán)氧丙烷的共聚物在化學上與PEG密切相關，按照本專利技術可用于代替 PEG。已開發(fā)了 PEG化蛋白質的各種方法。通常采用親電子活化PEG衍生物，可使PEG 結合于蛋白質的反應活性基團。一種方法利用賴氨酸殘基的a-或氨基和N-末端產 生包括產品混合物的結合物。該結合物優(yōu)選包含結合于每個蛋白質分子的1個至幾個PEG分子的分子群，其數 量為1個至該蛋白質中氨基酸的數目。宜在干擾素中引入針對PEG化的位點，如Woghiren等.BioconjugateChem.， 4(5) =314-318,1991中所述，合成巰基選擇性PEG衍生物。在一實施方式中，將IFN特異性PEG化。可按照EP 675 201的方法在N_末端殘 基處用例如mPEG-正丙醛(proprionaldehyde)進行特異性PEG化。特別優(yōu)選如Woghiren 等.Bioconjugate Chem. ,4(5) =314-318,1991 中描述的本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種液體藥物組合物，包含ＰＥＧ化干擾素－β（ＰＥＧ－ＩＦＮ－β）或其突變蛋白或活性片段、賦形劑、表面活性劑和緩沖液，其中所述賦形劑是多元醇，所述表面活性劑是非離子表面活性劑，所述緩沖液是乙酸鈉緩沖液。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】EP 2007-12-20 07150258.7;US 2008-1-7 61/010,258一種液體藥物組合物，包含PEG化干擾素-β(PEG-IFN-β)或其突變蛋白或活性片段、賦形劑、表面活性劑和緩沖液，其中所述賦形劑是多元醇，所述表面活性劑是非離子表面活性劑，所述緩沖液是乙酸鈉緩沖液。2.如權利要求1所述的組合物，包含PEG-IFN-0、賦形劑、表面活性劑和緩沖液，其中 所述賦形劑是甘露醇，所述表面活性劑是泊洛沙姆188，所述緩沖液是乙酸鈉緩沖液3.如權利要求1或2所述的組合物，其中所述PEG-IFN-0的濃度約為O.Olmg/ ml-0. lmg/ml04.如權利要求3所述的組合物，其中所述PEG-IFN-0的濃度約為0. 044mg/ml、 0.055mg/ml 或 0. 110mg/mlo5.如以上權利要求任何一項所述的組合物，其中所述PEG-IFN-0包含線性或分枝性 PEG，優(yōu)選分枝性PEG。6.如權利要求5所述的組合物，其中所述PEG的分子量為至少20kDa，優(yōu)選至少40kDa， 更優(yōu)選40kDa。7.如權利要求6所述的組合物，其中所述PEG-IFN-0含有間隔臂。8.如權利要求7所述的組合物，其中所述間隔臂的分子量為100-5000道爾頓，優(yōu)選 1500-2500道爾頓，更優(yōu)選2000道爾頓。9.如權利要求1或2所述的組合物，其中所述賦形劑的濃度為約30mg/ml-50mg/ml。10.如權利要求1或2所述的組合物，其中所述賦形劑的濃度為約40mg/ml-50mg/ml。11.如權利要求1或2所述的組合物，其中所述賦形劑的濃度為約45mg/m...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：A德爾里奧，J里查德，
申請(專利權)人：默克雪蘭諾有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：CH[瑞士]