尖刺堿及其類似物的新用途制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了尖刺堿及其類似物的新用途。該用途是式（Ⅰ）所示的尖刺堿及其類似物或它們藥物學(xué)上可接受的鹽在制備抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的藥物中的應(yīng)用和在制備預(yù)防和／或治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。式（Ⅰ）所示的尖刺堿及其類似物或它們藥學(xué)上可接受的鹽可與Ｇ－四鏈體ＤＮＡ結(jié)合，增加Ｇ－四鏈體的穩(wěn)定性，從而競爭性抑制端粒酶與端粒的結(jié)合，抑制端粒酶的活性，減弱細(xì)胞的增殖能力，抑制端粒延伸，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。外抗癌細(xì)胞增殖實驗結(jié)果表明，尖刺堿對于人白血病細(xì)胞系ＨＬ－６０、人胃癌細(xì)胞系ＢＧＣ－８２３、人肝癌細(xì)胞系Ｂｅｌ－７４０２以及人鼻咽癌細(xì)胞系ＫＢ均有抑制效果，其中，當(dāng)尖刺堿的藥物濃度為５０μＭ時，對于ＢＧＣ－８２３的抑制率超過了８０％。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及尖刺堿及其類似物的新用途。
技術(shù)介紹
端粒是指真核生物線性染色體末端的非編碼DNA區(qū)域，其功能為在重組過程 中協(xié)助染色體排列；穩(wěn)定染色體末端結(jié)構(gòu)，防止染色體間末端連接；可補償滯后鏈 5'末端在消除RNA引物后造成的空缺。端粒DNA序列在體外能形成四鏈體結(jié)構(gòu)(Wang， Y. and Patel， D. J. ， Structure, 2， 1141-1156 (1994).)。組織培養(yǎng)的細(xì)胞證明，端粒在決定細(xì)胞的壽命中起著重要作用，經(jīng)過多代培養(yǎng) 的老化細(xì)胞端粒變短，染色體也變得不穩(wěn)定。細(xì)胞分裂的時候，因為3'末端在復(fù) 制過程中是滯后鏈，DNA聚合酶不能復(fù)制染色體3'鏈的最末端，這種末端復(fù)制 問題導(dǎo)致細(xì)胞每倍增一次端粒就縮短約30-200個堿基，大約經(jīng)過60-70次復(fù)制 后，端粒達(dá)到一個臨界長度，此時細(xì)胞就進(jìn)入非分裂狀態(tài)，叫做衰老期，這將導(dǎo)致 細(xì)胞凋亡直至死亡(Harley， C. B. ， et al. ， Nature, 345， 458-460 (1990).)。端粒酶，是基本的核蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶，可將端粒DNA加至真核細(xì)胞染色體末端。 端粒酶在不同物種細(xì)胞中對于保持染色體穩(wěn)定性和細(xì)胞活性有重要作用，能延長縮 短的端粒，從而增強體外細(xì)胞的增殖能力。端粒酶在正常人體組織中活性被抑制， 在腫瘤中被重新激活，可能參與惡性轉(zhuǎn)化。端粒酶在保持端粒穩(wěn)定、基因組完整、 細(xì)胞長期的活性和潛在的繼續(xù)增殖能力等方面有重要作用。Kim等發(fā)現(xiàn)，在85-90% 的癌細(xì)胞中， 一種逆轉(zhuǎn)錄酶-端粒酶被激活(Kim， N. W. ， et al. ， Science, 266， 2011-2015 (1994).)，這提供了一種用于治療癌癥的特異的靶。端粒序列隨生物體的不同而不同。在人類和其他脊椎動物中，端粒含有TTAGGG 的重復(fù)序列。在人體中，端粒酶將TTAGGG重復(fù)序列加入到端粒末端，以平衡細(xì)胞 分裂所帶來的端粒縮短，結(jié)果端粒的長度被保持住，使得癌細(xì)胞永生化。人類端粒 具有一段5-15kb的雙鏈區(qū)域， 一條鏈富含嘌呤(A鏈)， 一條鏈富含嘧啶(B鏈)。 在3，末端，A鏈存在一個200個堿基長度的單鏈突出，該單鏈可作為端粒酶的引 物。Zahler等發(fā)現(xiàn)，G-四鏈體的形成能阻止端粒酶與端粒的結(jié)合，從而抑制端粒酶 的活性(Zahler， A. M. ， et al. ， Nature, 350 718-720 (1991). ) 。 G-四鏈體DNA是由含有一連串連續(xù)鳥嘌呤殘基的DNA形成的一種四鏈DNA結(jié)構(gòu)(Cech， T. R.， Nature, 332， 777-778 (1988).)。因此，關(guān)于穩(wěn)定端粒G-四鏈體DNA的小分子的 研究是目前抗癌藥物設(shè)計的一個熱點領(lǐng)域。 尖刺堿及其類似物的結(jié)構(gòu)式如下<formula>formula see original document page 5</formula>式(I )式(I)中，R基可以獨立地為氫原子、卣原子或為l-10個碳原子的直鏈或支鏈垸基或酰基。尖刺堿為白色晶體，苦粉末。熔點216 217r。旋光度+131.5°(氯仿)。幾乎不 溶于7乂，溶于乙醇、氯仿、乙醚、稀酸。存在于小檗科植物刺檗(歐小檗)(Berberis vul-garis L.)的根，細(xì)葉十大功勞[Mahonia fortunei (Lindl.)Fedde]的莖，毛茛科植物 狹葉唐松草(ThalictrumlucidumL.)的根。尖刺堿有抗菌、降壓、利膽作用。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供尖刺堿及其類似物的新用途。本專利技術(shù)所提供的尖刺堿及其類似物的用途為式(I )所示的化合物或其藥學(xué) 上可接受的鹽在制備抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的藥物中的應(yīng)用；式(I)中，R基可以獨立地為氫原子、鹵原子或1-10個碳原子的直鏈或支鏈 烷基或酰基。所述真核生物為哺乳動物。所述腫瘤細(xì)胞為癌細(xì)胞；所述癌細(xì)胞具體可為乳腺癌細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞、肝 癌細(xì)胞、胰腺癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、腦癌細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞、子宮癌細(xì)胞、睪丸癌細(xì)胞、皮膚癌細(xì)胞、白血病細(xì)胞、頭頸癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞、 視網(wǎng)膜癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞、肛門癌細(xì)胞或直腸癌細(xì)胞；優(yōu)選為白血病細(xì)胞、胃癌 細(xì)胞、肝癌細(xì)胞或鼻咽癌細(xì)胞。<formula>formula see original document page 6</formula> 式(I )本專利技術(shù)還保護(hù)一種抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的藥物，它的有效成分為式(I ) 所示的尖刺堿及其類似物或它們藥物學(xué)上可接受的鹽。 所述真核生物為哺乳動物。所述腫瘤細(xì)胞為癌細(xì)胞；所述癌細(xì)胞具體可為乳腺癌細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞、肝 癌細(xì)胞、胰腺癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、腦癌細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞、子宮癌細(xì)胞、睪丸癌細(xì) 胞、皮膚癌細(xì)胞、白血病細(xì)胞、頭頸癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞、 視網(wǎng)膜癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞、肛門癌細(xì)胞或直腸癌細(xì)胞；優(yōu)選為白血病細(xì)胞、胃癌 細(xì)胞、肝癌細(xì)胞或鼻咽癌細(xì)胞。本專利技術(shù)提供的尖刺堿及其類似物的新用途還為式(I )所示的化合物或其藥 物學(xué)上可接受的鹽在制備預(yù)防和/或治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述腫瘤可為癌，如乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、腦癌、卵巢癌、 子宮癌、睪丸癌、皮膚癌、白血病、頭頸癌、胃癌、鼻咽癌、結(jié)腸癌、視網(wǎng)膜癌、 膀胱癌、肛門癌或直腸癌；特別適合于制備預(yù)防和/或治療人白血病、人胃癌、人 肝癌和人鼻咽癌的藥物。有效成分為式(I )所示的尖刺堿及其類似物或它們藥學(xué)上可接受的鹽的預(yù)防 和/或治療腫瘤的藥物，也屬于本專利技術(shù)的保護(hù)范圍。所述預(yù)防和/或治療腫瘤藥物可通過注射、噴射、滴鼻、滴眼、滲透、吸收、物理或化學(xué)介導(dǎo)的方法導(dǎo)入機體如肌肉、皮內(nèi)、皮下、靜脈、粘膜組織；或是被其他 物質(zhì)混合或包裹后導(dǎo)入機體。以尖刺堿及其類似物或它們藥學(xué)上可接受的鹽為活性成分的抗腫瘤藥物，需要 的時候，在上述藥物中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載體包括 藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、 表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。用尖刺堿及其類似物或它們藥學(xué)上可接受的鹽制備的預(yù)防和/或治療腫瘤藥物 可以制成注射液、片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊、口服液、膏劑、霜劑等多種形式。 上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。試驗證明，式(I )所示的尖刺堿及其類似物或它們藥學(xué)上可接受的鹽可與G-四鏈體DNA (簡稱為Tdo7)結(jié)合，增加G-四鏈體的穩(wěn)定性，從而競爭性抑制端粒 酶與端粒的結(jié)合，抑制端粒酶的活性，抑制端粒延伸，減弱細(xì)胞的增殖能力，促進(jìn) 細(xì)胞凋亡。尖刺堿體外抗癌細(xì)胞增殖實驗結(jié)果表明，尖剌堿對于人白血病細(xì)胞系HL-60、 人胃癌細(xì)胞系BGC-823、人肝癌細(xì)胞系Bel-7402以及人鼻咽癌細(xì)胞系KB均有抑制 效果，其中，當(dāng)尖刺堿的藥物濃度為50uM時，對于BGC-823的抑制率超過了 80%。 附圖說明圖l尖刺堿與Telo7的熒光淬滅圖，圖中的曲線從上到下，Telo7與甲基蓮心 堿的摩爾比分別為0:1、 0.05:1、 0.1:1、 0.25:1、 0.5:1、 1:1、 2:1、 4:1。圖2為Telo7單獨存在時的熔點曲線本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
式（Ⅰ）所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的藥物中的應(yīng)用；　＊＊＊　式（Ⅰ）　式（Ⅰ）中，Ｒ基可以獨立地為氫原子、鹵原子或為含１－１０個碳原子的直鏈或支鏈烷基或酰基。

【技術(shù)特征摘要】
1.式(I)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的藥物中的應(yīng)用；式(I)式(I)中，R基可以獨立地為氫原子、鹵原子或為含1-10個碳原子的直鏈或支鏈烷基或酰基。2、 一種抑制真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的藥物，它的有效成分為權(quán)利要求1所述 的式(I )化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽。3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用或根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物，其特征在于所述真核生物為哺乳動物。4、 根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的應(yīng)用或根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的藥物，其特 征在于所述腫瘤細(xì)胞為癌細(xì)胞；所述癌細(xì)胞為乳腺癌細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞、肝癌 細(xì)胞、胰腺癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、腦癌細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞、子宮癌細(xì)胞、睪丸癌細(xì)胞、 皮膚癌細(xì)胞、白血病細(xì)胞、頭頸癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞、視 網(wǎng)膜癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞、肛門癌細(xì)胞或直腸癌細(xì)胞；優(yōu)選為白血病細(xì)胞、胃癌細(xì) 胞、肝癌細(xì)胞或鼻咽癌細(xì)胞。5、...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：唐亞林，徐筱杰，李騫，向俊鋒，陳麗蓉，周秋菊，
申請(專利權(quán))人：中國科學(xué)院化學(xué)研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：11[中國|北京]