一種丹參藥材的提取方法技術

本發明專利技術屬于醫藥領域，具體地為一種丹參藥材的提取方法，其目的在于解決現有方法所得到的丹參提取物中丹參素含量過低的問題，其中包括將丹參藥材堿提取，過樹脂柱進一步分離，調節ｐＨ值進行精制等步驟，本發明專利技術還提供了由該方法制得的丹參提取物，及由這種提取物制備的制劑。（*該技術在2024年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種中藥材的提取方法，具體涉及中藥丹參的提取方法，本專利技術還公開了由這種方法直接制得的產品及這種產品的藥理作用。
技術介紹
丹參為唇形科鼠尾草植物丹參(Salvia miltiorrhiza Beg.)干燥的根。在我國治療冠心病心絞痛方面，已有近千年的使用歷史，最早記載于東漢的《神農本草經》，并列為上品，具有行氣止痛，寧心安神，清熱涼血，活血化瘀等功效。自上世紀以來，隨著化學分離手段的不斷發展，以及近代植物化學的悄然興起，人們對丹參的化學成分也有了進一步的研究。研究表明，丹參的活性成分主要有兩類一類是以丹參酮為代表的脂溶性有效部位；另一類則是以丹酚酸為代表的水溶性有效部位。近年來研究認為，水溶性有效成分是活血化瘀的有效成分。例如，丹酚酸A對缺血再灌注引起的心肌細胞損傷有明顯的保護作用，總丹酚酸表現出較強的抗缺血再灌注性心律失常作用；丹酚酸A、丹酚酸B以及總丹酚酸對小鼠腦缺血再灌注引起的腦損傷有保護作用，可以減少腦組織中MDA含量；丹酚酸抗血栓作用；丹酚酸對肝、腎的保護作用；丹酚酸具有很強的抗氧化作用，可以清除超氧陰離子和釋基自由基，抑制脂質過氧化反應，等等。(杜冠華等，基礎醫學與臨床，2000，20(5)10～14)。其中，丹參水溶性成分中有關丹參素(Danshensu)的報道最早，并且它也是迄今為止研究得最為廣泛的具有活性的丹參水溶性成分之一。據臨床報道丹參素具有縮小心肌梗死范圍和減輕病情的作用，觀察結扎免心左前降支1/2處所造成的小范圍心肌梗死，丹參素治療組梗死范圍為4.31％±1.04％。而生理鹽水對照組為11.95％±1.92％，兩組間有明顯的差異。對于結扎免心左的支上1/3處所造成的較大范圍的心肌梗死，對照組梗死范因為17.62％±1.45％，而丹參素治療組11.55％±1.65％，明顯小于對照組，提示丹參素具有明顯縮小心肌梗死范圍和減輕病變程度的作用(楊學文等，丹參素的藥理實驗和臨床觀察，中成藥研究，1981；(2)35～37)。程彰華等(程彰華等，丹參素對微循環障礙和血漿乳酸含量影響的實驗研究，上海醫科大學學報，1987；14(1)25～29)研究發現了丹參素具有改善微循環、抗凝、改善微循環障礙和降低血漿乳酸含量的作用。對靜脈注射高分子右旋糖酐造成家兔微循環障礙或靜注甲腎上腺素(NA)造成小鼠場系膜循環障礙，給予丹參素后可明顯增加兔眼球結膜毛細血管數并降低兔血漿乳酸含量。這表明丹參素具有改善微循環障礙作用，從而改善細胞缺血缺氧所導致的代謝障礙。丹參素能擴張收縮狀態的腸系膜微動脈，加快血液流速，因而消除腸系膜的血液痹滯。除此以外，大量研究表明，丹參素對動脈粥樣硬化有較好的治療作用。因頸動脈硬化而引起缺血的臨床表現為動脈內中膜厚度(1MT)大于1.2mm，經過1～3年的隨訪研究表明，丹參素能使頸動脈異常增厚消退(Mark WJ，et al.Stroke，1993；241979)。目前，丹參水溶性部位的提取方法多為水提后過樹脂柱，例如，Takashi Tanaka等報道的丹參多酚酸鹽的提取方法(Chemical Pharmaceutical Bulletin，1989，37(2)，340～344)，另外，KojiHase等(Planta Medica，1997，63，22～26)、徐亞明等(中國專利CN1247855A，2000年3月公開)、劉平等(中國專利CN1270809A，2000年10月公開)、黎蓮娘等(中國專利，申請號01142288.2，申請日2001年9月)亦采用類似的方法從丹參中提取酚酸類化合物。采用上述方法得到的丹參水溶性有效部位中多以丹酚酸B為主，忽視了丹參中的另一有效成分——丹參素。從上述背景資料中可以看出，自二十世紀八十年代以來，人們對丹參素就已經進行了大量的研究。結果都證實了它是丹參藥材中重要的活性成分之一。如果任意忽視的話，則會對其功效造成了很大的損失。另外，丹酚酸B的水溶性強，脂溶性差，進入機體后不易透過生物膜，影響了藥物的吸收；與之相比，丹參素的性質則有很大的不同。丹參素，又稱D(+)-β-(3，4-二羥基苯基)乳酸，是一種既具有水溶性又具有脂溶性的小分子化合物，具有良好的生物膜透過性，服用后非常有利于其吸收。目前由于分離技術所限，國內的丹參素僅限于作為含有丹參的中成藥中的指標成分的使用，作為從丹參中提取的有效成分，還沒有真正地走向臨床。經過長期摸索，本專利技術專利技術人發現將丹參水提取后，加酸調節pH值，濃縮后，樹脂柱分離，再醇沉，再分離后可以使提取物中丹參素的含量達到90％以上。
技術實現思路
為了解決現有方法得到的丹參提取物中丹參素含量過低的問題，本專利技術的專利技術人經過長期研究，獲得了一種新的丹參藥材提取方法，與現有提取方法相比，利用本專利技術方法得到的丹參提取中丹參素的含量可以達到50％以上。本專利技術的另一目的在于提供了一種由上述方法制得的丹參提取物。本專利技術一種丹參藥材提取方法的技術方案主要由以下步驟組成1.取丹參藥材，粉碎，堿水提取；2.濃縮步驟1中得到的提取液，加酸調節pH值，濃縮；3.上述濃縮液加入醇進行沉淀，濃縮；4.上述濃縮液經色譜柱分離，水洗脫，棄去，繼續洗脫，收集洗脫液；5.上述洗脫液進一步采用色譜柱分離純化，水洗脫，收集洗脫液，濃縮；6.將上述濃縮液加入無機堿調節PH，濃縮，得到具有丹參提取物粗品；步驟1的主要目的在于初步分離出含有丹參水溶性成分的提取液，采用過濾、自然沉降或離心等方法除去提取液中的固體雜質；其中，加入的堿溶液提取為無機堿或有機堿，無機堿如碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鈣或氫氧化鉀等，有機堿包括各種具有堿性的化合物，優選為碳酸氫鈉，優選濃度為0.3～0.6％；所述調節的PH優選范圍7～10；所述提取方法為浸漬法、滲漉法、酶提取法、超聲法或微波萃取法提取等。步驟2中的濃縮可以采用減壓或常壓濃縮等方法，所加入的酸可以為無機酸或有機酸，無機酸如鹽酸、硫酸或硝酸等，有機酸如甲酸、乙酸等，優選為鹽酸，優選濃度為1～2％；所述調PH范圍1～6，優選PH為2；濾液濃縮至密度1.05～1.1(溫度55-60)，優選1.08(溫度55-60)。步驟3中所述酸化液體的醇沉為加入95％乙醇使醇濃度達到40～60％，優選濃度為50％；低溫或常溫靜置12-24小時，優選18小時；采用過濾、自然沉降活離心方法除去提取液中的固體雜質；上清液減壓濃縮。步驟4中分離采用的色譜柱為非極性或弱極性的大孔樹脂，如D101、AB-8或ZTC等，優選AB-8型大孔樹脂；洗脫樹脂柱，首先使用樹脂柱體積2.5～5倍的水進行洗脫，棄去以除去雜質，優選體積為樹脂柱體積的4倍，接下來所收集洗脫液的體積為樹脂體積的2.5～5倍，優選4倍。步驟5中采用聚酰胺色譜柱為分離介質；上柱樣品(以原藥材干重計算)與聚酰胺之比為3∶0.5～3(W∶W)，優選2∶1(W∶W)。步驟6中無機堿如碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鈣、氫氧化鉀等，優選為氫氧化鈉，濃度為0.1～1mol/L，優選為0.5mol/L；所述調節的PH范圍6～7，優選6.5。為了在提取物中獲得更高含量的丹參素，還可以加上步驟7進行結晶。其中采用乙醇為溶劑，進行熱溶冷析法結晶，所述具體操作為取濃度95％或以上的乙醇加熱直至全本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種丹參藥材的提取方法，主要由下列步驟組成：ａ．取丹參藥材，粉碎，堿水提取；ｂ．濃縮步驟１中得到的提取液，加酸調節ｐＨ值，濃縮；ｃ．上述濃縮液加入醇進行沉淀，濃縮；ｄ．上述濃縮液經色譜柱分離，水洗脫，棄去，繼續洗脫，收集洗脫液；ｅ．上述洗脫液進一步采用色譜柱分離純化，水洗脫，收集洗脫液，濃縮；ｆ．將上述濃縮液加入無機堿調節ＰＨ，濃縮，得到具有丹參提取物；。

【技術特征摘要】
1.一種丹參藥材的提取方法，主要由下列步驟組成a.取丹參藥材，粉碎，堿水提取；b.濃縮步驟1中得到的提取液，加酸調節pH值，濃縮；c.上述濃縮液加入醇進行沉淀，濃縮；d.上述濃縮液經色譜柱分離，水洗脫，棄去，繼續洗脫，收集洗脫液；e.上述洗脫液進一步采用色譜柱分離純化，水洗脫，收集洗脫液，濃縮；f.將上述濃縮液加入無機堿調節PH，濃縮，得到具有丹參提取物；2.權利要求1所述的方法，其中還包括將步驟f中得到的粗品進行結晶。3.權利要求2所述的方法，其中結晶采用的溶劑為乙醇，濃度為95％；冷卻溫度為4℃。4.一種權利要求1的方法，其中步驟d與步驟e的順序進行調換。5.權利要求1、2所述的方法，其中步驟a中加入的堿水提取為無機堿或有機堿的水溶液，選自下列一種或一種以上碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鈣或氫氧化鉀，濃度為0.3～0.6％；所述調節的PH范圍7～10；提取方法為選自浸漬法、滲漉法、酶提取法、超聲法或微波萃取法。6.權利要求5所述的方法，其中的無機堿為碳酸氫鈉。7.權利要求1、2所述的方法，其中步驟b中的濃縮采用減壓或常壓濃縮法，所加入的酸為無機酸或有機酸，選自下列一種或一種以上鹽酸、硫酸或硝酸，有機酸如甲酸、乙酸、高氯酸等，濃度為1～2％；所述調PH范圍1～6，；濾液濃縮至溫度在55～60℃下相對密度為1.05～1.1。8.權利要求...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張文生，
申請(專利權)人：天津天士力制藥股份有限公司，
類型：發明
國別省市：12[中國|天津]